王颖奇
- 作品数：4 被引量：1H指数：1
- 供职机构：清华大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金北京市自然科学基金国家科技支撑计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 基于FRET荧光蛋白探针的活体定量分子影像方法探究被引量：1
- 2016年
- 目的荧光共振能量转移(fluorescent resonance energy transfer,FRET)探针由于自身仍存在诸多局限,其在活体成像领域尚未得到广泛应用。本文旨在解决FRET探针在活体定量分子影像应用中所存在的瓶颈问题,即如何利用FRET探针精准计算目标物浓度,以及如何基于FRET探针实现三维成像。方法基于探针和目标物结合时的化学反应平衡关系,提出一种新型分析方法,以精确定量待测物[钙调素(calmodulin,Ca M)]的浓度。同时对于FRET探针的活体分子成像,结合荧光透射成像(3DFMT)方法,建立了可进行三维时空动态FRET检测的平台系统,对FRET探针的测量结果(即待测物浓度)进行实时定量的三维重建。结果准确地定量了待测物Ca M浓度,并得到了高质量的3D-FRET分布影像。结论提出FRET探针在活体成像应用领域两个关键问题的解决方案,为基因编码FRET探针向活体分子影像领域的推广奠定了重要的技术基础。
- 王颖奇唐吉刘晴白净刘晓冬
- 关键词：荧光共振能量转移荧光蛋白钙调素
- 基于遥控机械力的重要生物分子的跨细胞膜导入
- 2016年
- 目的生物医学基础研究及其实践应用日益需要在分子、细胞与系统、活体间建立直接的关联,解决方案之一是利用非接触方式远程控制细胞生命过程,当前受到广泛关注的光基因学等手段即为此方面的重要突破性进展。研究中的核心问题是如何实现在细胞乃至分子水平上对关键生命物质及生物学过程进行远程调控。为此,基于磁场和超声施加机械力,并辅助以超声微泡、磁纳米颗粒以及机械敏感通道,提出实现细胞远程控制的新型解决方案。方法使用超声输出设备对细胞膜周边的微泡施加机械力,以黄色荧光蛋白（yellow fluorescent protein,YFP）标记的DNA作为转基因标记物,测试不同条件下DNA跨膜进入细胞的效率。运用化学合成法合成磁纳米颗粒,使用电磁铁作为磁控系统,利用细胞钙成像实验监测机械力敏感离子通道的开放情况。结果在机械刺激作用下,细胞外液中的YFP质粒可以跨膜进入细胞并有效表达。与细胞共培养的磁纳米颗粒在电磁场的作用下,致使机械敏感离子通道开放、钙离子进入细胞及钙成像荧光上升。结论基于遥控机械力能够实现生物分子跨膜运送的远程控制。通过超声波（强度〉0.6 W/cm2）诱发微泡爆破从而施加机械冲击并在细胞膜上成孔,实现了DNA跨细胞膜导入及有效表达。磁纳米颗粒通过可调控电磁场（18-20 V,〉30 m T）对细胞膜施加机械刺激,通过内源性机械敏感机制引起钙电流及膜兴奋性的增加,从而实现跨膜钙信号的远程控制。
- 胡明峰王颖奇葛琳冯磊李彬杨晟刘晓冬
- 关键词：跨膜运输
- 通过荧光共振能量转移方法原位定量活细胞中的蛋白质‑蛋白质相互作用
- 本发明公开了一种通过荧光共振能量转移方法确定细胞中第一蛋白与第二蛋白是否存在相互作用的方法。该方法包括：(1)在细胞中表达第一融合蛋白和第二融合蛋白，其中，所述第一融合蛋白包括第一蛋白和作为供体的第一可关闭荧光蛋白，所述...
- 刘晓冬唐吉王颖奇
- 文献传递
- 通过荧光共振能量转移方法原位定量活细胞中的蛋白质-蛋白质相互作用
- 本发明公开了一种通过荧光共振能量转移方法确定细胞中第一蛋白与第二蛋白是否存在相互作用的方法。该方法包括：(1)在细胞中表达第一融合蛋白和第二融合蛋白，其中，所述第一融合蛋白包括第一蛋白和作为供体的第一可关闭荧光蛋白，所述...
- 刘晓冬唐吉王颖奇
