陈钢
- 作品数：49 被引量：134H指数：6
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- EGFP-N1/hNGFβ逆转录病毒载体的构建及其表达
- 2011年
- 目的构建高表达含人神经生长因子β基因(hNGF-β)的逆转录病毒载体,并检测其在施万细胞中的表达情况。方法从含有hNGF-β的pAAV-SP质粒中克隆出hNGF-β,连接到pEGFP-N1载体中,形成重组逆转录病毒载体pEGFP-N1-NGFβ。用重组体转染施万细胞,经G418筛选出阳性克隆后,用ELISA法检测NGF的表达量。结果 hNGF-β的RT-PCR产物约750bp,双酶切鉴定重组载体为正确重组子。荧光显微镜下观察证实转染的施万细胞表达EGFP,ELISA检测证实转染的施万细胞分泌hNGFβ升高。结论应用体外连接法成功构建了hNGF-β逆转录病毒载体,而且施万细胞能够高效表达NGFβ。
- 陈钢杨彩虹田林强郭风劲陈安民
- 关键词：神经生长因子施万细胞基因表达
- 骨髓间充质干细胞外泌体联合茶多酚治疗大鼠脊髓缺血再灌注损伤
- 2024年
- 背景:研究表明,抑制内质网应激所致的细胞凋亡能够挽救神经部分功能。茶多酚能抑制内质网应激,但是存在生物利用率差不易透血脑屏障等问题,结合外泌体靶向脊髓修复及高效载药,理论上两者结合能够发挥更优的脊髓保护效能。目的:探讨茶多酚联合骨髓间充质干细胞外泌体对脊髓缺血再灌注损伤大鼠神经功能及内质网应激的影响。方法:SD雄性大鼠50只,随机分为假手术组、模型组、茶多酚组、外泌体组、联合治疗组,每组10只,除假手术组外,其余4组制作脊髓缺血再灌注损伤模型,术后2 h经尾静脉注射生理盐水、外泌体、茶多酚、茶多酚+骨髓间充质干细胞外泌体混合液;脊髓损伤后7,14,28 d进行BBB神经功能评分,脊髓损伤后14 d,取脊髓组织进行苏木精-伊红染色、尼氏染色、ATF6和GADD153内质网应激标志物免疫荧光染色。结果与结论:①神经功能评分:与假手术组比较,模型组、外泌体组、茶多酚组、联合治疗组神经功能评分均不同程度下降,术后14 d联合治疗组神经功能评分优于茶多酚组、外泌体组、模型组(P<0.05),术后28 d后联合治疗组神经功能评分优于模型组和茶多酚组(P<0.05);②苏木精-伊红染色和尼氏染色显示:模型组大鼠神经元细胞数量减少,脊髓损伤区域内大量空洞坏死及瘢痕增生,茶多酚组、外泌体组、联合治疗组神经元数量和周边空洞坏死有不同程度改善,联合治疗组改善最为明显;③内质网应激相关蛋白ATF6、GADD153表达:术后14 d联合治疗组GADD153表达低于模型组和茶多酚组(P<0.05),联合治疗组ATF6表达低于模型组、外泌体组和茶多酚组(P<0.05);④结果表明:茶多酚联合骨髓间充质干细胞外泌体能改善脊髓缺血再灌注损伤大鼠的神经功能,可能与抑制内质网应激相关蛋白ATF6、GADD153表达有关。
- 龙智生龚飞鹏温家宾闵欢舒阳赖卓玺陈钢
- 关键词：外泌体间充质干细胞茶多酚内质网应激
- 骨髓间充质干细胞移植治疗大鼠脊髓损伤的神经分化研究被引量：5
- 2015年
- 目的探讨骨髓间充质干细胞(BMSC)对移植脊髓损伤(SCI)模型神经再生修复的作用及其机制。方法 (1)分离原代SD大鼠BMSC;(2)体外诱导BMSC向神经分化,应用免疫荧光技术检测神经诱导分化后的BMSC神经标志Nestin、Neu N的表达;(3)运用改良的Allen撞击装置制备SD大鼠SCI模型,成年雌性SD大鼠12只,随机分组:损伤对照(n=6),BMSC细胞移植组(n=6),并选择在SCI后半小时内在蛛网膜下腔原位移植1×106 BMSC细胞注射治疗,对照组原位注射10μl PBS作为对照。每周对SCI大鼠进行BBB运动功能行为学评价。(4)在治疗后1个月处死SCI大鼠取脊髓样本进行冰冻切片检测Nestin、NeuN神经标记物表达情况,从而评判BMSC对SCI的治疗效果。计量资料结果服从正态分布、方差齐性时,采用t检验;若不服正态分布,采用KruskalWallis H秩和检验。结果 (1)分离的BMSC纯度高、生物学特征稳定。(2)BMSC在体外神经诱导环境下可分化为神经细胞,对比正常对照组,神经诱导组Nestin与Neu N的表达具有统计学差异(t=11.49、6.76,P<0.05)。(3)BMSC移植治疗SCI大鼠运动行为学功能显著改善,移植组比对照组治疗5周后的BBB评分具有统计学意义(t=5.59,P<0.05);损伤导致组织形态学出现脊髓白质灰质结构性损毁,神经细胞大量丢失,而BMSC移植组Nestin、GFAP与Neu N表达细胞均较损伤组差异有统计学意义(t=4.74、6.59、15.46,均P<0.05)。结论 BMSC移植可促进SCI后神经细胞的存活与再生分化,在一定程度上促进SCI脊髓组织功能的恢复。
- 莫翠萍王家传周光前姚晓璐龚飞鹏陈钢
- 关键词：骨髓间质干细胞脊髓损伤神经再生
- 多节段ponte截骨治疗重度脊柱侧凸畸形24例
- 2015年
- 目的:探讨多节段ponte截骨治疗重度脊柱侧凸畸形的临床疗效。方法:将48例重度脊柱侧凸畸形患者按随机数字法分为对照组和观察组,每组各24例,观察和比较两组术前、术后、末次随访时主弯Cobb角、次弯Cobb角、总体平衡,依据SRS-22量表评估患者健康生存质量。结果:与对照组相比,观察组术后及末次随访时主弯Cobb角明显降低(P<0.05),而次弯Cobb角及总体平衡变化不大(P>0.05);与对照组相比,观察组疼痛、自我形象、功能、精神健康评分及生存质量总分比较,差异不大(P>0.05),但观察组患者对治疗满意度评分明显提高(P<0.05)。结论:多节段ponte截骨联合后路全椎弓钉系统三维矫形融合内固定术,能够提高重度脊柱侧凸畸形患者的侧凸矫正率,具有较高的治疗安全性。
- 龚飞鹏陈钢龙智生李宇旭
- 关键词：脊柱侧凸
- 基于网络药理学分析薏苡仁-苍术“异病同治”类风湿关节炎和痛风性关节炎作用机制
- 2024年
- 基于“异病同治”的中医理念,从网络药理学角度,分析了薏苡仁-苍术治疗类风湿关节炎(RA)、痛风性关节炎(GA)的具体机制及作用原理。方法 以中药成分数据库为检索工具,收集薏苡仁-苍术中药化学成分相关结果,并对SwissTargetPrediction数据库上完成对应靶点的预测,建立有效活性成分-靶点网络。经数据库分析掌握RA、GA疾病靶点,活性成分、疾病靶点筛选均在STRING平台完成,并构建PPI网络。GO功能、KEGG通路富集分析在Rx4.0.5软件上进行。结果 筛选最终结果显示,薏苡仁-苍术存在8种活性成分,筛选68个靶点68个;RA、GA疾病靶点分别为4685个、1550个,疾病与药物存在交集的靶点有24个。GO富集结果显示,揭示了1230条与生物过程相关的条目。120条KEGG通路中,与RA、GA相关的有AGE-RAGE、IL-17、Toll样受体信号通路。结论 薏苡仁-苍术药物活性成分参与免疫与炎症调节主要通过对AGE-RAGE、IL-17、Toll样受体等信号通路实现,进而实现对RA、GA的异病同治。
- 龚飞鹏陈钢温家宾龙智生廖观祥
- 关键词：异病同治网络药理学类风湿关节炎痛风性关节炎
- Tet-on调控BMP-2基因表达的腺病毒载体构建
- 2020年
- 目的构建Tet-on调控BMP-2基因腺病毒载体,并对其相关指标进行鉴定,为骨质疏松性骨折的基因治疗提供新的方法。方法以含有目的基因的pDC315-BMP-2质粒为模板,将目的基因克隆至pAdenoX-Tet-On 3G Vector中,构建pAdenoBMP-2-Tet-On表达质粒。将构建的pAdenoBMP-2-Tet-On表达质粒转染Adeno-X 293细胞,完成腺病毒扩增,PCR鉴定扩增产物,并利用Adeno-X Rapid Titer Kit检测病毒滴度。结果酶切及PCR结果显示BMP-2被成功导入Tet-on腺病毒载体中,并成功转染Adeno-X 293细胞,包装及扩增后得到Tet-on调控BMP-2基因的腺病毒载体,滴度为1x1010ifu/ml。结论成功构建了Tet-on调控BMP-2基因的腺病毒载体。
- 温家宾肖裕华陈钢李宇旭龚飞鹏
- 关键词：骨形态发生蛋白腺病毒骨质疏松性骨折
- 髋臼内壁截骨全髋关节置换术治疗髋臼发良不良伴股骨头坏死被引量：3
- 2009年
- 目的探讨髋臼内壁截骨全髋关节置换术在发育不良髋关节髋臼重建中的应用。方法采用结合髋臼内壁截骨术的全髋关节置换治疗髋关节发育不良患者11髋,男7例,女4例,平均年龄56岁,臼杯置于真性髋臼水平,平均随访时间11.7个月。采用改良Harris评分对结果进行评估。术前及随访时进行摄片观察。结果所有人工臼杯均安置于真臼位置,术后随访3个月X线片提示截骨部位均骨性愈合良好,假体无移位,患髋功能良好。结论内壁截骨术有助于将发育不良髋关节的髋臼安置于真臼位置,保留髋臼底部的骨量,避免髋臼外上方植骨的并发症,近期手术效果良好。
- 陈钢陈宗和喻惜华李建飞龚飞鹏李宇旭
- 关键词：髋臼发育不良股骨头坏死全髋关节置换
- 复杂髋臼骨折手术治疗39例分析
- 2008年
- 目的探讨复杂髋臼骨折手术治疗方法,以提高髋臼骨折的治疗水平。方法对39例有移位的髋臼Tile C型骨折,根据骨折类型的不同,分别采用相应最佳的手术入路进行骨折复位,以重建钢板和螺钉进行固定治疗。结果39例均获随访,根据Matta评价髋关节功能,优16例,良16例,可3例,差4例。结论早期手术,正确分析骨折类型及选择恰当的手术入路,必要时使用前后联合入路可提高髋臼骨折的治疗效果。
- 陈钢陈宗和喻惜华李建飞龚飞鹏李宇旭
- 关键词：髋臼骨折骨折固定术切口
- 逆行腓肠神经营养血管蒂岛状皮瓣的临床应用
- 2005年
- 目的 探讨腓肠神经营养血管逆行皮瓣修复足部缺损的临床应用效果。方法 以腓肠神经及其营养血管为蒂, 根据创面大小, 在小腿后侧切取皮瓣, 逆行转移修复足部软组织缺损 18 例, 观察术后皮瓣成活情况。结果 术后18例逆行皮瓣全部成活, 切取的最大皮瓣为10 .5 cm×16 .5 cm。结论 腓肠神经营养血管逆行皮瓣切取简便, 成活率高, 是修复足部软组织缺损的理想供区。
- 周新华阮红波陈安民陈钢梁群
- 关键词：腓肠神经营养血管逆行皮瓣养血腓肠神经营养血管蒂足部软组织缺损岛状皮瓣
- 二甲胺四环素对大鼠脊髓损伤后Bcl-2、Bax和Bcl-xl表达的影响被引量：3
- 2005年
- 目的:探讨二甲胺四环素(minocycline)对大鼠脊髓损伤后神经细胞凋亡和相关因子表达的影响及对损伤脊髓神经功能的保护作用。方法:36只SD大鼠分为4组,空白组只暴露脊髓,不损伤,A、B组及损伤组建立脊髓损伤模型。A、B组分别给予二甲胺四环素和甲基强的松龙腹腔内注射;损伤组和空白组腹腔内注射生理盐水。免疫组化法检测4组大鼠损伤脊髓神经细胞凋亡因子(Bcl-2、Bcl-xl、Bax)的表达;TUNEL标记凋亡细胞。结果:A组的神经功能高于损伤组(P<0.01),与B组差异无显著性意义;损伤组的凋亡阳性细胞多于A、B组(P<0.05);A组Bcl-2阳性表达细胞多于损伤组(P<0.05),而Bcl-xl、Bax表达与损伤组差异无显著性意义。结论:凋亡是脊髓损伤后神经细胞死亡的一种重要方式;二甲胺四环素能上调Bcl-2的表达,改变Bcl-2/Bax的比值,从而抑制脊髓神经细胞凋亡,对损伤脊髓的神经功能有保护作用。
- 陈钢梁群陈安民郭风劲李江林徐卫国游洪波
- 关键词：脊髓损伤二甲胺四环素BCL-2BCL-XLBAX
