王兴丽
- 作品数：13 被引量：41H指数：3
- 供职机构：四川农业大学更多>>
- 发文基金：长江学者和创新团队发展计划四川省科技计划项目四川省科技支撑计划更多>>
- 相关领域：农业科学生物学经济管理医药卫生更多>>
- 一株虹鳟源维氏气单胞菌的分离鉴定及组织病理学观察被引量：17
- 2016年
- 为鉴定一起虹鳟突发疾病死亡的病原，本研究从自然发病虹鳟的内脏分离到一株致病菌WX153415，并对其进行了常规理化特性、分子生物学、人工感染试验和病理学观察以及药敏性检测。结果显示：分离株WX153415为革兰氏阴性短杆菌，其理化特性与维氏气单胞菌（A．veronii）特征相符，并且其16SrDNA基因、gyrB基因、毒力基因act、毒力基因aer和毒力基因aha序列与GenBank中A．vemnii的同源性均可达98％以上，在系统进化树中与A．veronii聚为一族；动物回归试验结果表明，分离株LD50为1．5×10^6cfu／mL；病理学观察显示该分离株主要损伤虹鳟的鳃、肝和肾等重要器官组织，综合检测结果表明该分离株为致病性A．veronii。药敏试验结果显示，分离株对14种抗菌药物中头孢哌酮、哌拉西林、氟苯尼考和头孢呋辛药物敏感。
- 王兴丽汪开毓陈德芳朱劼垚杨倩贺扬王二龙
- 关键词：维氏气单胞菌虹鳟病理学观察
- 四川地区养殖鲑鳟鱼主要流行病害被引量：1
- 2020年
- 一、四川地区鲑鳟鱼养殖概况随着苗种繁育技术的突破和养殖技术的提高,鲑鳟鱼的养殖在四川地区已有十余年的历史,从20世纪90年代开始,依托省内丰富的冷水资源,开始逐步从国内外引进鲑鳟鱼进行养殖,随之获得成功并逐步扩大。四川省内鲑鳟鱼养殖覆盖面大,在四川省都江堰、彭州、崇州、大邑、邛崃、蒲江及凉山、甘孜、阿坝等县(市)均有分布,尤其是以成都市的彭州、都江堰一带形成以休闲渔业为主的良好消费形态,其中以彭州地区“小鱼洞”较为出名。
- 刘家星杨马魏文燕汪开毓李良玉刘韬余泽辉王兴丽
- 关键词：休闲渔业鲑鳟鱼冷水资源
- 斑点叉尾鮰源海豚链球菌Srr蛋白海藻酸钠—壳聚糖口服疫苗的制备及免疫效果评价
- 斑点叉尾鮰是我国主要鱼类养殖品种,近年来的大规模养殖使其养殖环境恶化,疾病频发,而海豚链球菌成为危害斑点叉尾鮰健康的致病菌之一。为了对斑点叉尾鮰海豚链球菌病进行防治,本研究以海豚链球菌Srr蛋白为抗原内芯,利用海藻酸钠-...
- 王兴丽
- 关键词：海豚链球菌口服疫苗免疫效果
- 文献传递
- 再谈抗菌肽及其在水产养殖上的应用(下)被引量：1
- 2018年
- 2.真核系统表达抗菌肽的研究
酵母作为工程菌表达外源蛋白质技术是近年来日益发展的真核表达体系。酵母作为低等真核生物,具有细胞生长快、营养要求低、易于规模化生产、遗传操作简单等特点,能够对表达的蛋白质进行正确加工、修饰及合理的空间折叠,不会产生内毒素,并且一些类型的酵母其表达产物可分泌至胞外,既可以减轻宿主细胞代谢负荷,又可减少宿主细胞蛋白质酶对外源蛋白质的降解,提高表达蛋白质的活性,且可获得较高的表达量,利于表达产物的分离纯化,非常有利于真核生物基因的表达.
- 汪开毓王兴丽杨倩刘韬李良玉魏文燕刘家星
- 关键词：抗菌肽水产养殖宿主细胞规模化生产
- 再谈抗菌肽及其在水产养殖上的应用(中)
- 2018年
- 3.抗菌肽的屏障功能及机制对于水产动物来说,非特异性免疫的重要性远高于特异性免疫,水产动物的屏障作用是保护水产动物生命安全的第一道防线。近年来研究表明,很多水产动物的上皮细胞均可表达抗菌肽,它可以通过多种信号途径参与机体免疫调节,提高角质形成细胞的功能,从而提高机体对病原微生物等致病生物的抵抗能力,抗菌肽在动物黏膜和皮肤防御方面起重要作用。
- 汪开毓王兴丽杨倩刘韬李良玉魏文燕刘家星
- 关键词：抗菌肽水产养殖非特异性免疫水产动物病原微生物角质形成细胞
- 一株虹鳟源维氏气单胞菌的分离鉴定及病理组织学观察
- 王兴丽汪开毓陈德芳朱劼垚杨倩贺扬王二龙
- 斑点叉尾鲖BPI1基因的原核表达及生物信息学分析被引量：1
- 2017年
- 为探究斑点叉尾鲖BPI1抗菌肽基因编码蛋白的结构特征,实验提取斑点叉尾鲖肾脏RNA,根据BPI1基因序列设计引物,利用PCR方法克隆BPI1基因并构建至原核表达载体p TWIN1中。构建成功的重组质粒p TWIN1-BPI1经原核表达,SDS-PAGE检测显示得到约为50 ku的融合蛋白,与预期结果相一致。通过生物信息学软件对BPI1基因编码的蛋白序列进行分析,结果显示,克隆所得斑点叉尾鲖BPI1基因编码一条由223个氨基酸残基组成的多肽,等电点为9.07,属于BPI超家族,是稳定的亲水蛋白。亚细胞定位BPI1分布在线粒体(43.5%)、细胞质(30.4%)和细胞核(26.1%)中,表明BPI1可能在嘌呤和嘧啶合成以及能量代谢等过程中发挥信号转导、促进生长等重要作用。二级结构以α-螺旋和β-折叠为主,三级结构呈棒状。同源性及进化树分析表明,实验所得BPI1基因序列与斑点叉尾鲖BPI抗菌肽基因的同源性最高,序列一致性为99.1%,进化树聚为一支,表明BPI1基因编码的蛋白序列在相同物种中的突变率较低,保守性较高,相同物种中其生物活性与个体间的差异关系较小。
- 王兴丽汪开毓陈德芳朱劼垚杨倩贺扬王二龙
- 关键词：原核表达生物信息学分析
- 鮰爱德华菌外膜蛋白ompN2基因的克隆表达、分子特性与免疫原性分析被引量：2
- 2016年
- 利用特异性引物扩增了分离自斑点叉尾鮰的鮰爱德华菌外膜蛋白ompN2基因并进行分子克隆,应用生物信息学工具对ompN2基因的核苷酸序列及推导的氨基酸序列进行分子特性分析,并进行了目的蛋白的原核表达和免疫原性检测。结果显示:ompN2基因全长1 122bp(GenBank登录号为KP159419),包含1个完整的开放阅读框,编码373个氨基酸,其序列具有极高的保守性,与鮰爱德华菌外膜穿孔蛋白ompC同源性最高,序列一致性为100%,进化树聚为一支;具有1个革兰阴性菌穿孔蛋白(Gram-neg-porins)保守结构域,存在1个信号肽,不含跨膜区,是一种膜外蛋白;具有与蛋白翻译后修饰功能相关的磷酸化位点20个和N-糖基化位点4个;具有9个与免疫相关的抗原决定簇区域,表明可以作为潜在的候选疫苗。此外,SDS-PAGE检测发现,该蛋白主要以包涵体形式表达在沉淀中,Western-bolt结果显示重组蛋白表达成功,且具有较好的免疫原性。以上结果为筛选ompN2作为斑点叉尾鮰抵抗鮰爱德华氏菌感染的疫苗候选基因并进行相应蛋白的表达提供了理论依据,同时为研究ompN2蛋白的生物学功能,了解ompN2基因结构与功能的关系奠定了基础。
- 王二龙王兴丽杨帆秦振阳汪开毓陈德芳耿毅
- 关键词：克隆表达生物信息学免疫原性
- 高致病性维氏气单胞菌胞外产物对斑点鲖的致病性被引量：15
- 2016年
- 为了研究维氏气单胞菌及其胞外产物的致病机制对预防和治疗斑点鲖维氏气单胞菌病的作用。通过对一株高致病性斑点鲖源维氏气单胞菌胞外产物（extracellular product,ECP）的提取并结合体内外实验研究其酶活性与致病性,以期为维氏气单胞菌的致病机制研究提供新思路。采用饱和硫酸铵沉淀法,对一株高致病性的斑点鲖源维氏气单胞菌的ECP进行了提取,将其进行浓度检测、SDS-PAGE分析和酶活测定;并将提取的ECP攻毒斑点鲖,通过病理学分析研究其致病机制。提取的ECP经考马斯亮蓝试剂盒确定其浓度为0.743 mg/mL;SDS-PAGE分析发现该ECP类型丰富,分子大小主要集中在20.0～33.0 ku。运用琼脂平板扩散法对ECP中主要毒力和代谢相关酶活性进行体外测定,发现ECP具有脂酶、蛋白酶、卵磷脂酶、DNA酶和溶血活性,不具有淀粉酶、明胶酶、脲酶活性;并对与毒力密切相关的溶血活性进行了进一步的溶血谱绘制,发现ECP对其他多种动物红细胞都有溶血活性,对鱼类红细胞溶血性较强,但对鸡、鸭红细胞无溶血活性。ECP攻毒健康斑点鲖后,发现其具有明显致病性,死亡率高达100%。病鱼大体病理变化为体表黏液增多,出现褪色斑以及不同程度的出血斑;眼球充血;肛门红肿外凸;剖检病变表现：鳃丝充血肿胀、肝脏肿大、散在少量出血点,脾脏肿大暗红,肠道扩张、肠壁变薄、肠腔内有大量黄色黏液。组织学病变主要表现为肝细胞变性、坏死;脾脏淋巴细胞减少,大量结缔组织增生;胃、肠道黏膜上皮坏死脱落。该株维氏气单胞菌的胞外产物具有多种酶活性,且对斑点鲖具有明显的致病性,推测该胞外产物在维氏气单胞菌入侵、感染甚至致死斑点鲖过程中都发挥了重要作用。
- 贺扬华丽汪开毓陈德芳王均王二龙王兴丽杨倩吴学婧何洁赖为民
- 关键词：维氏气单胞菌胞外产物
- 再谈抗菌肽及其在水产养殖上的应用(上)被引量：3
- 2018年
- 随着我国水产养殖业快速发展,各种疾病频频发生,抗生素大量使用甚至滥用的情况也日趋严重,寻找抗生素的替代物已迫在眉睫。而抗菌肽作为一种新型的高效抗菌药物,由于其具有分子量小、水溶性好、抗菌谱广且作用机制特别、不易产生耐药性等优点,成为新型抗生素开发的良好候选资源。
- 汪开毓王兴丽杨倩刘韬李良玉魏文燕刘家星
- 关键词：水产养殖业抗菌肽抗菌药物分子量水溶性
