钱凯
- 作品数：7 被引量：18H指数：2
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- 松墨天牛OBP基因MaltOBP2和MaltOBP6的克隆、序列分析及组织表达谱和原核表达研究被引量：14
- 2015年
- 【目的】本研究旨在探索松墨天牛Monochamus alternatus Hope在嗅觉识别寄主植物过程中扮演重要角色的气味结合蛋白(odorant binding proteins,OBPs)的结构及功能。【方法】利用生物信息学方法对得到的Malt OBP2和Malt OBP6基因序列和蛋白结构进行分析,并通过实时荧光定量PCR分析Malt OBP2和Malt OBP6在松墨天牛雄虫不同组织和时空中的表达差异,利用p ET32a(+)原核表达载体对Malt OBP2和Malt OBP6进行了诱导蛋白表达。【结果】本研究得到两个松墨天牛气味结合蛋白基因——Malt OBP2(Gen Bank登录号:KP120891)和Malt OBP6(Gen Bank登录号:KP120892),ORF长度分别为402 bp和408 bp,翻译的氨基酸序列均含有4个保守的半胱氨酸位点,表明得到的两个OBP基因的编码蛋白均属于Minus-C OBP亚家族;推导的两个OBP蛋白均有6个α螺旋区域,且α螺旋区域在两个蛋白的位置非常相似,但是两个OBP蛋白推测的配体结合位点和位点极性却完全不同。组织表达模式表明,Malt OBP2和Malt OBP6在成虫头部、触角、下颚(唇)须、腹部末端和足中均有表达,表达程度不一,但都在头部显著表达,触角中的表达量相比其他组织中较低或只是持平。发育表达结果表明,Malt OBP2在蛹触角中的表达量最高,而Malt OBP6在幼虫头部的表达量最高。本研究成功构建了原核表达载体p ET32aMalt OBP2和p ET32a-Malt OBP6,并进行了OBP蛋白诱导表达,低温(16℃和20℃)条件利于蛋白表达在上清液中,延长诱导表达时间(12 h)可以增加蛋白的表达量。【结论】本研究从松墨天牛体内得到了Minus-C OBP蛋白亚家族的两个基因Malt OBP2和Malt OBP6,通过配体结合位点推测它们具有不同的生理功能;通过组织表达谱结果推测这两个OBP基因在松墨天牛中的功能不仅仅局限于嗅觉识别,或还有味觉感受、化学感受等其他生理功能。本研究结果为两个OBP蛋白的结构和功能研究奠定了基础,为探索�
- 钱凯冯波巫诩亮劳冲沈幼莲杜永均
- 关键词：松墨天牛气味结合蛋白组织表达谱蛋白结构
- 斜纹夜蛾嗅觉反应昼夜节律及其调控机制被引量：1
- 2017年
- 目的:研究斜纹夜蛾嗅觉反应的昼夜节律和调控机制,为更有效的防治提供新的思路和方法。方法:通过测定多种寄主植物气味化合物和性信息素在昼夜8个不同时间点下的斜纹夜蛾触角电位(EAG)反应,发现斜纹夜蛾的EAG反应昼夜节律并筛选出斜纹夜蛾EAG反应最为强烈的化合物,进一步通过风洞技术测定黑暗期5个不同时间点斜纹夜蛾对这些化合物的行为反应,验证其行为昼夜节律;同时通过RT-qPCR技术检测多个调控昼夜节律的时钟基因和嗅觉受体基因在昼夜各个不同时间点的表达水平差异。结果:斜纹夜蛾雄虫对所有测试植物气味化合物和性信息素的EAG反应都表现出双峰模式,即都在黑暗之后3h和9h的反应最为强烈,并筛选出斜纹夜蛾最为敏感的5种化合物:Z9E12-14:OAc、Z9E11-14:OAc、石竹烯、芳樟醇和苯乙醛。斜纹夜蛾在黑暗期5个时间点对这5种化合物行为反应也表现出与EAG反应相类似的夜间节律。从基因表达水平来看,大部分嗅觉受体基因和时钟基因都在黑暗之后3h和(或)9h表达水平达到最高峰值。结论:斜纹夜蛾的嗅觉反应昼夜节律与嗅觉基因和时钟基因表达的昼夜节律大体上是一致的,表明斜纹夜蛾的嗅觉反应节律可能都是由这些时钟基因和嗅觉基因在其体内进行表达调控的。
- 林慧玥钱凯白家秀张道根鲁瑞万新龙
- 关键词：斜纹夜蛾昼夜节律触角电位风洞RT-QPCR
- 新式气流刺激装置
- 本实用新型涉及一种新式气流刺激装置，属于电生理实验技术领域，本实用新型包括：分流管、多个滴管、多个滤纸条、巴斯德管；分流管设置有副进气口以及多个分流口，多个分流口与多个滴管一一连通，多个分流口上均设置有阀门；多个滤纸条一...
- 钱凯万新龙
- 文献传递
- 一种可荧光示踪的心肌细胞核酸适配体及其制备方法和应用
- 本发明提供了一种可荧光示踪的心肌细胞核酸适配体及其制备方法和应用，属于生物大分子功能化修饰领域。本发明采用荧光金团簇对心肌细胞核酸适配体进行荧光修饰得到；所述荧光金团簇为Au<Sub>22</Sub>，所述心肌细胞核酸适...
- 李磊李烨莹丁佳罗钱凯郭佳敏金梦珊陈李天徐晨箫苏宇林振坤
- 玉米桃蛀螟雌蛾性信息素的微量组分鉴定及其性信息素诱芯组分的配比优化被引量：3
- 2018年
- 【目的】明确为害玉米的桃蛀螟Conogethes punctiferalis雌蛾性信息素完整组成以及嗅觉反应特点。【方法】采集为害玉米的桃蛀螟性成熟雌蛾,利用气质联用仪(GC-MS)对其性腺提取物和合成标样进行比较分析,触角电位(EAG)记录技术测定和分析嗅觉反应,并结合2014年在四川和山东进行的田间诱捕比较试验筛选出最佳性信息素混合物。【结果】E10-16∶Ald为玉米桃蛀螟雌蛾性信息素主要组分,同时还检测到微量的Z10-16∶Ald和Z10-16∶OH。未交配雌蛾对E10-16∶Ald, 16∶Ald,Z10-16∶Ald,Z10-16∶OH和E10-16∶OH这5种性信息素化合物的嗅觉反应不明显,而未交配雄蛾对E10-16∶Ald和Z10-16∶Ald的嗅觉反应强烈,对E10-16∶OH和Z10-16∶OH的嗅觉反应次之。2014年在四川和山东用不同比例的三组分(E10-16∶Ald,Z10-16∶Ald和16∶Ald)和四组分(E10-16∶Ald,Z10-16∶Ald, 16∶Ald和E10-16∶OH)诱芯进行的田间试验中,三组分诱芯中E10-16∶Ald,Z10-16∶Ald和16∶Ald的比例在95∶5∶10时诱虫量最多;四组分诱芯中微量组分Z10-16∶OH在四川未表现出明显的增效作用,而在山东表现出明显的增效作用,以E10-16∶Ald,Z10-16∶Ald, 16∶Ald和E10-16∶OH的比例为95∶5∶10∶5时诱蛾能力最强。【结论】玉米桃蛀螟的性信息素完整组成包括E10-16∶Ald,Z10-16∶Ald, 16∶Ald和E10-16∶OH,其最佳比例为95∶5∶10∶5。
- 徐翔孔德生冯波钱凯杜永均
- 关键词：桃蛀螟EAG性信息素诱芯
- 多通道记录(MR)及其与气相色谱联用技术(GC-MR)在昆虫嗅觉生理上的应用
- 2015年
- 多通道电生理记录(Multiunit recording,MR)和气相色谱(Gas chromatography,GC)-多通道电生理记录(GC-MR)是昆虫化学生态学中研究昆虫对气味化合物神经元反应非常重要和前沿的电生理技术,在研究昆虫对植物气味和性信息素的嗅觉反应机制以及高灵敏性筛选活性化合物等方面具有非常重要的作用。本文介绍这一技术的基本原理、操作步骤和应用实例,并详尽说明了使用中应该注意的事项。
- 万新龙钱凯杜永均
- 松墨天牛OBP基因的组织表达、蛋白结构和原核表达研究
- 目的: 1.RT-qPCR检测OBPs在松墨天牛不同组织不同发育阶段的表达水平，得到组织表达谱用于推断OBP基因在松墨天牛生命周期中发挥的表达调控功能。 2.通过对MaltOBP2和MaltOBP6的序列分析，并预测...
- 钱凯
- 关键词：松墨天牛气味结合蛋白组织表达谱蛋白结构
- 文献传递
