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朱真: 作品数：71 被引量：71H指数：4; 供职机构：中国兽医药品监察所更多>>; 发文基金：国家重点实验室开放基金更多>>; 相关领域：农业科学医药卫生生物学更多>>

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14型蓝舌病病毒VP7蛋白原核表达及间接ELISA抗体检测方法的建立被引量：4: 2020年; 为建立蓝舌病(bluetongue,BT)的血清学诊断方法,本研究通过得到14型蓝舌病病毒(bluetongue virus,BTV)的s7基因,并在大肠杆菌表达系统中进行表达,原核表达得到VP7蛋白,并对表达的包涵体VP7蛋白进行纯化,Western blot分析表明,纯化的VP7蛋白具有良好的抗原性。以纯化的VP7蛋白作为包被抗原,建立间接ELISA检测方法。该方法与羊痘阳性血清,羊口蹄疫阳性血清和羊的小反刍兽疫阳性血清均无交叉反应,与中和试验比较,两者符合率为90%,ELISA批内和批间重复性试验显示,D值的变异系数小于10%。说明本方法具有良好的特异性和重复性。本研究在国内首次建立了14型BTV抗体间接ELISA方法,可用于BTV感染的流行病学调查以及疫苗接种动物的抗体水平监测,为以后相关BTV ELISA检测试剂盒研发提供技术平台。; 孙雯张莹辉曹雨朱真杜吉革李启红陈小云姚文生钱莺娟印春生; 关键词：蓝舌病病毒 VP7蛋白原核表达间接ELISA

中国三株牛结节性皮肤病病毒的分离鉴定及其GPCR基因分析: 2024年; 为了解我国牛结节性皮肤病(lumpy skin disease,LSD)田间毒株流行情况及遗传进化情况并观察其生物学特征,本研究对临床疑似发生牛结节性皮肤病的牛皮肤结节样本进行PCR检测、病毒分离、免疫荧光鉴定、电镜观察、GPCR基因测序和遗传进化分析。结果表明:利用原代羊睾丸细胞(PLT)分离得到3株牛结节性皮肤病病毒(LSDV),分别命名为LSDV/Heilongjiang/2022株、LSDV/Jiling/2022株和LSDV/Jiangxi/2022株,对三株病毒进行一步生长曲线测定,前96 h病毒增长速度最快,96~120 h时滴度最高,之后病毒生长速度开始减缓,接种96 h后滴度最高,三株病毒分别可达到10^(6.0)TCID_(50)·mL^(-1)、10^(5.3)TCID_(50)·mL^(-1)和105.1 TCID_(50)·mL^(-1)。透射电镜下病毒粒子呈椭圆形,病毒直径为200~300 nm。将三株病毒GPCR基因序列与中国各地区以及近年其他国家流行毒株进行遗传进化分析,三株分离株与中国各地区毒株均处于同一分支上,说明中国各地区牛结节性皮肤病的流行有很强的相关性。本研究成功从黑龙江、吉林及江西三省牛皮肤结节病料中分离出三株LSDV,丰富了我国LSDV的流行病学及病原学数据,并对LSDV的持续监测与新型疫苗研发工作有参考意义。; 周祉玉杜吉革莘若兰张嘉雯潘晨帆印春生陈小云朱真; 关键词：生物学特征遗传进化分析

一种无毒性气肿疽梭菌基因工程亚单位疫苗用菌种及其应用: 本发明涉及一种无毒性气肿疽梭菌基因工程亚单位疫苗及其应用，本发明制备的无毒性气肿疽梭菌基因工程亚单位疫苗用菌种，系重组表达经过密码子优化的气肿疽梭菌鞭毛蛋白和细胞毒素A重组融合蛋白的大肠杆菌，用该菌种生产的气肿疽梭菌基因...; 杜吉革陈小云刘莹彭小兵薛麒朱真李启红印春生姚文生康凯; 文献传递

产气荚膜梭菌α毒素突变体的表达及免疫保护力评价被引量：8: 2019年; 对已知的产气荚膜梭菌CPA编码基因进行优化设计,同时引入包括第56和130位的天冬氨酸(D)突变为甘氨酸(G),及第275位的酪氨酸(Y)和第336位的天冬氨酸(D)突变为天冬酰胺(N)的4个氨基酸突变,经人工合成获得基因片段Gcpam4。将Gcpam4克隆至原核表达载体pET-30a(+)中进行表达与纯化,获得重组蛋白rCPAm4。利用Western blot方法检测rCPAm4与产气荚膜梭菌A型毒素抗血清的反应性,并采用小鼠检测纯化蛋白的毒力。随后,将rCPAm4与Montanide ISA 201佐剂以1∶1的比例混合乳化制备疫苗,免疫家兔,按照《中华人民共和国兽药典》(2015年版)规定的方法检测兔血清的中和抗体效价。二免后21d,对家兔通过耳缘静脉注射1个家兔MLD剂量的A型产气荚膜梭菌毒素,以检测rCPAm4对家兔的免疫保护效果。结果表明,rCPAm4主要以包涵体的形式表达,且能与产气荚膜梭菌A型毒素抗血清反应;小鼠安全性试验显示,5.5mg/kg剂量的rCPAm4对小鼠仍无致死性;免疫rCPAm4后,每毫升的一免抗血清可中和10～20个小鼠MLD、二免抗血清可中和30～50个小鼠MLD的A型产气荚膜梭菌毒素;1个家兔MLD的A型产气荚膜梭菌毒素攻毒后,对照组家兔100%死亡,免疫组家兔得到了100%的保护。以上结果表明,rCPAm4具有良好的安全性和免疫原性,从而为A型产气荚膜梭菌基因工程亚单位疫苗的研制提供了重要的试验数据。; 杜吉革薛麒朱真李启红印春生姚文生康凯陈小云; 关键词：突变毒力抗原性

改良Frey氏液体培养基质控菌株菌种代次与生长曲线研究: 2016年; 为探究改良Frey氏液体培养基质控菌CVCC2960滑液支原体（以下简称MS）生长规律，本试验首次同时采用CFU计数、CCU测定和pH值测定的方法，比较不同接种浓度、接种体积和不同代次MS生长情况。结果显示：5％与10％接种量的CCU测定结果峰值差异不明显，但5％接种的CFU计数峰值更高，pH下降更慢；1～5代菌在生长曲线各阶段的测定结果均无明显差别；3种不同接种方式的测定结果显示，用0．5mL菌液接种9．5mL培养基的方式更利于MS生长。本试验为改良Frey氏液体培养基的质控标准化提供依据。; 朱真万建青杨挺英康凯; 关键词：滑液支原体传代

羊传染性脓疱病毒TaqMan MGB探针实时荧光定量PCR检测方法的建立及初步应用被引量：8: 2020年; 为建立快速、灵敏的羊传染性脓疱病毒(ORFV)检测方法,本研究利用新一代的TaqMan MGB探针技术,根据ORFV编码F1L蛋白的059基因保守序列设计了1对引物和1条探针,建立了基于羊传染性脓疱病毒059基因的TaqMan MGB探针实时荧光定量PCR检测方法,对该法进行灵敏性、重复性、特异性分析,检测了14份临床样品。结果显示,所建立的方法标准曲线斜率为-3.36,截距为38.36,相关性系数(R2)为0.995,灵敏性在3.2~32 copies/μL之间,组内与组间重复的变异系数均小于1.65%,与常见羊病的病原体无交叉反应,表明所建立的基于ORFV 059基因的TaqMan MGB探针实时荧光定量PCR检测方法适用于羊传染性脓疱病毒的快速检测。; 陈勇李倩琳杜吉革李启红印春生陈小云朱真; 关键词：羊传染性脓疱病毒实时荧光定量PCR

产气荚膜梭菌ε毒素研究进展被引量：3: 2021年; 产气荚膜梭菌是一种重要的人畜共患细菌性传染病病原,在自然界中分布极广,一定条件下可引起多种疾病。该菌常通过其外毒素危害人和动物机体,所产毒素主要有α、β、ε和ι4种外毒素。根据毒素产生的情况,将产气荚膜梭菌分为A、B、C、D、E、F和G 7个型。ε毒素毒力最强,主要由B型和D型菌分泌。论文通过致病机理、病理变化、流行特点及相关疫苗研究方面对产气荚膜梭菌ε毒素研究进展进行综述,以期为产气荚膜梭菌病的防控提供参考。; 朱真郭鑫杜吉革李启红黄小洁李倩琳印春生陈小云; 关键词：产气荚膜梭菌致病特点

一种无毒C型肉毒梭菌基因工程亚单位疫苗及其生产方法: 本发明涉及一种无毒C型肉毒梭菌基因工程亚单位疫苗及其生产方法，本发明制备的无毒性C型肉毒梭菌亚单位疫苗，系采用经过密码子优化、含有麦芽糖蛋白(MBP)标签的肉毒梭菌毒素(BoNTs)重链的无毒区域H<Sub>C</Sub...; 陈小云薛麒刘莹李旭妮杜吉革李启红朱真张莹辉印春生姚文生; 文献传递

一种腐败梭菌α毒素重组亚单位疫苗及其生产方法: 本发明涉及一种腐败梭菌α毒素重组亚单位疫苗及其生产方法。本发明将野生型腐败梭菌α毒素成熟毒素的第54位半胱氨酸突变为亮氨酸，第264位天冬酰胺突变为丙氨酸，第269位组氨酸突变为丙氨酸，第310位色氨酸突变为丙氨酸，获得...; 陈小云杜吉革薛麒朱真王磊印春生李启红康凯姚文生

一种腐败梭菌α毒素基因工程疫苗及其生产方法: 本发明专利制备的腐败梭菌CSA基因工程疫苗，系采用经过密码子优化的，在含有4个氨基酸突变(C54L，N264A，H269A和W310A)的基础上缺失了11个氨基酸(第212位～第222位)的重组腐败梭菌CSA(rCSA<...; 杜吉革陈小云薛麒朱真李启红印春生康凯姚文生; 文献传递

朱真

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