- 骨肉瘤中Wnt抑制因子失活和启动子的异常甲基化
- 2015年
- 背景：Wnt抑制因子1基因启动子甲基化和Wnt信号异常活性降低导致肿瘤的发展。目的：探索Wnt抑制因子1基因启动子甲基化与骨肉瘤发展的关系。方法：收集骨肉瘤组织标本40例和软骨瘤组织标本20例。甲基化特异性PCR检测Wn1抑制因子1启动子甲基化情况。实时反转录PCR测定骨肉瘤和软骨瘤组织标本中Wnt抑制因子1mRNA的表达。结果与结论：与软骨瘤相比，骨肉瘤中wnt抑制因子1mRNA表达水平随病理分化程度的降低而显著下降，Wnt抑制因子1甲基化率增加。甲基化骨肉瘤组织中Wnl抑制因子1mRNA表达水平低于未甲基化骨肉瘤组织。表明Wnt抑制因子1基因启动子甲基化和Wnt抑制因子1mRNA表达下降在骨肉瘤发展中起重要作用。Wnl抑制因子1甲基化可导致mRNA异常表达。这可能是骨肉瘤发展的重要机制。
- 康学华张恒甲朱万平段飞李书忠
- 关键词：骨肉瘤WNT甲基化
- 转入WIF-1或5-氮杂-2’-脱氧胞苷去甲基化抑制骨肉瘤模型鼠的肿瘤生长被引量：4
- 2016年
- 背景:WIF-1是一种抑癌基因,由于启动子过度甲基化从而导致其在大多数肿瘤中的表达下调,而DNA甲基化抑制剂可使一些基因发生去甲基化从而恢复其表达。目的:在骨肉瘤动物模型中转入WIF-1或使用5-氮杂-2’-脱氧胞苷去甲基化处理后,观察瘤体的病理学差异及WIF-1 mRNA和蛋白的表达变化。方法:建立鼠骨肉瘤模型,分为3组,对照组:不做任何处理;5-氮杂-2’-脱氧胞苷组:每只每日注射适量5-氮杂-2’-脱氧胞苷去甲基化剂;WIF-1组:每只每日注射适量Wnt/β-catenin信号转导通路抑制剂WIF-1。用药后第7天开始每7 d称裸鼠体质量,测量肿瘤短径(a)和长径(b),分别计算各组肿瘤的相对体积,计算用药后第7,14,21,28,56天的肿瘤相对增长率。分别于用药后第7,14,21,28,56天5个时间点脱颈处死每组各4只裸鼠,剥取肿瘤组织称瘤质量,对瘤体做病理分析,检测用药第56天3组骨肉瘤组织中WIF-1蛋白、WIF-1 mRNA的表达情况。结果与结论:(1)用药组与对照组相比,第7,14,21,28,56天的裸鼠体质量有所增加,但用药组与对照组之间差异无显著性意义。(2)用药组的肿瘤体积较对照组明显减小,用药组WIF-1 mRNA、WIF-1蛋白表达较对照组均出现不同程度的升高。(3)结果表明WIF-1的启动子区基因甲基化是骨肉瘤发生发展的机制之一,在骨肉瘤动物模型中转入WIF-1或采用5-氮杂-2'-脱氧胞苷去甲基化处理可抑制肿瘤生长。
- 段飞李书忠朱万平康学华张恒甲代胜杰田艳朋
- 关键词：骨肉瘤脱氧胞苷WIF-1动物模型
- 骨肉瘤中WIF-1基因启动子区异常甲基化及mRNA的表达研究
- 目的：WIF-1作为Wnt家族成员之一，通过结合Wnt蛋白来抑制Wnt信号通路的传导，影响细胞内基因表达。本实验通过检测骨肉瘤中WIF-1启动子区甲基化状态及 mRNA的表达水平，探讨两者与骨肉瘤临床病理关系，为骨肉瘤患...
- 康学华
- 关键词：骨肉瘤甲基化状态实时荧光定量RT-PCR
- 文献传递
- 骨肉瘤中WIF-1甲基化及WIF-1、β-catenin蛋白表达的研究被引量：2
- 2015年
- 目的检测骨肉瘤中WIF-1基因启动子区甲基化状态及WIF-1蛋白、β-catenin蛋白表达情况,探讨它们之间的相关性及其与骨肉瘤发生发展的关系,为骨肉瘤的分子靶向治疗提供理论依据。方法收集青岛大学2008年1月至2013年6月骨肉瘤组织50例,并取骨软骨瘤组织30例作为对照,应用甲基化PCR和免疫组化两种方法,检测骨肉瘤组及对照组WIF-1基因启动子区甲基化状态及WIF-1蛋白、β-catenin蛋白表达情况。结果骨肉瘤和骨软骨瘤组织的WIF-1启动子甲基化阳性率分别为70.0%和20.0%,差异具有统计学意义(P<0.01)。WIF-1启动子甲基化阳性率随着骨肉瘤分期的增加而升高。骨肉瘤和骨软骨瘤组织中WIF-1蛋白表达率分别为42.0%和70.0%,两者之间差异有统计学意义(P<0.05),且WIF-1启动子甲基化阳性与WIF-1蛋白表达呈明显负相关(P<0.05)。骨肉瘤和骨软骨瘤组织中β-catenin蛋白表达率分别为70.0%和43.3%,两者之间差异有统计学意义(P<0.05),WIF-1启动子甲基化与β-catenin蛋白表达呈正相关(P<0.05)。结论 WIF-1基因甲基化状态可能抑制了WIF-1蛋白的表达,从而引起β-catenin蛋白在在胞质中异常积聚表达,从而使经典Wnt信号转导通路过度激活,参与细胞的生长、增殖,导致骨肉瘤的发生发展。
- 张恒甲李书忠康学华
- 关键词：骨肉瘤WIF-1Β-CATENIN蛋白免疫组织化学
