高庭
- 作品数：5 被引量：2H指数：1
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- HJURP基因表达下调对人胚胎绒毛细胞增殖凋亡作用的研究
- 2016年
- 目的研究HJURP基因的表达下调对人胚胎绒毛细胞增殖、细胞周期和细胞凋亡的影响。方法用CCK8法、Annexin V-EGFP/PI双染法、TUNEL法、Trans Well迁移侵袭实验等方法研究HJURP表达下调对人胚胎绒毛细胞增殖、细胞凋亡及细胞周期的影响。结果 HUJRP基因表达下调后,与对照组比较,明显抑制胚胎绒毛细胞的增殖及迁移侵袭能力。胚胎绒毛细胞的凋亡率为9.87±1.92%增加至,明显高于NS组3.92±1.12%(P<0.01)。对细胞周期的影响表现为G0/G1期阻滞,G0/G1期细胞从42.9±3.12%增加至62.4±1.92%。Trans Well侵袭实验结果显示,实验组穿过Trans Well膜的数目明显少于对照组。结论 HJURP基因的表达下调可以导致人胚胎绒毛细胞增殖抑制,诱导人胚胎绒毛细胞凋亡,使人胚胎绒毛细胞周期阻滞于G0/G1期,推测HJURP基因表达下调与人胚胎自然流产有相关性。
- 薛慧琴高庭朱镭孙夏瑜卢洪涌张玉萍周岩燕美琴祁春茹
- 关键词：凋亡
- HJURP基因缺陷表达的人胚胎绒毛细胞模型的构建与鉴定被引量：1
- 2015年
- 目的构建HJURP基因的RNA干扰慢病毒表达载体并在人胚胎绒毛细胞上鉴定其沉默效率,进而提供HJURP基因缺陷表达的原代胚胎绒毛细胞模型。方法针对目的基因HJURP的序列,按照RNA干扰序列的设计原则,设计合成3个HJURP基因特异性的小分子干扰RNAi靶点,将其合成短发夹RNA(sh RNA)并退火形成双链RNA,克隆至慢病毒载体中形成sh RNA表达载体,通过PCR和测序鉴定获取正确重组载体。将筛选出的重组载体与慢病毒包装质粒共转染293T细胞并测定病毒滴度。随后将其干扰人胚胎绒毛细胞,采用Western blotting和real-Time PCR检测靶基因的沉默效率。结果对重组载体p HBLVU6-Zs Green-Puro进行测序鉴定,证实插入的sh RNA序列无碱基变异。重组慢病毒载体经293T细胞包装后,病毒滴度为108PFU/ml。RNA干扰人胚胎绒毛细胞HJURP基因后,可见感染后内源HJURP的蛋白表达水平显著下降,HJURP m RNA水平明显下降,其中sh RNA1干扰效率大于70%。结论成功构建了HJURP基因的sh RNA慢病毒表达载体,该重组载体可以在细胞水平有效沉默靶基因,为后续研究HJURP基因表达抑制对人胚胎绒毛细胞的增殖凋亡和染色体分离的影响,探索HJURP基因在自然流产发生中的作用机制提供细胞模型。
- 薛慧琴高庭朱镭孙夏瑜卢洪涌张玉萍周岩燕美琴祁春茹
- 关键词：RNA干扰慢病毒
- X染色体短臂重复伴性反转的临床表型和遗传学分析一例被引量：1
- 2015年
- 目的确诊1例女性性反转伴多发畸形患儿的染色体拷贝数变异的性质及来源,分析其染色体变异与表型的相关性。方法首先应用常规G显带分析该例患儿外周血染色体改变,然后应用一种基于高通量全基因组测序的新型染色体畸变检测方法对该例常规核型分析的结果进行精确定位。结果该女性患儿常规核型分析为46,XY,性反转。高通量全基因组测序结果验证了性反转,还发现了Xp22.31 p11.4重复,重复片断大小为29.90Mb。临床表现为智力低下,特殊面容,同时伴有运动发育落后、先天性心脏病及癫痫发作等,外生殖器为女性外观。结论女性46,XY性反转伴有X染色体短臂末端重复可导致患儿出现多发畸形;与传统的细胞遗传学分析方法相比,基于高通量全基因组测序的新型染色体畸变检测方法在染色体异常分析中具有更高的分辨率和准确性。
- 薛慧琴高庭孙夏瑜卢洪涌薛晋杰
- 关键词：智力低下高通量测序性反转
- HJURP基因缺陷表达的人胚胎绒毛细胞模型的构建与鉴定
- 目的:构建HJURP基因的RNA干扰慢病毒表达载体并在人胚胎绒毛细胞上鉴定其沉默效率,进而提供HJURP基因缺陷表达的原代胚胎绒毛细胞模型。方法:针对目的基因HJURP的序列,按照RNA干扰序列的设计原则,设计合成3个H...
- 薛慧琴高庭朱镭孙夏瑜卢洪涌张玉萍周岩燕美琴祁春茹
- 关键词：RNA干扰慢病毒
- 文献传递
- 一例X染色体短臂重复伴性反转的临床表型和遗传学分析
- 目的 明确一例女性性反转伴多发畸形患儿的染色体拷贝数变异的性质及来源，分析其染色体变异与表型的相关性。方法 首先应用常规G 显带分析该例患儿外周血染色体改变，然后应用一种基于高通量全基因组测序的新型染色体畸变检测方法对该...
- 薛慧琴高庭孙夏瑜卢洪涌薛晋杰
- 关键词：智力低下高通量测序性反转
