曹金强
- 作品数：12 被引量：53H指数：4
- 供职机构：中国农业科学院蔬菜花卉研究所更多>>
- 发文基金：农业部园艺作物生物学与种质创制重点实验室项目公益性行业(农业)科研专项国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生更多>>
- 检测茄匍柄霉菌的成套试剂及应用
- 本发明公开了检测茄匍柄霉菌的成套试剂及应用。本发明公开的检测茄匍柄霉菌的成套试剂由名称为Stem14‑FIP的单链DNA、名称为Stem14‑BIP的单链DNA、名称为Stem14‑F3的单链DNA、名称为Stem14‑...
- 谢学文李宝聚曹金强石延霞柴阿丽
- 文献传递
- 检测茄匍柄霉菌的引物对及其应用
- 本发明公开了检测茄匍柄霉菌的引物对及其应用。本发明公开的检测茄匍柄霉菌的引物对由名称分别为Stem‑g7F和Stem‑g7R的单链DNA组成；Stem‑g7F为核苷酸序列是序列表中SEQ ID No.1的单链DNA；St...
- 李宝聚谢学文曹金强石延霞柴阿丽
- 我国不同地区番茄主要病毒病种类的分子检测与分析被引量：15
- 2020年
- 为了检测和鉴定我国不同地区番茄上的病毒种类,2015-2018年,在不同蔬菜种植区采集431份番茄疑似感病样品。利用已报道侵染番茄的12种主要病毒的特异性引物对样品进行RT-PCR分子检测与鉴定,结果表明:TYLCV在番茄上普遍存在,检出率为65.20%;而ToCV、TMV、CMV、ToMV、TSWV和PVY侵染番茄相对较少,检出率分别为21.11%,20.19%,17.63%,15.31%,14.15%,11.37%;未检测到TICV、PVX、TYLCVNB和BBWV等病毒。通过对番茄病毒复合侵染现象进行分析发现,病毒复合侵染率达35.73%,其中2种病毒复合侵染现象最多,占复合侵染总比的52.60%;3种病毒复合侵染率占复合侵染总比27.92%;4种及5种病毒复合侵染率略低,分别占复合侵染总比0.65%和18.83%。通过对我国20个地区的番茄病毒进行检测,结果表明,在番茄上检出病毒种类最多的为北京地区,检测到7种病毒,其次是山东地区,检测到5种病毒;河南、甘肃及宁夏地区检测到4种病毒;西藏、河北、浙江、陕西、海南地区检测到3种病毒;四川、天津、黑龙江、山西、内蒙古等检测到2种病毒;其他地区只检测到单一番茄病毒种类。同时根据TYLCV和TSWV部分基因序列构建系统发育树,结果表明,TYLCV北京分离物(MK336782)与中国湖南分离物的亲缘关系最近,TSWV河南分离物(MK318839)与山东分离物的亲缘关系最近。
- 陈利达石延霞谢学文曹金强柴阿丽李宝聚
- 关键词：番茄番茄黄化曲叶病毒复合侵染分子检测
- 利用siRNA高通量测序和RT-PCR技术鉴定引起茄子斑驳紫花病的病毒种类被引量：7
- 2019年
- 为了明确引起茄子斑驳紫花病的病毒种类,利用小干扰RNA(si RNA)高通量测序技术,结合生物信息学方法寻找茄子样本中的病毒序列,发现存在烟草轻型绿花叶病毒(Tobacco mild green mosaic virus,TMGMV)和番茄斑驳花叶病毒(Tomato mottle mosaic virus,ToMMV)。为了验证该结果,对待测样品中TMGMV和ToMMV的外壳蛋白(coatprotein,CP)全长基因进行RT-PCR扩增和系统进化分析,分别得到500bp的TMGMV-CP和482bp的ToMMV-CP特异性条带,与GenBank中TMGMV和ToMMV序列相似性分别达到98%～100%和100%,说明待测样品中确实存在TMGMV和ToMMV。对采自山东、河南、辽宁、河北等地的23份疑似斑驳紫花病茄子样品,分别采用特异性引物524-F/R和ToMMV-F/R进行检测。结果显示,所有样品中均含有TMGMV,20份样品中含有ToMMV,复合侵染检出率为86.96%。对茄子、番茄和辣椒幼苗的致病性检测显示,接种后茄子花表现出与田间相同的症状,茄子、番茄和辣椒的叶片表现典型的病毒侵染症状,在接种发病组织中检测到病毒ToMMV和TMGMV。结果表明,茄子斑驳紫花病样中鉴定出TMGMV和ToMMV两种病毒。
- 柴阿丽陈利达曹金强康华军石延霞谢学文李宝聚
- 抑制南方水稻黑条矮缩病毒非结构蛋白P5-1的表达阻碍病毒在昆虫体内的增殖被引量：3
- 2015年
- 为明确南方水稻黑条矮缩病毒(Southern rice black-streaked dwarf virus,SRBSDV)编码的非结构蛋白P5-1参于SRBSDV在介体白背飞虱体内侵染过程中的作用机制,通过原核表达蛋白制备SRBSDV编码的非结构蛋白P5-1的多克隆抗体,并应用Western blot和免疫荧光标记法检测抗体的特异性,以注射法将来源于P5-1基因的dsRNA(ds P5-1)注入获毒1 d的白背飞虱体内,5 d后通过免疫荧光标记法检测ds P5-1对SRBSDV在白背飞虱体内增殖的影响,同时以注射来源于GFP基因的dsRNA(ds GFP)为对照。结果显示,Western blot和免疫荧光标记分别检测到SRBSDV侵染水稻和白背飞虱表达的P5-1蛋白,表明所制备的P5-1抗体具有特异性。ds GFP处理的对照组白背飞虱带毒率高达81%,而ds P5-1处理的白背飞虱带毒率仅为21%,且P5-1蛋白的表达和SRBSDV在昆虫体内的增殖均受到抑制。表明P5-1蛋白是病毒在昆虫体内增殖的关键因子,可作为阻断病毒在昆虫体内增殖的理想靶标。
- 曹金强王针针陈红燕毛倩卓贾东升魏太云
- 关键词：南方水稻黑条矮缩病毒抗体制备RNA干扰增殖
- 茄匍柄霉菌实时荧光定量PCR检测方法的建立及应用被引量：4
- 2021年
- 为了准确检测病残体内茄匍柄霉菌(Stemphylium solani)DNA含量在土壤内的动态变化,本研究根据三磷酸甘油醛脱氢酶(GAPDH)基因序列,设计并筛选特异性引物Stem-g7F/Stem-g7R,能从靶标基因组DNA中特异性扩增出大小为150 bp的目的片段。建立的Stemphylium solani实时荧光定量PCR(Real-time quantitative PCR, qRT-PCR)检测体系的灵敏度比常规PCR高1 000倍,且特异性良好。标准曲线循环阈值与模板浓度呈良好的线性关系,相关系数为0.992。利用所建立的qRT-PCR方法对病残体进行检测发现,病残体DNA初始拷贝数为3.69×10^(9)拷贝数/g,经过温度27℃、80%湿度下处理30 d病残体DNA含量下降至1.21×10^(6)拷贝数/g,而在温度27℃、20%湿度下含量为1.29×10^(10)拷贝数/g。因此,建立的S.solani的qRT-PCR检测体系具有特异性强、灵敏度高的特点,可以快速准确地定量检测病残体S.solani的含量,为番茄匍柄霉叶斑病的早期预防和流行监测提供有效的技术手段。
- 谢学文陈利达曹金强韩道杰石延霞柴阿丽李磊李宝聚
- 关键词：实时荧光定量PCR病残体
- 检测茄匍柄霉菌的引物对及其应用
- 本发明公开了检测茄匍柄霉菌的引物对及其应用。本发明公开的检测茄匍柄霉菌的引物对由名称分别为Stem‑g7F和Stem‑g7R的单链DNA组成；Stem‑g7F为核苷酸序列是序列表中SEQ ID No.1的单链DNA；St...
- 李宝聚谢学文曹金强石延霞柴阿丽
- 文献传递
- 李宝聚博士诊病手记(九十九) 番茄花叶病毒对番茄茎部和果实危害严重被引量：2
- 2016年
- 番茄在我国乃至世界上都是种植范围最广的蔬菜之一,具有良好的营养价值和经济效益。然而番茄上的病害也有很多,对番茄的生产造成很大的危害。番茄花叶病毒（Tomato mosaic virus,To MV）寄主范围较广,不仅能侵染茄科、十字花科等蔬菜作物,还能侵染花卉和苗木等,对寄主尤其是番茄的危害十分严重。近年来,随着地域交流的加强、番茄品种的多样化以及天气的变化,番茄花叶病毒病的症状也呈现多样化,且危害不减。
- 曹金强柴阿丽谢学文石延霞李宝聚
- 关键词：番茄花叶病毒寄主范围MOSAIC番茄病毒病番茄生产
- 北京地区南瓜病毒病病原种类鉴定被引量：3
- 2018年
- 为明确北京地区南瓜病毒病种类及其主要侵染病原,2016~2017年在北京周边采集疑似感染病毒的南瓜病样84份,并根据南瓜上的6种病毒特异性引物对其进行反转录PCR(RT-PCR)检测。结果表明:共有79份南瓜病样检测显示阳性,其中黄瓜花叶病毒(Cucumber mosaic virus,CMV)的检出率最高,为52.38%;其次是小西葫芦黄花叶病毒(Zucchini yellow mosaic virus,ZYMV)和西瓜花叶病毒(Watermelon mosaic virus,WMV),检出率分别为44.01%、14.29%,其他病毒暂未检出。此外,16.67%的样品受2种病毒复合侵染,CMV和ZYMV复合侵染占7.14%,ZYMV和WMV复合侵染占9.52%。北京地区南瓜上优势病毒种类为CMV,且存在病毒复合侵染现象。
- 陈利达曹金强石延霞柴阿丽谢学文李宝聚
- 关键词：南瓜病毒病
- 利用RNAi技术鉴定SRBSDV在白背飞虱体内增殖的关键因子
- 南方水稻黑条矮缩病毒（Southern rice black-streaked dwarf virus,SRBSDV）是呼肠孤病毒科（Reoviridae）斐济病毒属（Fijivirus）的一个暂定种，由介体昆虫白背飞虱...
- 曹金强
- 关键词：南方水稻黑条矮缩病毒RNAI技术白背飞虱体内增殖
