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杨延涛

作品数:2 被引量:13H指数:2
供职机构:佳木斯大学更多>>
发文基金:黑龙江省自然科学基金黑龙江省研究生创新科研项目更多>>
相关领域:生物学医药卫生更多>>

文献类型

  • 2篇中文期刊文章

领域

  • 1篇生物学
  • 1篇医药卫生

主题

  • 2篇细胞
  • 2篇APC
  • 2篇HT-29细...
  • 2篇SHRNA
  • 2篇SURVIV...
  • 1篇易感
  • 1篇片段
  • 1篇慢病毒
  • 1篇慢病毒介导
  • 1篇介导
  • 1篇基因
  • 1篇病毒介导

机构

  • 2篇佳木斯大学附...
  • 1篇黑龙江省医院
  • 1篇齐齐哈尔市第...
  • 1篇上海交通大学...
  • 1篇佳木斯大学

作者

  • 2篇袁禧先
  • 2篇杨延涛
  • 1篇王凤荣
  • 1篇葛文松
  • 1篇张爽
  • 1篇薛鸿鹏
  • 1篇程开
  • 1篇朱艳丽
  • 1篇杜井峰
  • 1篇曹锋

传媒

  • 1篇世界华人消化...
  • 1篇医学研究生学...

年份

  • 1篇2016
  • 1篇2015
2 条 记 录,以下是 1-2
排序方式:
Survivin shRNA和APC片段双基因的载体构建及其在HT-29细胞的表达被引量:11
2016年
目的研究表明APC、Survivin 2种基因表达异常在结肠癌的发生发展中具有重要意义。构建Survivin shRNA、APC功能片段双基因共表达慢病毒载体并观察其能否于HT-29结肠癌细胞中成功表达,同时观察其是否能够对结肠癌细胞凋亡产生影响。方法构建3对互补Survivin shRNA片段,从其中筛选出一条最佳干扰shRNA片段,与APC功能片段(aa1020-1698)相连接构建双基因共表达质粒载体。将HT-29细胞分为实验组、空载组、空白组3组,慢病毒对HT-29进行侵染,观察是否有绿色荧光表达及对转染细胞进行realtime PCR、Western blot检测Survivin、APC基因表达水平。通过检测Caspase-3活性来检测细胞凋亡情况。结果 1Real time PCR检测后显示对Survivin基因起到最佳干扰效果的片段为shRNA3序列。2构建出的shRNA载体经过送序验证比对后,3对shRNA序列与最初设计的序列完全相同。在HT-29细胞中可见绿色荧光,实验组Survivin相对含量(31.71±1.49)较空载组(100±0)、空白组(95.12±2.15)明显减少(P<0.05),APC mRNA表达水平较空载组(0±0)、空白组(0.51±0.15)明显增加(P<0.05)。实验组Survivin蛋白相对含量(0.18±0.01)较空白组(0.24±0.04)、空载组(0.22±0.03)明显减少,APC蛋白表达水平(0.147±0.016)较空白组(0.095±0.012)、空载组(0.108±0.015)明显升高(P<0.05)。3实验组凋亡相对比值(0.573±0.050)较空白组(0.390±0.040)、空载组(0.407±0.030)明显增加(P<0.05)。结论成功构建Survivin-shRNA-APC双基因共表达慢病毒载体,并能够在HT-29结肠癌细胞中成功表达,该双基因共表达载体可为后续利用该载体进行基因治疗的基础实验提供材料。
袁禧先段厚羽曹锋杜井峰朱艳丽程开杨延涛
关键词:SURVIVINSHRNA
慢病毒介导Survivin shRNA与结肠腺瘤息肉易感基因片段联合对HT-29细胞的影响被引量:8
2015年
目的:观察Survivin sh RNA、结肠腺瘤息肉易感基因(adenomatous polyposis coli,APC)片段联合对HT-29细胞Survivin表达及细胞增殖的影响.方法:构建Survivin sh RNA慢病毒载体、A P C有效片段慢病毒载体,对H T-29细胞分别采用单慢病毒载体侵染及联合侵染.实验分阴性对照组、空载组、sh RNA组、APC组、sh RNA+APC联合组,对侵染48 h后的HT-29细胞进行real-time PCR、Western blot及CCK8细胞增殖检测,检测Survivin m RNA、蛋白表达水平及对细胞增殖的影响.结果:(1)sh RNA+APC联合组与其余各组相比,Survivin m RNA表达量显著下降(P<0.05);(2)s h R N A+A P C联合组与其余各组相比,其Survivin蛋白抑制率明显高于其余各组(P<0.05);(3)sh RNA+APC联合组与其余各组相比,细胞增殖速度低于其余各组(P<0.05).结论:Survivin sh RNA与APC片段联合能抑制HT-29细胞内Survivin m RNA及蛋白的表达,同时能够抑制细胞增殖能力,并且优于单个基因侵染.
袁禧先隋子奇孙理婷杨延涛张爽薛鸿鹏葛文松王凤荣
关键词:SURVIVINSHRNA
共1页<1>
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