陈蕊
- 作品数：8 被引量：34H指数：4
- 供职机构：南京中医药大学第一临床医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金中国博士后科学基金江苏省博士后科研资助计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 宁心痛颗粒抑制HSP60诱导MyD88^(-/-)THP-1细胞炎症反应被引量：1
- 2016年
- 目的利用siRNA沉默THP-1源性巨噬细胞(Mφ)的髓样分化因子88(MyD88)基因表达,论证MyD88在介导重组人热休克蛋白60(rhHSP60)诱导Mφ炎症反应中的作用及益气活血方宁心痛颗粒含药血清的抗炎机制。方法 THP-1细胞诱导分化为Mφ,分为空白对照组、模型组、阴性对照组、RNAi组(MyD88^(-/-)Mφ)、含药血清组、RNAi+含药血清组共6组,荧光定量PCR法测定MyD88基因表达,免疫印迹法测定MyD88及磷酸化核因子κB(p-NF-κB)的蛋白表达,酶联免疫法测定TNF-α、IL-6的含量。结果 1模型组MyD88基因表达升高,与空白对照组相比,差异有统计学意义(P<0.01);RNAi组、含药血清组分别与模型组相比表达均下降,差异有统计学意义(P均<0.01);含药血清可增强siRNA的抑制作用,RNAi+含药血清组与RNAi组相比,差异有统计学意义。2模型组MyD88及p-NF-κB蛋白表达升高,与空白对照组相比,差异有统计学意义(P均<0.01);RNAi组二者表达均下降,与模型组相比,差异有统计学意义;含药血清可增强siRNA的抑制作用,RNAi+含药血清组与空白对照组相比,差异无统计学意义。3模型组TNF-α、IL-6含量升高,与空白对照组相比,差异有统计学意义(P均<0.01);转染MyD88 siRNA可抑制二者升高,RNAi组与模型组相比,差异具有统计学意义(P均<0.01);含药血清单独使用可抑制二者升高,并可增强siRNA的抑制效果,RNAi+含药血清组与RNAi组相比差异有统计学意义(P均<0.01)。结论 MyD88/NF-κB是人热休克蛋白60诱导THP-1源性Mφ发生炎症反应的关键信号通路,宁心痛颗粒含药血清可通过调控该信号通路发挥抗炎作用。
- 高颖陈蕊顾宁何小丽
- 关键词：髓样分化因子88
- 黄芪多糖对THP-1源性巨噬细胞TLR4、Syk、Erk及Paxillin蛋白磷酸化水平与细胞吞噬功能的影响被引量：12
- 2016年
- 目的:观察黄芪多糖对"轻度氧化修饰低密度脂蛋白(mm LDL)-Toll样受体4(TLR4)-巨噬细胞"途径的干预作用,探讨其稳定动脉粥样硬化(AS)斑块、抑制AS进展的分子机制。方法:将THP-1源性巨噬细胞分为空白组,模型组,黄芪多糖低、中、高剂量。采用免疫印迹法检测脾酪氨酸激酶(Syk)、细胞外信号调节激酶(Erk)、桩蛋白(Paxillin)磷酸化水平随时间变化情况,以及不同剂量黄芪多糖对Syk、Erk、Paxillin蛋白磷酸化水平的影响;采用免疫沉淀联合免疫印迹法检测TLR4蛋白磷酸化水平随时间变化情况,以及不同剂量黄芪多糖对TLR4蛋白磷酸化水平的影响;采用中性红吞噬实验检测黄芪多糖对巨噬细胞吞噬功能的影响。结果:TLR4、Syk、Erk、Paxillin分别于15、10、15、30min达到磷酸化水平高峰;与空白组比较,模型组TLR4、Syk、Erk、Paxillin磷酸化水平升高(P<0.05)、细胞吞噬功能增强(P<0.05);与模型组比较,黄芪多糖低、中、高剂量组TLR4、Syk、ERK、Paxillin磷酸化水平降低(P<0.05)、细胞吞噬功能减弱(P<0.05);其中,黄芪多糖高剂量组上述改变明显强于黄芪多糖低、中剂量组(P<0.05)。结论:黄芪多糖可能通过"mm LDL-TLR4-巨噬细胞"途径影响巨噬细胞吞噬功能从而具有稳定AS斑块、干预AS作用。
- 陈蕊高颖顾宁
- 关键词：黄芪多糖脾酪氨酸激酶
- 黄芪多糖对THP-1源性巨噬细胞ⅡTLR4、Syk、Er及Paxillin蛋白磷酸化水平与细胞吞噬功能的影响
- 目的:观察黄芪多糖对'轻度氧化修饰低密度脂蛋白(mmLDL)-Toll样受体4(TLR4)-巨噬细胞'途径的干预作用,探讨其稳定动脉粥样硬化(AS)斑块、抑制AS进展的分子机制.
方法:将THP-1源性巨噬细胞...
- 陈蕊高颖顾宁
- 关键词：黄芪多糖脾酪氨酸激酶细胞吞噬功能
- 文献传递
- 宁心痛颗粒含药血清对THP-1源性巨噬细胞TLR4、Syk、ERK、Paxillin蛋白磷酸化水平与细胞吞噬功能的影响被引量：2
- 2016年
- 目的观察宁心痛颗粒含药血清对"轻度氧化修饰低密度脂蛋白-Toll样受体4-巨噬细胞"途径的干预作用,探讨其稳定动脉粥样硬化(Atherosclerosis,AS)斑块、抑制AS进展的分子机制。方法将THP-1源性巨噬细胞分为空白组、模型组、空白血清组、宁心痛颗粒含药血清组4组。采用免疫印迹法检测脾酪氨酸激酶(spleen tyrosine kinase,Syk)、细胞外信号调节激酶(extracellular regulated protein kinases,ERK1/2)、桩蛋白(Paxillin)磷酸化水平随时间变化情况,以及宁心痛颗粒含药血清对Syk、ERK、Paxillin蛋白磷酸化水平的影响;采用免疫沉淀联合免疫印迹法检测Toll样受体4(Toll like receptor 4,TLR4)蛋白磷酸化水平随时间变化情况,以及宁心痛颗粒含药血清对TLR4蛋白磷酸化水平的影响;采用中性红吞噬实验检测巨噬细胞吞噬功能改变。结果 TLR4、Syk、ERK、Paxillin分别于15,10,15,30min达到磷酸化水平高峰;与空白组相比,模型组及空白血清组TLR4、Syk、ERK、Paxillin磷酸化水平升高、细胞吞噬功能增强(P<0.05);与模型组和空白血清组相比,含药血清组TLR4、Syk、ERK、Paxillin磷酸化水平降低、细胞吞噬功能减弱(P<0.05),但仍高于空白组。结论宁心痛颗粒含药血清可能通过"mm LDL-TLR4-巨噬细胞"途径影响巨噬细胞吞噬功能从而具有稳定AS斑块、干预AS作用。
- 陈蕊高颖顾宁
- 关键词：含药血清脾酪氨酸激酶
- 轻度氧化修饰低密度脂蛋白/Toll样受体4通路与动脉粥样硬化被引量：5
- 2015年
- 轻度氧化修饰低密度脂蛋白(mm LDL)激活巨噬细胞上Toll样受体4(TLR4)、信号转接分子脾酪氨酸激酶(Syk)及其下游信号通路,导致细胞骨架重构、液相摄取增强、活性氧簇产生、炎症因子分泌等,对动脉粥样硬化的发生发展起到了重要的促进作用。故而,该通路中涉及的信号分子或将成为治疗动脉粥样硬化的新靶点。
- 陈蕊高颖顾宁
- 关键词：TOLL样受体4脾酪氨酸激酶巨噬细胞动脉粥样硬化
- 藁本内酯对重组人热休克蛋白60诱导的THP-1源性巨噬细胞炎症反应的作用及机制被引量：9
- 2016年
- 目的 探讨藁本内酯（LIG）对重组人热休克蛋白60（HSP60）诱导的THP-1源性巨噬细胞炎症反应的作用及机制.方法 THP-1细胞经佛波酯诱导分化为巨噬细胞后,以免疫荧光法筛选出髓样分化因子88（MyD88）的siRNA最佳转染浓度.将巨噬细胞分为6组（n=3）,包括空白对照组（siRNA转染试剂）、模型组（siRNA转染试剂＋HSP60 10 mg/L）、阴性对照组（MyD88阴性对照品＋ HSP60 10 mg/L）、RNAi组（MyD88 siRNA＋ HSP60 10 mg/L）、LIG组（siRNA转染试剂＋HSP6010 mg/L＋ LIG 20 mg/L）和RNAi＋ LIG组（MyD88 siRNA＋ HSP60 10 mg/L＋ LIG 20 mg/L）.采用Western blot法检测巨噬细胞中MyD88及磷酸化核因子-κB （p-NF-κB）的蛋白表达水平,采用ELISA法检测细胞培养上清液中的肿瘤坏死因子-α （TNF-α）、白细胞介素-6（IL-6）含量.结果 （1）模型组的MyD88（1.196±0.125比0.341±0.063,P＜0.01）和p-NF-κB（0.817±0.034比0.312 ±0.046,P＜0.01）蛋白相对表达水平均高于空白对照组;RNAi组的MyD88（0.554±0.043）和p-NF-κB （0.538±0.063）蛋白相对表达水平均低于模型组（P均＜0.01）,而高于空白对照组（P均＜0.05）;LIG组MyD88（0.694±0.087）及p-NF-κB（0.669±0.043）蛋白相对表达水平均低于模型组（P＜0.05或0.01）,而高于RNAi组（P均＜0.05）及空白对照组（P均＜0.01）;RNAi＋ LIG组的MyD88（0.409±0.069）和p-NF-κB（0.395±0.046）蛋白相对表达水平均低于模型组（P均＜0.01）及LIG组（P＜0.05或0.01）,与空白对照组比较差异无统计学意义（P均＞0.05）,p-NF-κB蛋白相对表达水平低于RNAi组（P＜0.05）.（2）模型组的TNF-α[（312.24±28.69） ng/L比（5.99±1.03） ng/L,P＜0.01]和IL-6[（233.45±57.77） ng/L比（2.25±0.67） ng/L,P＜0.01]含量均高于空白对照组;RNAi组的TNF-α[（235.66 ±25.12） ng/L]和IL-6[（131.59±13.99） ng/L]含量均低于模型组（P均＜0.01）;LIG组的TNF-α[（258.13 ±44.80） ng/L]和IL-6[（175.9
- 高颖陈蕊顾宁何小丽杨志军左可可
- 关键词：藁本内酯炎症热休克蛋白质类
- 轻度氧化修饰低密度脂蛋白/Toll样受体4通路与动脉粥样硬化
- 氧化修饰低密度脂蛋白(mmLDL)激活巨噬细胞上Toll样受体4(TLR4)、信号转接分子脾酪氨酸激酶(Syk)及下游信号通路,导致细胞骨架重构、液相摄取增强、活性氧簇ROS产生、炎症因子分泌等,对动脉粥样硬化的发生发展...
- 陈蕊高颖顾宁
- 关键词：动脉粥样硬化TOLL样受体4脾酪氨酸激酶
- 藁本内酯抑制rhHSP60诱导THP-1细胞炎症反应及其机理探讨被引量：12
- 2016年
- 目的:观察藁本内酯对人重组HSP60诱导THP-1源性巨噬细胞炎症反应的抑制作用,并从TLR4-My D88-NF-κB信号通路角度探讨其抗炎机理。方法:选择人白血病源性单核细胞系THP-1细胞,经200μg·L-1PMA作用24 h,诱导分化为巨噬细胞。设对照组、热休克蛋白60(10μg·mL^(-1))组、藁本内酯(10、20、40μg·mL^(-1))组、辛伐他汀(15μg·mL^(-1))组,加入热休克蛋白60刺激0、6、12、24 h,ELISA法测定以上不同时间点培养液中的TNF-α、IL-6含量;Western blot法测定藁本内酯(10、20、40μg·mL^(-1))预处理24 h、热休克蛋白60(10μg·mL^(-1))刺激12 h后TLR4、My D88及磷酸化NF-κB(p-NF-κB)的蛋白表达。结果:(1)热休克蛋白60组的TNF-α含量在6 h明显升高,与0 h相比,差异有统计学意义(P<0.01),至12 h含量达高峰,随后开始逐渐下降,24 h与12 h相比差异有统计学意义(P<0.01);热休克蛋白60组的IL-6含量自6 h开始逐渐升高,与对照组相比,差异有统计学意义(P<0.01)。(2)与热休克蛋白60组相比,辛伐他汀组的TNF-α含量在6、12、24 h均下降,差异有统计学意义;藁本内酯20、40μg·mL^(-1)组与热休克蛋白60组比较,在以上三个时间点差异均有统计学意义,与辛伐他汀组比较,差异无统计学意义。(3)与热休克蛋白60组相比,辛伐他汀组的IL-6含量在6、12、24 h均下降,差异有统计学意义;藁本内酯20、40μg·mL^(-1)组与热休克蛋白60组比较,在以上三个时间点差异均有统计学意义,与辛伐他汀组比较,差异无统计学意义。(4)藁本内酯20、40μg·mL^(-1)组与热休克蛋白60组相比,TLR4、My D88及p-NF-κB蛋白明显下降,差异有统计学意义。结论:藁本内酯可抑制热休克蛋白60所导致的TNF-α、IL-6等炎症因子升高,具有一定的抗炎作用,该效应与其抑制TLR4-My D88-NF-κB信号通路激活有关。
- 高颖陈蕊顾宁何小丽
- 关键词：藁本内酯热休克蛋白60髓样分化因子88易损斑块
