宋欢
- 作品数:3 被引量:1H指数:1
- 供职机构:中南大学湘雅医学院医学检验系更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金湖南省科技计划项目湖南省科技厅科技计划项目更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学更多>>
- 金黄色葡萄球菌肠毒素C3过表达慢病毒载体的构建及鉴定
- 2016年
- 目的:构建金黄色葡萄球菌肠毒素C3(SEC3)过表达慢病毒载体并体外检测其表达目的基因。方法:聚合酶链反应(PCR)扩增SEC3基因片段;用Age I酶切线性化GV365慢病毒载体,通过连接反应构建GV365-SEC3载体,运用PCR方法鉴定阳性克隆载体;转染293T细胞包装慢病毒,观察细胞荧光及Western blot检测慢病毒载体表达,HIV-1 p24 ELISA法测定慢病毒载体滴度。结果:获得目的基因,并成功构建GV365-SEC3慢病毒载体,通过PCR及DNA测序鉴定,证明GV365-SEC3质粒构建正确;转染293T细胞后可观察到大量荧光细胞,经蛋白电泳得到29 k D大小的蛋白条带,与目的基因蛋白相符合,ELISA检测病毒载体滴度为5×10~8TU/ml。结论:成功构建GV365-SEC3过表达慢病毒载体,为后期研究其体内外对抗肿瘤的作用与机制奠定基础。
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- 关键词:慢病毒过表达
- 兔实验性骨关节炎中6种血清生物标志物的检测被引量:1
- 2015年
- 骨关节炎(osteoarthritis,OA)是一种发病率逐年增高的慢性关节疾病,已成为人类致残的第一大疾病,称为“不死的癌症”。现有的OA诊断方法以临床体征结合影像学检查为基础,不能在关节软骨的组织结构发生不可逆损伤前进行诊断,如能运用有效、廉价和微创的检查手段在有临床症状而未出现影像学改变的人群中筛选出OA早期患者,做到早发现早治疗,就可以延缓甚至逆转疾病的发展,这也是防治OA的重要方法。
- 曹媛媛高戈佘秋凤李玉洁宋欢
- 关键词:骨关节炎生物标志物慢性关节疾病血清影像学检查
- 内皮抑素过表达慢病毒载体的构建及其鉴定
- 2016年
- 目的构建内皮抑素(endostatin,ES)过表达慢病毒载体,并进行鉴定。方法利用载体PUC57-ES构建GV365-ES慢病毒载体,转染293T细胞包装慢病毒,荧光显微镜下观察绿色荧光;Western blot法鉴定表达的目的蛋白;HIV-1 ELISA法检测病毒滴度。结果经PCR及测序鉴定证明慢病毒载体GV365-ES构建正确;转染细胞中荧光显微镜下可见绿色荧光,表达的目的蛋白相对分子质量约23 000;病毒滴度为2.1×10^8 TU/ml。结论已成功构建ES过表达慢病毒载体,为后期该病毒载体治疗实体瘤的观察及其作用机理的研究奠定了基础。
- 杨敏王敏李先平谢益欣李碰玲张婷婷宋欢董智慧
- 关键词:内皮抑素慢病毒