白冰
- 作品数:6 被引量:6H指数:2
- 供职机构:广西医科大学更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金国家科技重大专项更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- 基于可变数目串联重复序列的痰液结核分枝杆菌检测方法建立及初步应用被引量:2
- 2016年
- 目的:结核分枝杆菌散在分布重复单位及可变数目串联重复序列( MIRU-VNTR)是一项应用于结核分枝杆菌分子分型的技术,本研究基于该技术旨在建立一种直接应用临床痰液标本检测结核分枝杆菌的实验室方法。方法:根据扩增条件及临床检测的实际需要,优化选择八个 MIRU-VNTR 位点( MTUB21、MTUB04、QUB18、QUB26、QUB11b、MIRU31、MIRU10和MIRU26)作为检测靶标,收集130例肺结核患者和200例非肺结核患者(其他肺部疾病)的痰液样本,分别以传统的罗氏培养法和临床诊断的方法为标准,用MIRU-VNTR分析和荧光定量聚合酶链反应( FQ-PCR )对上述样本进行检测。结果:以罗氏培养法为标准时, MIRU-VNTR 的灵敏度为93.1%,特异度为97.7%;FQ-PCR 检测的灵敏度为94.0%,特异度为96.7%,MIRU-VNTR分析与FQ-PCR检测结果准确度差异无统计学意义(χ2=0.352, P=0.569)。以临床诊断为标准时, MIRU-VNTR分析的灵敏度为86.9%,特异度为100%;FQ-PCR 检测的灵敏度为87.7%,特异度为99.0%,两种方法检测结果准确度差异无统计学意义(χ2=0.030, P=0.862),且MIRU-VNTR分析中未发现假阳性结果。在MIRU-VNTR检测为阳性的结果中,98.2%(111/113)的样本分子编码互不相同,只有1.8%(2/113)分子编码一致(皆为54685538)。结论:应用临床痰液标本建立的基于MIRU-VNTR的结核分枝杆菌快速检测方法有着较好的应用价值。
- 苏敏陈晋白冰黄云秀魏兰刘旻雁陈婷梅
- 关键词:串联重复序列
- 结核杆菌壁脂蛋白调控巨噬细胞信号通路研究进展被引量:2
- 2015年
- 结核病是一种威胁人类公共卫生安全的传染性疾病,据2010年世界卫生组织(WHO)统计,2002~2009年,全球平均每年有200万人左右死于结核病。结核分枝杆菌(MTB)是引起结核病的病原菌,MTB感染人体后主要被巨噬细胞吞噬、清除或者通过凋亡机制被杀灭,那些未被清除的MTB可以长期潜伏在巨噬细胞内导致潜伏感染。
- 白冰梁宏洁苏敏刘旻雁陈晋
- 关键词:结核分枝杆菌脂蛋白信号通路
- 基于核酸扩增技术的分枝杆菌检测及耐药分析技术的发展被引量:1
- 2016年
- 分子生物学的迅猛发展和结核分枝杆菌等多种分枝杆菌基因组序列的破译,使得应用分子生物学方法对结核分枝杆菌复合群(MTBC)进行检测、耐药分析及对分枝杆菌属进行菌种鉴定成为了现实。核酸扩增(NAA)技术是分子生物学研究的基础,近年来,国内外多种基于此技术用于结核病、分枝杆菌病等相关疾病病原菌检测的方法也得到了验证和评估。文章综述了国内外这些方法的发展现状,并对NAA技术在分枝杆菌检测及耐药分析的临床应用可行性进行简评及展望。
- 刘旻雁白冰陈晋
- 关键词:核酸扩增技术结核分枝杆菌分枝杆菌
- Isothermal MTB Test对分枝杆菌临床分离株的快速鉴定被引量:1
- 2015年
- 目的:探讨Isothermal MTB Test(ISO-MTB)对分枝杆菌临床分离株的快速鉴定。方法:将93例已鉴定的分枝杆菌临床分离株纳入ISO-MTB检测,以罗氏培养为金标准分析其结核分枝杆菌(MTB)检测性能,并与结核菌荧光PCR检测法相比较;以测序为金标准分析其非结核分枝杆菌(NTM)检测性能。结果:除4例样本被测为混合菌株,剩余89例样本被用于ISOMTB性能评价:MTB检测的敏感性、特异性、kappa值分别为98.11%、97.22%、0.95,经配对Fisher确切概率法分析,差异无统计学意义(P>0.05),且与结核菌荧光PCR检测法结果完全一致;NTM中鸟型分枝杆菌复合群检测的敏感性、特异性、一致率均为100.00%。结论:ISO-MTB简单、快速,对分枝杆菌的检测性能良好,且可提示混合感染,有望成为分枝杆菌鉴定的临床应用新方法。
- 刘旻雁陈晋白冰苏敏李山
- 关键词:结核分枝杆菌核酸扩增技术
- 结核分枝杆菌脂蛋白G在HEK293T细胞中的表达及纯化
- 2015年
- 目的构建含结核分枝杆菌(MTB)脂蛋白G(Lpr G)基因的真核表达载体pc DNA3.1-His-Lpr G-FLAG,并在HEK293T细胞中表达和纯化Lpr G融合蛋白。方法以MTB H37Rv基因组DNA为模板,用PCR法扩增Lpr G基因,并通过DNA重组构建真核表达载体pc DNA3.1-His-Lpr G-FLAG,酶切鉴定并测序。将重组质粒转染HEK293T细胞后,应用Western blot法检测His-Lpr G-FLAG融合蛋白的表达。利用Ni-NTA金属亲和层析柱从细胞上清和细胞裂解液中纯化融合蛋白His-Lpr G-FLAG,并用SDS-PAGE和Western blot法检测纯化后的蛋白。结果成功构建了pc DNA3.1-His-Lpr G-FLAG的真核表达载体,Western blot结果表明转染质粒后,HEK293T细胞裂解液中检测到目的蛋白,相对分子量(Mr)为27 000。经Ni-NTA金属亲和层析柱纯化后得到高纯度的融合蛋白His-Lpr G-FLAG。结论成功构建并在HEK293T细胞中表达和纯化了His-Lpr G-FLAG融合蛋白。
- 白冰苏敏刘旻雁李泰阶李萌梁宏洁陈晋
- 关键词:结核分枝杆菌基因克隆真核表达纯化
- MTB脂蛋白G在HEK293T细胞中的表达和IL-23R基因多态性与肺结核易感性的研究
- 第一部分、MTB脂蛋白G在HEK293T细胞中的表达 目的:结核病是威胁全球人类公共卫生安全的传染性疾病,结核分枝杆菌是引起结核病的病原菌,脂蛋白在结核分枝杆菌的致病性中起着重要的作用。本研究利用真核表达载体pcDNA...
- 白冰
- 关键词:肺结核脂蛋白真核表达基因多态性
- 文献传递