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谭小庆
作品数:
3
被引量:7
H指数:2
供职机构:
重庆医科大学
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发文基金:
重庆市自然科学基金
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相关领域:
生物学
医药卫生
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合作作者
肖虹
重庆医科大学公共卫生与管理学院...
白群华
重庆医科大学公共卫生与管理学院...
曹显庆
重庆医科大学公共卫生与管理学院
韩令力
重庆医科大学公共卫生与管理学院
吴颖
重庆医科大学公共卫生与管理学院...
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还原酶基因
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RED
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FMN
机构
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重庆医科大学
作者
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谭小庆
2篇
白群华
2篇
肖虹
1篇
韩令力
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曹显庆
1篇
贾燕
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邓鹏
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吴颖
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生物技术
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重庆医科大学...
年份
2篇
2014
1篇
2013
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沙雷氏菌CQMUS2铬还原酶ChrT基因的克隆、表达及酶活性的初步研究
目的:从沙雷氏菌(Serratia sp.)CQMUS2中克隆铬还原酶T(Chromate reductase T,ChrT)的全基因序列,构建其原核表达载体pET-28a(+)-ChrT并转化至大肠杆菌E.coli B...
谭小庆
关键词:
酶活性
耐铬沙雷氏菌CQMUS2 FMN_red基因片段的克隆与序列分析
被引量:6
2013年
目的:克隆沙雷氏菌CQMUS2核黄素单核苷酸还原酶(FMN reductase)。方法:用水煮模板法提取沙雷氏菌CQMUS2基因组DNA,根据已知沙雷氏菌AS13 FMN还原酶基因的DNA同源区域,设计1对特异性引物,PCR扩增出沙雷氏菌CQMUS2FMN还原酶基因片段,采用生物信息学软件进行分析。结果:获得一段大小为305 bp的基因片段,开放阅读框为303 bp,编码101个氨基酸残基;该基因核苷酸序列与其他细菌的FMN还原酶基因的同源性均在83%以上,氨基酸序列同源性达89%以上。结论:成功地克隆了沙雷氏菌CQMUS2 FMN还原酶DNA的部分序列,为以后获取FMN还原酶DNA的全长序列及其生物学功能研究提供基础。
谭小庆
白群华
韩令力
曹显庆
肖虹
铬还原酶T体外合成及活性鉴定
被引量:2
2014年
目的:克隆沙雷氏菌CQMUS2中铬还原酶T(Chromate reductaseT,ChrT)的全基因,构建其原核表达载体并转化至大肠杆菌中表达蛋白。分析表达产物的活性。方法:应用PCR技术,以耐铬沙雷氏菌CQMUS2基因组DNA为模板扩增chrT全基因。将该基因连接至表达载体pET-28a(+)并转化进大肠杆菌感受态细胞E.coli BL21(DE3)表达,用酶促反应鉴定重组chrT酶的活性和cr(Ⅵ)还原能力,探索其最适pH和温度。结果:克隆出的chrT全基因长为567bp,编码188个氨基酸,分子量约20kD:IPTG诱导10h后,在大肠杆菌中成功表达了目的蛋白,其碱基序列和分子量与ch门酶一致;纯化后,chrT酶能还原酶促反应体系中的cr(Ⅵ)。使实验组cr(Ⅵ)含量明显低于对照组(P=0.000),其酶活可达997U/L;ChrT酶的最适pH为6.5-7.5,最适温度为37℃。结论:ChrT酶具有cr(VI)还原活性,为进一步研究高效除铬基因工程菌奠定了基础。
谭小庆
邓鹏
吴颖
白群华
贾燕
肖虹
关键词:
克隆
六价铬
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