廖科
- 作品数：4 被引量：7H指数：2
- 供职机构：重庆医科大学附属第一医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 磷脂转运蛋白参与烟草提取物诱导的Ⅱ型肺泡上皮细胞凋亡被引量：3
- 2015年
- 目的研究磷脂转运蛋白(PLTP)在烟草提取物对大鼠Ⅱ型肺泡上皮凋亡中的作用。方法体外培养大鼠肺泡上皮RLE-6TN细胞株24 h,分别加入0.5%,1.0%和2.0%烟草提取物共培养24 h或48 h;委托上海吉玛公司合成siRNA-PLTP,并将siRNA-PLTP转染入RLE-6TN中,下调PLTP的表达后,观察烟草烟雾对RLE-6TN细胞凋亡的影响。Hochest染色后观察细胞核的形态学改变;流式细胞术检测细胞凋亡率;蛋白质印迹法(Western blot)检测PLTP的表达量和半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3的活性。结果经不同浓度的(0.5%,1.0%,2.0%)烟草提取物作用后,细胞早期凋亡率由(1.68±0.098)%增加至(18.663±0.964)%(P<0.001);Hoechst染色可见部分凋亡细胞,核发白、固缩、染色质边集等现象;PLTP的表达和caspase-3的活性增加;将PLTP敲降后,可部分逆转烟草提取物诱导的RLE-6TN细胞中caspase-3的活性的增加(P<0.05)。结论 PLTP参与烟草提取物诱导大鼠肺泡上皮细胞的凋亡。
- 廖科陈虹赵绿翠巫凤苹陈亚娟
- 关键词：大鼠肺泡上皮细胞凋亡半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3
- 磷脂转运蛋白在烟草诱导RLE-6TN细胞株发生上皮间质转化中的作用
- 2016年
- 目的探讨磷脂转运蛋白（PLTP）在烟草提取物（CSE）诱导大鼠Ⅱ型肺泡上皮细胞株RLE-6TN发生上皮间质转化（EMT）中的作用。方法体外培养RLE-6TN细胞株24h，分为4组，每组3孔，分别加入0％、0，25％、0．5％和1％CSE培养2d，检测E-钙黏蛋白和波形蛋白mRNA表达以及细胞和CSE共培养3d检测PLTP、EMT相关蛋白（E-钙黏蛋白、N-钙黏蛋白和波形蛋白）的表达量。将siRNA．PLTP转染入RLE-6TN中，Westernblot法检测CSE对转染后PLTP和EMT相关蛋白的影响。结果不同浓度的CSE作用后，E-钙黏蛋白mRNA分别为1．01±0．05、0．74±0．05、0．65±0．03、0．30±0．08，呈浓度依赖下降；波形蛋白mRNA在1％CSE组（1．88±0．49）表达与对照组（1．01±0．20）相比增加。PLTP蛋白含量分别为0．42±0．02、0．89±0．25、1．08±0．18、1．61±0．06；E-钙黏蛋白蛋白含量分别为1．61±0．04、1．08±0．10、0．63±0．08、0．68±0．17；N-钙黏蛋白蛋白含量分别为0．60±0．15、0．57±0．26、0．88±0．30、1．94±0．54；波形蛋白蛋白含量分别为0．61±0．05、0．98±0．16、1．07±0．14、1．34±0。19。1％组与对照组比较差异有统计学意义（均P〈0．05）。siRNA．PLTP和CSE处理细胞后，E-钙黏蛋白蛋白表达量较对照组明显增加（P〈0．05），N-钙黏蛋白和波形蛋白蛋白表达量较对照组明显降低（P〈0．05），siRNA—PLTP可部分逆转CSE诱导RLE-6TN细胞发生上皮间质转化。结论PLTP能促进烟草诱导RLE-6TN发生上皮间质转化。
- 巫凤苹陈亚娟余秀英廖科李丹丹陈虹
- 关键词：上皮间质转化
- 烟草烟雾通过TGF-β1/Smad2通路诱导RLE-6TN发生上皮间质转化被引量：1
- 2016年
- 目的:探讨烟草烟雾提取物(Cigarette smoke extract,CSE)在诱导大鼠Ⅱ型肺泡上皮细胞RLE-6TN发生上皮间质转化(Epithelial-mesenchymal transition,EMT)中的作用及机制。方法:以不同浓度(0.25%,0.5%及1%)CSE刺激RLE-6TN细胞株;TGF-β1受体抑制子(SB431542)预处理后,加入1%CSE共培养。实时定量PCR(RT-PCR)检测E-cadherin和Vimentin RNA表达;印迹法(Western blot)检测TGF-β1、Smad2、磷酸化的Smad2(p-Smad2)、E-cadherin、N-cadherin和Vimentin蛋白的表达量。结果:经不同浓度的CSE作用,E-cadherin无论是在RNA还是在蛋白水平表达均下调,而Vimentin表达均上调;同时,TGF-β1、p-Smad2和N-cadherin蛋白表达量增加;TGF-β1受体抑制子(SB431542)干预后,p-Smad2表达量明显降低(P<0.05),E-cadherin蛋白表达量较对照组明显增加(P<0.05),N-cadherin和Vimentin蛋白表达量较对照组明显降低(P<0.05)。结论:CSE可能通过激活TGF-β1/Smad2信号通路,参与调节E-cadherin、N-cadherin和Vimentin蛋白的表达,从而诱导RLE-6TN发生EMT。
- 巫凤苹陈虹余秀英廖科张慧张露陈亚娟
- 关键词：上皮间质转化TGF-Β1
- 烟草烟雾提取物通过TGF-β1/Smad2通路诱导RLE-6TN细胞凋亡被引量：3
- 2015年
- 目的研究烟草烟雾提取物(cigarette smoke extract,CSE)对体外培养的大鼠Ⅱ型肺泡上皮细胞凋亡的影响,探究其潜在机制。方法体外培养大鼠肺泡上皮RLE-6TN细胞株24 h,分别加入0.5%、1.0%、2.0%CSE共培养48 h;转化生长因子-β1(TGF-β1)受体抑制剂(SB431542)500 nmol/L作用RLE-6TN细胞株24 h后,加入2.0%CSE共培养48 h。Hoechst染色后观察细胞核的形态学改变;流式细胞仪检测细胞凋亡率;Western blot检测TGF-β1、p-Smad2和半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3裂解片段(Cleaved Caspase-3)的表达。结果经不同浓度(0.5%、1.0%、2.0%)的CSE作用48 h后,Hoechst染色可见部分凋亡细胞,核发白、固缩、染色质边集等现象;细胞早期凋亡率由(5.270±0.526)%增加至(32.580±0.413)%(P<0.01);TGF-β1、p-Smad2和Cleaved Caspase-3蛋白表达量增加;TGF-β1受体抑制剂(SB431542)干预后,Smad2和Cleaved Caspase-3表达量明显降低(P<0.05)。结论 CSE通过激活TGF-β1/Smad2信号通路,参与调节Cleaved Caspase-3的表达,从而诱导大鼠肺泡上皮细胞的凋亡。
- 廖科陈亚娟赵绿翠巫凤苹陈虹
- 关键词：烟草细胞凋亡
