哈斯鲁
- 作品数：2 被引量：3H指数：1
- 供职机构：新疆医科大学第二附属医院更多>>
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- miR-183对滑膜肉瘤细胞株SW982转移潜能及EGR1表达影响研究被引量：3
- 2015年
- 目的探讨微小RNA-183(miRNA-183)对人滑膜肉瘤细胞株SW982转移潜能的影响,并分析miR-183对早期生长反应因子1(early growth response,EGR1)表达影响的研究。方法培养人滑膜肉瘤细胞株SW982细胞,采用脂质体转染方法转染miR-183mimics、inhibitor和negative control,并分为miR-183 mimics模拟物组(mimics组),miR-183inhibitor抑制剂组(inhibitor组),miR-183negative control阴性对照组(NC)以及正常对照组(normal)。流式细胞术检测各组细胞转染效率;MTT法检测各组细胞转染前后细胞增殖率的改变;Transwell实验检验各组转染前后SW982细胞迁移和侵袭能力的变化;蛋白质印迹法检测各组转染前后EGR1蛋白表达量的变化;双荧光素酶报告基因实验验证EGR1是否为miR-183靶基因。结果转染miR-183mimics、inhibitor和negative control后,SW982细胞中miR-183的相对含量明显改变;与正常对照组(1.16±0.52)相比,mimics组(75.30±9.90)miR-183含量明显增加(P<0.001),inhibitor组(0.22±0.09)miR-183含量明显降低(P<0.001),NC组(1.06±0.98)miR-183含量无明显变化,P=0.637。MTT法测得转染后24、48、72和96h,SW982细胞增殖率无明显变化。Transwell实验结果显示,在迁移实验中,mimics组和inhibitor组穿膜细胞数分别为(108.61±4.94)和(54.36±4.03)个,P<0.001。在侵袭实验中,mimics组和inhibitor组穿膜细胞数分别为(79.13±5.77)和(20.87±3.17)个,P<0.001。在EGR1表达分析中,转染48h后mimics组中EGR1的相对表达量(286.59±32.77)较正常对照组(373.00±38.40)明显降低,P<0.001;inhibitor组中EGR1的相对表达量(496.93±42.61)较正常对照组明显增高,P=0.012;双荧光素酶报告基因实验表明,miR-183特异性靶向EGR1基因。结论转染miR-183mimics后,miR-183表达增加,SW982细胞转移潜能增强,EGR1表达降低;转染miR-183inhibitor后,miR-183表达降低,SW982细胞转移潜能降低,EGR1表达增加。EGR1可作为miR-183的潜在靶点。
- 董超周洋锡林宝勒日鲁学良谢鹏鸣哈斯鲁
- 关键词：滑膜肉瘤迁移
