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雷泽华

作品数：1 被引量：0H指数：0
供职机构：宁夏医科大学基础医学院更多>>
发文基金：国家自然科学基金更多>>
相关领域：医药卫生更多>>

合作作者

文献类型

  • 1篇中文期刊文章

领域

  • 1篇医药卫生

主题

  • 1篇原核表达
  • 1篇重组蛋白
  • 1篇小鼠
  • 1篇胞外区
  • 1篇SLE
  • 1篇FCΓ
  • 1篇FCΓR

机构

  • 1篇宁夏医科大学

作者

  • 1篇杨志伟
  • 1篇曹秀琴
  • 1篇雷泽华

传媒

  • 1篇中华微生物学...

年份

  • 1篇2015
共 1 条 记 录，以下是 1-1
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排序方式：
小鼠FcγR Ⅱb胞外区重组蛋白的原核表达及对小鼠SLE模型的治疗作用研究
2015年
目的构建小鼠Fcγ receptor Ⅱb（FcγR Ⅱb ）胞外区蛋白原核表达载体pET-FcγRⅡb，诱导表达并纯化，观察其在系统性红斑狼疮（SLE）疾病中的预防与治疗作用。方法PCR扩增获得小鼠FcγR Ⅱb 基因，并将其定向克隆至原核表达载体pET-32a（＋），构建原核表达重组质粒小鼠pET-FcγR Ⅱb ，经PCR、限制性内切酶鉴定及测序分析正确后，转化大肠杆菌BL21（DE3），IFFG进行诱导蛋白表达，确定最佳诱导条件，经Western blot鉴定正确后，纯化目的蛋白。ELISA法检测纯化蛋白与小鼠血清中免疫复合物的结合能力。将MRL／lpr SLE小鼠预防组（周龄12周左右）和治疗组（周龄19周左右）各40只随机分成蛋白液60μl（4．8μg）、120μl组（9．6μg）、180μl（14．4μg）组以及对照PBS组4组，每组10只，通过尾静脉注射将蛋白液注射进入MRL／lpr SLE小鼠体内，连续注射4周，每周1次。注射完成后，观察1周并收集血清，用ELISA法对预防组与治疗组SLE小鼠的可溶性FcγR Ⅱb的含量以及小鼠抗双链DNA抗体含量进行检测。结果扩增出了小鼠FcγR Ⅱb基因，成功构建原核表达重组质粒小鼠pET—FcγRⅡb，IPTG诱导表达并纯化出重组蛋白。重组蛋白与小鼠血清具有结合力；预防组和治疗组蛋白组（含60μl、120μl和180μl组）分别与预防对照组和治疗对照组相比可溶性FcγRⅡb含量增加（P〈0．05），蛋白组（含60μl、120μl和180μl组）两两比较，差异有统计学意义（P均〈0．05）；小鼠抗双链DNA抗体含量检测结果显示预防组和治疗组蛋白组（含60μl、120μl和180μl组）分别与预防和治疗对照组相比，小鼠抗双链DNA抗体含量降低（P〈0．05）；预防和治疗蛋白组（含60μl、120μl和180μl组）分别进行两两比较后发现随着蛋白注射剂量的增加，小鼠抗双链DNA抗体含量逐渐降低（P〈0．05）。结论获得重组小鼠FcγR Ⅱb�
雷泽华曹秀琴杨志伟
关键词：SLE
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