您的位置： 专家智库 > >

张也

作品数：11 被引量：10H指数：2
供职机构：中国医学科学院北京协和医学院医学生物学研究所更多>>
发文基金：云南省重点新产品开发计划云南省科技计划项目云南省应用基础研究基金更多>>
相关领域：医药卫生农业科学更多>>

合作作者

文献类型

  • 8篇期刊文章
  • 3篇专利

领域

  • 8篇医药卫生
  • 1篇农业科学

主题

  • 9篇病毒
  • 8篇柯萨奇
  • 8篇柯萨奇病毒
  • 6篇免疫
  • 6篇柯萨奇病毒A...
  • 5篇疫苗
  • 2篇疫苗佐剂
  • 2篇体液免疫
  • 2篇佐剂
  • 2篇细胞
  • 2篇免疫应答
  • 2篇免疫原性
  • 2篇免疫佐剂
  • 2篇敏感性
  • 2篇抗体
  • 2篇柯萨奇病毒A...
  • 2篇纯化
  • 1篇单克隆
  • 1篇单克隆抗体
  • 1篇滴度

机构

  • 11篇中国医学科学...

作者

  • 11篇张也
  • 9篇杨婷
  • 9篇谢忠平
  • 9篇岳磊
  • 9篇谢天宏
  • 9篇李华
  • 5篇龙润乡
  • 5篇宋霞
  • 4篇杨蓉
  • 1篇柯华昕
  • 1篇洪超
  • 1篇杨水芝
  • 1篇戴永娟

传媒

  • 3篇中国生物制品...
  • 3篇中国病毒病杂...
  • 1篇实验动物与比...
  • 1篇国际生物制品...

年份

  • 1篇2024
  • 2篇2023
  • 1篇2021
  • 1篇2020
  • 1篇2019
  • 2篇2018
  • 1篇2016
  • 2篇2015
共 11 条 记 录，以下是 1-10
全选 清除 导出
排序方式：
小鼠在柯萨奇病毒A组16型活病毒免疫原性评价中的应用被引量：1
2016年
目的评价小鼠在柯萨奇病毒A组16型（CA16）活病毒感染中免疫原性的应用，为减毒活疫苗研究提供实验数据。方法以不同剂量的CA16活病毒通过皮下、腹腔和肌肉途径接种不同年龄的ICR和BALB／C小鼠，采集初次免疫7d、21d、28d以及加强免疫7d后的血样：通过微量细胞病变中和法检测中和抗体效价，细胞因子ELISA检测试剂盒检测6种细胞因子含量。结果初次免疫后28d，肌肉、腹腔和皮下途径免疫的小鼠血清抗体阳转率分别为83．33％、40．00％和0．00％，抗体几何平均效价（GMT）分别为1：169、1：32和0；加强免疫后，肌肉、腹腔和皮下途径免疫的小鼠血清抗体阳转率均达100％，抗体GMT分别为1：813、l：609和1：32，肌肉和腹腔途径免疫的小鼠血清抗体GMT平均增长4．8倍和19．0倍；加强免疫7d的抗体阳转率达100％；明显高于初次免疫28d和21d；BALB／c小鼠与ICR小鼠相比，前者的中和抗体效价和抗体阳转率明显高于后者，而小鼠年龄对中和抗体效价和抗体阳转率的影响不显著（P〉0．05）；免疫剂量对中和抗体效价和抗体阳转率的影响显著（P〈0．05），高剂量病毒免疫小鼠后中和抗体效价和抗体阳转率明显比低剂量高（P〈0．05）；细胞因子检测结果显示加强免疫7d后的白细胞介素100L-10）和肿瘤坏死因子α（TNF-α）的含量与初次免疫7d的相比显著增加。结论BALB／c和ICR小鼠可做为CA16活病毒免疫原性评价的动物模型，以4～6周龄的BALB/c小鼠最为敏感。
孟华清杨婷谢天宏李华岳磊宋霞张也谢忠平
关键词：免疫原性细胞因子减毒活疫苗
不同灭活剂对柯萨奇病毒A组16型免疫原性的影响被引量：4
2020年
目的评价甲醛及β-丙内酯对纯化柯萨奇病毒A组16型(coxsackievirus A16,CV-A16)灭活效果及免疫原性的影响。方法将制备的CV-A16-168病毒液经浓缩、纯化后,用不同浓度甲醛(1∶400、1∶2000、1∶4000、1∶8000)及β-丙内酯(1∶1000、1∶2000、1∶3000、1∶4000)灭活,CV-A16抗原ELISA检测试剂盒检测抗原含量,确定最适灭活浓度。用1∶4000甲醛及1∶2000β-丙内酯灭活CV-A16-168,按抗原含量分别制备为640和320 U/mL,加入Al(OH)3佐剂,制备灭活CV-A16-168实验疫苗,免疫BALB/c小鼠2次,间隔28 d,于首次免疫后28、35 d采血分离血清,采用体外微量中和试验检测小鼠血清中和抗体效价,流式细胞术检测血清细胞因子水平。将甲醛灭活和β-丙内酯灭活实验疫苗分别腹腔注射5只BALB/c雌鼠和雄鼠2次,间隔28 d,初免后7 d,雌雄小鼠合笼,怀孕后取出单独饲养,待乳鼠出生48 h内,分别用CV-A16-G10株(原型株,A基因型)、CV-A16-154株(B基因型)及CVA16-G20株(B基因型)进行1000 LD50的病毒株颅内注射,观察21 d乳鼠的临床症状及生存情况。结果1∶4000甲醛37℃3 d及1∶2000β-丙内酯4℃24 h均可完全灭活CV-A16-168。小鼠经灭活CV-A16-168实验疫苗免疫后,血清中和抗体阳转率均达到100%,甲醛灭活抗原含量640和320 U/mL组抗体GMT分别为1∶7131.55和1∶5042.77,平均增长42.2和45.3倍;β-丙内酯灭活抗原含量640和320 U/mL组抗体GMT分别为1∶10085.54和1∶6208.38,平均增长42.2和48.5倍;不同灭活剂处理的相同抗原含量间抗体GMT差异无统计学意义(P均>0.05),但组内二次免疫间的抗体GMT差异有统计学意义(P<0.001);甲醛和β-丙内酯灭活实验疫苗免疫小鼠后均诱导产生IFNγ,抗原含量640与320 U/mL组比较,有显著升高(P<0.001)。乳鼠经CV-A16不同基因型毒株攻毒,观察21 d后,全部存活,母传抗体可对不同基因型毒株颅内注射攻毒的乳鼠产生100%的保护。结论1∶4000甲醛及1∶2000β-丙内酯均可完全�
李华岳磊张也杨婷谢天宏何鑫高微捷卫星辰龙润乡杨蓉罗芳宇谢忠平
关键词：柯萨奇病毒A组16型甲醛灭活免疫原性
氯仿抽提纯化CA 16病毒最优条件的筛选
2018年
目的筛选氯仿抽提纯化柯萨奇病毒A组16型(Coxsakievirus A 16,CA16)的最优条件。方法根据《中国药典》三部(2015版)的相关要求,选择病毒感染性滴度、残余蛋白、残余牛血清白蛋白(bovine serum albumin,BSA)、残余卡那霉素及残余氯仿含量等指标,分析氯仿抽提的不同条件及超滤浓缩对纯化产物质量指标的影响。将CA16浓缩病毒液与氯仿按不同体积比进行一抽多洗纯化,分析不同比例氯仿对纯化效果的影响;将CA16超滤浓缩病毒液分别用不同浓度的PBS洗涤,以评价不同离子浓度的PBS洗涤对纯化病毒纯化液质量指标的影响。结果不同浓度的PBS洗涤液、病毒液与氯仿体积比对纯化液病毒感染性滴度均无明显影响,病毒回收率平均为81.7%;随着PBS洗涤次数的增多,洗液中的杂蛋白逐渐减少,氯仿比例及PBS离子浓度对蛋白去除率影响不明显,蛋白去除率均大于82%(82.69%~93.6%),平均去除率88.37%;不同氯仿比例、不同PBS浓度及不同洗涤次数对残余卡那霉素含量无明显影响,结果均低于30 ng/mL,经超滤浓缩后,其含量低于3.0 ng/mL;氯仿抽提纯化残余BSA的去除率可达68.87%,若结合超滤浓缩工艺,残余BSA的去除率可达94.74%;超滤浓缩后纯化病毒液残余氯仿去除率可达98%以上,最终纯化液残余氯仿含量小于6μg/mL。结论氯仿抽提方法结合超滤浓缩可得到符合要求的CA16病毒实验性疫苗。
张也李华杨婷岳磊谢天宏龙润乡罗芳宇杨蓉何鑫谢忠平
关键词：柯萨奇病毒A组16型疫苗
一种柯萨奇病毒A组10型抗原检测试剂盒
本发明提供了一种柯萨奇病毒A组10型抗原检测试剂盒，属于生物检测技术领域。本发明所述试剂盒是基于ELISA方法的检测试剂盒，所述试剂盒含有兔抗CV‑A10多克隆抗体和辣根过氧化物酶标记CV‑A10抗体。该方法在抗原与抗体...
李华谢忠平杨婷谢天宏岳磊向虹张也戴永娟柯华昕卫星辰赵红张宇昊
柯萨奇病毒A组10型免疫荧光检测方法的建立及其在灭活验证中的应用
2023年
目的建立检测柯萨奇病毒A组10型(coxsackievirus A10,CVA10)病毒颗粒的免疫荧光检测方法,使用该方法对病毒的灭活进行辅助验证。方法在非洲绿猴肾细胞(African green monkey kidney cell,Vero)、人恶性胚胎横纹肌瘤细胞(human malignant embryonic rhabdomyoma cells,RD)、非洲绿猴胚胎肾细胞(African green monkey embryonic kidney cells,MA104)三种细胞上检测病毒滴度,绘制滴度曲线确定最敏感细胞;以兔抗CVA10多克隆抗体为一抗、Alexa Fluor®594偶联的山羊抗兔IgG为荧光二抗,对实验条件进行优化,建立检测CVA10的免疫荧光方法,并与灭活验证中细胞盲传实验结果进行比较。结果RD细胞为CVA10最敏感细胞,一抗最佳稀释度为1∶100,二抗最佳稀释度为1∶200。病毒感染RD细胞后24 h可检测到的病毒量下限为50 CCID_(50)/ml,感染4 d时的检测下限为0.5 CCID_(50)/ml。Vero细胞为CVA10的较敏感细胞,相同条件下,病毒感染Vero细胞后24 h可检测到的病毒下限为80 CCID_(50)/ml,5 d时的检测下限为1 CCID_(50)/ml。灭活验证中,免疫荧光结果与细胞盲传实验结果具有一致性。结论成功建立了CVA10的免疫荧光检测方法,该方法可辅助细胞盲传实验进行灭活验证。
张宇昊杨婷李华岳磊向虹谢天宏张也谢忠平
关键词：免疫荧光检测敏感性
CV-A16疫苗候选株 K168-8Ac 低温连续传代效果的评价
2019年
目的通过对柯萨奇A组16型(coxsackievirus A16,CV-A16)K168-8Ac毒株低温连续传代后的生长稳定性和免疫原性进行评价,为柯萨奇A组16型减毒疫苗的研究提供指导。方法用本科室筛选的CV-A16疫苗候选株K168-8Ac在KMB17细胞上32℃连续传代到第80代(P80),从中选取8个代次的病毒P35、P40、P50、P60、P64、P66、P69、P80,分别进行感染性滴度检测,然后用这8个代次的病毒原液分别免疫BALB/c小鼠,初次免疫后60 d进行加强免疫,于初次免疫后28 d、60 d及加强免疫后7 d、21 d进行采血;同时选取第80代的病毒进行10倍系列稀释至10^(-7),分别用原液和10倍系列稀释的8个稀释度的病毒(即7.75 lgCCID_(50)/ml～1.75 lgCCID_(50)/ml)免疫BALB/c小鼠,初次免疫后第28天进行加强免疫,于初次免疫后28 d、加强免疫后7 d、加强免疫后21 d采血,用体外微量细胞病变法进行中和抗体效价检测。结果 K168-8Ac毒株在32℃条件下在KMB17细胞上连续传代后,8个代次的病毒均有较高的感染性滴度,感染性滴度在7.37 lgCCID_(50)/ml～7.75 lgCCID_(50)/ml间波动(平均为7.56 lgCCID_(50)/ml),表明其增殖特性较稳定。8个代次的病毒免疫小鼠后抗体效价及抗体阳转率之间差异均无统计学意义,初次免疫28 d(一次免疫)中和抗体效价GMT仅为1∶27.1(1∶11～1∶64),但初次免疫60 d时GMT比初次免疫28 d增长了2.0倍,达到1∶54.3;加强免疫后7 d、21 d GMT为1∶422.0和1∶1 140.0,分别比初次免疫28 d增长了15.6倍及42.1倍。用P80的病毒以7.75 lgCCID_(50)～1.75 lgCCID_(50)的剂量免疫小鼠,其中和抗体效价随感染剂量的降低而降低;初次免疫后第28天,7.75 lgCCID_(50)及6.75 lgCCID_(50)两个病毒剂量的中和抗体效价GMT分别为1∶32及1∶14,而5.75 lgCCID_(50)以下的剂量全部阴性;加强免疫后7 d及21 d,病毒含量低至4.75 lgCCID_(50)的GMT仍能达到1∶11,但低于3.75 lgCCID_(50)则为阴性,加强免疫后7 d及21 d,平均中和效价均小�
谢天宏宋霞杨婷李华龙润乡岳磊张也何鑫王正鑫谢忠平
关键词：柯萨奇病毒A组16型疫苗感染性滴度
5种不同细胞对柯萨奇病毒A组16型和肠道病毒71型的敏感性研究被引量：1
2015年
目的：评价肠道病毒研究中常用的5种细胞对柯萨奇病毒A组16型（coxsackievirus A16， CA16）和肠道病毒71型（enterovirus 71，EV71）的敏感性，为分离和培养CA16和EV71提供实验室依据。方法用分离的各15株CA16和EV71分别感染 RD、Vero、KMB17、Hep2和L20B细胞，每天观察细胞病变情况，按Karber法计算病毒感染性滴度。采用不同的统计学方法（包括方差分析和卡方检验）比较5种细胞对CA16和EV71的敏感性差异。结果5种细胞的CA16和EV71病毒感染性滴度间的差异具有统计学意义（CA16：F＝18．481，P＝0．000；EV71：χ2＝63．106，P＝0．000）。在5种细胞中，RD细胞对2种病毒的敏感性最高，CA16和 EV71的病毒感染性滴度分别可达7．8和8．2 lgCCID50／ml ，且均于接种细胞后48 h达增殖高峰，第4天进入增殖平台期；2种病毒在 Hep2和L20B细胞中的病毒感染性滴度均较低，CA16分别为5．2和4．2 lgCCID50／ml ，EV71分别为4．9和4．0 lgCCID50／ml ，且2种病毒在接种后第6～7天才达增殖高峰，但仅L20B细胞中的2种病毒于接种后第7天进入增殖平台期；CA16在 Vero 和 KMB17细胞中的病毒感染性滴度分别为6．9和7．3 lgCCID50／ml ，EV71分别为7．1和6．8 lgCCID50／ml ，2种病毒均在接种Vero和KMB17细胞后第3天达到增殖高峰，第5天进入增殖平台期。结论 RD细胞对CA16和 EV71的敏感性最好，其次是Vero和KMB17细胞，而Hep2和L20B细胞并非是分离和培养这2种病毒的理想细胞。
杨婷谢天宏宋霞李华岳磊龙润乡杨蓉罗芳宇朱凡丽张也谢忠平
关键词：肠道病毒属病毒培养细胞系敏感性
一种复合佐剂、含有所述复合佐剂的疫苗及应用
本发明提供了一种复合佐剂、含有所述复合佐剂的疫苗及应用，属于疫苗佐剂制备技术领域。本发明复合佐剂中的多肽佐剂能够有效的促进DC细胞的成熟，对抗原有更好的提呈作用，进而可以有效的提高T细胞免疫应答水平。本发明的复合佐剂在增...
刘野张也
文献传递
柯萨奇病毒A组16型不同纯化方法的比较研究被引量：4
2015年
目的评价不同方法纯化柯萨奇病毒A组16型(Coxsakievirus A 16,CA16)的可行性和有效性。方法将CA16病毒收获液经切向流超滤浓缩后,分别进行离心、氯仿抽提、分子筛和蔗糖垫层/梯度离心,按《中国药典》(三部)(2010版)的检定要求检测不同纯化方法得到的样品,检测指标包括:感染性滴度、抗原含量、蛋白含量、比活性、HPLC纯度、残余牛血清白蛋白、残余抗生素、免疫原性。结果从比活性来看,分子筛纯化法是其他方法的2~21倍,明显优于其他工艺;经HPLC检测,分子筛纯化样品纯度>98%,而其他工艺均在50%以下;分子筛法所得纯化样品中牛血清白蛋白残留量符合《中国药典》要求(<50ng/剂),去除率达99.97%;分子筛法和蔗糖垫层/梯度离心法所得纯化样品中抗生素残留量符合《中国药典》要求(<50ng/剂),分子筛法去除率在80%以上;从免疫小鼠后的抗体阳转率来看,离心和氯仿抽提样品组阳转率为100%,分子筛组为80%,蔗糖离心组为50%;从抗体几何平均滴度(geometric mean titer,GMT)来看,氯仿抽提组最高,为1∶912。结论以Sepharose 6Fast Flow作为层析介质的分子筛法可得到高纯度的CA16病毒,综合分析。
杨婷李华谢天宏杨水芝洪超岳磊朱凡丽张也宋霞龙润乡杨蓉罗芳宇谢忠平
关键词：柯萨奇病毒A组16型纯化方法
一种复合佐剂、含有所述复合佐剂的疫苗及应用
本发明提供了一种复合佐剂、含有所述复合佐剂的疫苗及应用，属于疫苗佐剂制备技术领域。本发明复合佐剂中的多肽佐剂能够有效的促进DC细胞的成熟，对抗原有更好的提呈作用，进而可以有效的提高T细胞免疫应答水平。本发明的复合佐剂在增...
刘野张也
全选 清除 导出
共2页<12>
聚类工具0