徐宁
- 作品数：53 被引量：16H指数：3
- 供职机构：中国科学院天津工业生物技术研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金中国科学院“百人计划”天津市自然科学基金更多>>
- 相关领域：轻工技术与工程生物学化学工程农业科学更多>>
- 一株高效利用二氧化碳电合成甲酸的希瓦氏工程菌及构建方法
- 本发明涉及一种高效利用电能驱动CO<Sub>2</Sub>合成甲酸的希瓦氏基因工程菌及其构建方法与应用。所述基因工程菌敲除基因So_3920‑So_3921，So_1776‑So_1778，同时强化表达基因基因So_45...
- 刘君王太林徐宁
- 基于动态调控硫回收利用的L-半胱氨酸工程菌的构建方法与应用
- 本发明属于化合物生物技术生产领域，公开了基于动态调控硫回收利用的L‑半胱氨酸工程菌的构建方法与应用。使用强启动子在基因组上过表达CysM，CysK，EamA，CysE(M201R)，SerA<Sup>△197AA</Su...
- 刘君徐宁魏亮
- 高丝氨酸脱氢酶突变体及其在生产L-高丝氨酸中的应用
- 本发明属于生物工程领域，具体公开酶活提高的高丝氨酸脱氢酶突变体及其在制备L‑高丝氨酸或其衍生物中的应用。所述突变体的氨基酸序列相较于二穗短柄草（Brachypodium distachyon）来源的野生型高丝氨酸脱氢酶，...
- 刘君魏亮徐宁
- 一种代谢工程改造谷氨酸棒杆菌高产L-半胱氨酸的方法
- 本发明所提供的一种代谢工程改造谷氨酸棒杆菌高产L‑半胱氨酸的方法。首先通过敲除L‑半胱氨酸脱巯基酶基因aecD，同时过表达自身的丝氨酸乙酰转移酶基因cysE，获得L‑半胱氨酸积累菌株；然后分别过表达大肠杆菌和拟南芥的丝氨...
- 刘君魏亮徐宁
- 文献传递
- 一种谷氨酸脱羧酶突变体及其在生产γ-氨基丁酸中的应用
- 本发明提供一种催化性能提升的谷氨酸脱羧酶突变体及其应用，所述突变体是来源自巨大芽孢杆菌CICC 10055的野生型谷氨酸脱羧酶SEQ ID NO:1第280位氨基酸由酪氨酸Y突变为甲硫氨酸M得到。通过谷氨酸脱羧酶的活性测...
- 刘君徐宁
- 文献传递
- 谷氨酸棒杆菌人工核糖体结合位点(RBS)文库的建立与应用
- 2023年
- 核糖体结合位点(ribosome binding site,RBS)是一种重要的生物控制元件,是实现基因表达精细调控的重要工具,在微生物代谢工程和合成生物学中具有广泛的应用。谷氨酸棒杆菌(Corynebacterium glutamicum)是一种重要的工业微生物,被广泛应用于多种氨基酸和有机酸的工业化发酵生产。然而目前,关于谷氨酸棒杆菌RBS元件文库的报道仍然较少。该研究基于谷氨酸棒杆菌RBS序列基本特征,设计构建了一个随机RBS文库。利用流式细胞分选技术和96孔板筛选技术,建立了RBS文库高通量筛选方法。通过2步筛选,构建了一个调控范围广,覆盖范围均匀的人工RBS元件文库,调控范围达到29.04倍。利用α-淀粉酶表达系统对构建的人工RBS文库进行测试和表征,结果表明人工RBS文库具有较高的稳定性和通用性。随后该研究将人工RBS文库应用于L-高丝氨酸生物合成途径的调控优化。利用不同强度RBS元件对L-高丝氨酸合成途径关键酶LysCr和Homr进行精细表达调控,获得了具有高效L-高丝氨酸合成能力的最佳组合,L-高丝氨酸产量到达12.7 g/L,比野生型菌株高丝氨酸含量提高了3.6倍。综上所述,该研究构建了一个调控范围广、稳定性高的谷氨酸棒杆菌人工RBS文库,为谷氨酸棒杆菌代谢工程改造和基因精细表达调控提供了有效的控制元件。
- 张悦张继伟吴硕徐宁徐宁刘君
- 关键词：谷氨酸棒杆菌高通量筛选
- 外源精氨酸对谷氨酸棒杆菌在高葡萄糖胁迫下生长和发酵特性的影响被引量：3
- 2017年
- 【目的】探究外源添加不同氨基酸和相容性溶质对谷氨酸棒杆菌(Corynebacterium glutamicum)在高糖胁迫环境下生长的影响及可能的作用机理。【方法】通过在培养基中外源添加各种氨基酸和相容性溶质,研究其对谷氨酸棒杆菌在高葡萄糖和高蔗糖胁迫下生长的影响,并分析添加精氨酸对高葡萄糖胁迫下菌株糖转运和代谢途径中关键酶转录水平的影响,以及对菌株发酵产氨基酸的影响。进一步探究了碱性氨基酸在其它棒状杆菌属中抵御高葡萄糖胁迫的潜在作用。【结果】在高葡萄糖胁迫条件下,外源添加赖氨酸、精氨酸和组氨酸后谷氨酸棒杆菌的生物量分别提高54.7%、50.0%和37.6%;而在高蔗糖胁迫条件下,添加脯氨酸和四氢嘧啶后菌株生物量增加20%以上。进一步研究表明,在高葡萄糖胁迫下,外源添加精氨酸后谷氨酸棒杆菌的葡萄糖利用速率提高约2.5倍,谷氨酸的发酵产量也增加了127.5%。此外,碱性氨基酸对其它4种棒状杆菌也具有一定的渗透保护效应。【结论】精氨酸对谷氨酸棒杆菌在高葡萄糖胁迫下具有良好的渗透保护作用,可能归因于其能促进葡萄糖的转运和代谢能力,同时发现碱性氨基酸的渗透保护效应对棒状杆菌属具有一定的普遍性。
- 吕红芳王浩王浩徐宁鞠建松
- 关键词：谷氨酸棒杆菌精氨酸发酵
- 谷氨酸棒杆菌抗逆工程菌及其在生产酸性生物基化学品中应用
- 本发明公开了一种具有改善抗逆性能的谷氨酸棒杆菌抗逆基因工程菌及其在生产酸性生物基化学品中应用。本发明的基于谷氨酸棒杆菌抗逆工程菌的酸性pH环境转化工艺，具有较高的底物转化率且副产物较少，制备流程简单方便，生产条件温和可控...
- 刘君徐宁
- 谷氨酸脱羧酶突变体及其在制备γ-氨基丁酸中的应用
- 本发明公开了一种酶活提高的谷氨酸脱羧酶突变体及其应用。将来源于巨大芽孢杆菌的谷氨酸脱羧酶编码基因进行定点突变，所获得突变体的催化性能相较于野生型具有明显提升。基于所述突变体构建重组工程菌株，通过全细胞催化法以大宗发酵产品...
- 刘君徐宁
- 文献传递
- 基于动态调控硫回收利用的L-半胱氨酸工程菌的构建方法与应用
- 本发明属于化合物生物技术生产领域，公开了基于动态调控硫回收利用的L‑半胱氨酸工程菌的构建方法与应用。使用强启动子在基因组上过表达CysM，CysK，EamA，CysE(M201R)，SerA<Sup>△197AA</Su...
- 刘君徐宁魏亮
