刘秀
- 作品数：10 被引量：50H指数：4
- 供职机构：中国食品发酵工业研究院更多>>
- 相关领域：轻工技术与工程理学医药卫生化学工程更多>>
- 环介导等温扩增技术在典型食源性致病菌检测中的应用进展被引量：6
- 2017年
- 环介导等温扩增(Loop-mediated isothermal amplification,LAMP)技术是一种新颖的核酸恒温扩增方法。因其具有简单、快速、特异性强的特点,在国外已经成功应用于多个行业,并在其中发挥着越来越重要的作用。阐述LAMP技术在大肠杆菌O157、沙门氏菌、志贺氏菌和金黄色葡萄球菌4种食源性致病菌检测中的最新研究进展,将近年来针对4种细菌建立的LAMP方法中的靶基因、灵敏度和特异性进行汇总比较,对LAMP试验常见问题进行分析,展望其在中国食源性致病菌检测领域的研究和应用发展前景。
- 梁玉林刘秀丁梦璇刘远远尹建军
- 关键词：沙门氏菌志贺氏菌金黄色葡萄球菌靶基因
- 白砂糖DNA提取方法的比较
- 2016年
- 为了得到高效的白砂糖DNA提取方法,以5种白砂糖为研究对象,从前处理方法、裂解液成分及DNA纯化方法等方面对传统CTAB法进行改良,并比较了CTAB法和改良CTAB法的提取效果,结果表明:改良CTAB法提取的白砂糖DNA浓度都在2.60μg/m L以上,纯度在1.8左右,且通过实时荧光定量PCR能扩增出18Sr DNA基因的对应荧光信号。因此,改良CTAB法能够高效地提取白砂糖的DNA,可为后续的分子检测奠定基础。
- 齐玲倩刘秀丁梦璇李静媛刘远远尹建军
- 关键词：白砂糖DNA提取改良CTAB法FLUORESCENCE
- 基于反转录环介导等温扩增技术检测大肠杆菌O157被引量：4
- 2018年
- 建立反转录环介导等温扩增(Reverse transcriptase loop-mediated isothermal amplification RT-LAMP)方法特异性检测大肠杆菌O157。针对大肠杆菌O157的特异性保守rfb E基因设计多组引物,通过对引物筛选和反应条件优化,建立了检测大肠杆菌O157的实时荧光RT-LAMP方法。利用大肠杆菌O157及其人工污染脱脂乳样品,研究了方法的特异性和灵敏度,并与r RTPCR(Real-time fluorescent quantitative reverse transcription polymerase chain reaction)方法的灵敏度进行比较。结果显示,等温65℃条件下,30 min内能完成RT-LAMP扩增反应。所建立的实时荧光RT-LAMP方法特异性强,除了2株大肠杆菌O157以外其余菌株均未产生特异性扩增反应。同时该方法灵敏度高,对人工污染脱脂乳样品检测灵敏度能达到20 CFU/g,比r RT-PCR方法高10倍。建立的实时荧光RT-LAMP方法将为大肠杆菌O157现场快速检测提供有力手段。
- 梁玉林刘秀周鹏飞周振森尹建军
- 关键词：大肠杆菌O157脱脂乳
- 超氧化电位水的稳定性及其杀菌效果被引量：3
- 2017年
- 研究了不同保存方式、搅拌、温度对超氧化电位水pH、有效氯和氧化还原电位及杀菌效果影响,为超氧化电位水的应用提供依据。结果显示敞口见光、敞口避光、密封见光、密封避光4种保存条件下,随着时间的延长,pH值升高,有效氯和氧化还原电位降低,但密封避光保存至65 d时仍能保持快速杀菌效果。连续搅拌或者加热对超氧化电位水的理化指标影响较小,对杀菌效果无影响。从而确定超氧化电位水密封遮光保存65 d内稳定性好,短时间的搅拌和加热不影响其杀菌效果,超氧化电位水可异地加工使用。
- 陈红运宋全厚尹建军刘秀侯玉柱
- 关键词：稳定性杀菌效果
- 植物油DNA提取和基因检测研究进展被引量：3
- 2016年
- 基因检测方法以其快速、高效、灵敏、准确的特点而广泛应用在植物油真实性和转基因成分鉴定中。但植物油大都经过精制加工,DNA含量极少且完整度低,这对植物油的基因提取和检测造成了极大的困扰。本文对植物油DNA提取和基因检测进展进行了综述,并对以后的发展进行了展望,以期为研究者提供一定的理论参考。
- 齐玲倩刘秀丁梦璇刘远远柯润辉尹建军
- 关键词：植物油DNA提取基因检测
- 有机干扰物对超氧化电位水杀菌效果影响研究
- 2017年
- 试验以牛血清白蛋白(BSA)为有机干扰物质,大肠杆菌为灭菌对象,通过悬液定量杀菌试验和理化分析方法研究有机干扰物质对超氧化电位水(NEOW)杀菌效果影响。试验结果显示:在不含有机干扰物时,NEOW作用30 s,能够将菌落数对数值为7.76的大肠杆菌完全杀灭。用无菌水对NEOW稀释后,pH和氧化还原电位(ORP)变化不明显,有效氯浓度(ACC)随着稀释度的增加而降低,但稀释至60%时同样保持快速杀灭能力。在干扰物作用下,随着BSA浓度增加,NEOW杀菌效果降低。但NEOW在低浓度BSA的干扰下,可以通过增加杀菌时间或者增加有效氯浓度达到杀菌效果;在高浓度BSA的干扰下,需要对消毒环境进行预先清洗降低干扰物的量再进行消毒。
- 陈红运宋全厚尹建军侯玉柱刘秀
- 关键词：大肠杆菌杀菌效果
- 基于反转录-环介导等温扩增技术检测金黄色葡萄球菌被引量：9
- 2018年
- 反转录-环介导等温扩增(reverse transcriptase loop-mediated isothermal amplification,RT-LAMP)技术是以RNA为检测模板的扩增反应。针对金黄色葡萄球菌特异保守nuc基因设计多组引物,通过对引物筛选和反应条件优化,建立了检测金黄色葡萄球菌的实时荧光RT-LAMP方法。利用该方法对菌株特异性、纯培养金黄色葡萄球菌灵敏度和人工污染脱脂乳样品灵敏度进行检测。等温65℃条件下,30 min内完成RT-LAMP反应。该方法具有较强的菌株特异性,对纯培养金黄色葡萄球菌灵敏度检测限为20 fg/μL,在人工污染脱脂乳样品的检测中,灵敏度达到230 CFU/g。建立的实时荧光RT-LAMP方法可以为金黄色葡萄球菌现场快速检测提供有力手段。
- 梁玉林刘秀周振森周鹏飞尹建军
- 关键词：金黄色葡萄球菌靶基因反转录活菌
- 固相萃取结合气相色谱-火焰离子化检测器分析面包中饱和烃类矿物油被引量：17
- 2016年
- 为分析面包中饱和烃类矿物油（mineral oil saturated hydrocarbons,MOSH）,建立了一种硝酸银硅胶固相萃取GC-FID方法。在优化的前处理及色谱条件下,面包中的MOSH最低检出限为1.0 mg/kg,定量限为3.0mg/kg,一定范围内线性良好（R2=0.999 1）,回收率（90.4%~105.1%）和相对标准偏差（3.29%~5.77%）（n=6）均满足方法性能要求。实际样品的分析表明,面包中的MOSH的含量较高,其中MOSH（n-C_（16）-C_（24））最高为101.4mg/kg,MOSH（n-C24-C35）最高为71.3mg/kg。
- 安红梅柯润辉刘秀田菲菲王丽娟黄新望尹建军
- 关键词：面包
- 水果果肉中总DNA提取方法的比较研究被引量：8
- 2016年
- 为了获得高效通用的水果果肉DNA提取方法,本研究以11种水果为试验材料,从前处理方法、裂解液成分、异丙醇沉淀时间等方面对CTAB法进行了改进,并比较了行业标准法、试剂盒法、改良CTAB法3种方法的提取效果,发现改良CTAB法提取的水果果肉DNA浓度都在46.25μg/m L以上,纯度都在1.8左右,且能扩增出137 bp的18Sr DNA条带,从而确定了高效通用的水果果肉DNA提取方法:改良CTAB法。
- 齐玲倩刘秀丁梦璇刘远远柯润辉尹建军
- 关键词：水果DNA提取改良CTAB法
- 果汁DNA提取方法的比较被引量：3
- 2015年
- 为了获得高效通用的果汁DNA提取方法,以7种浑浊果汁和6种澄清果汁为研究对象,从前处理方法、裂解液成分、异丙醇沉淀时间等方面对CTAB法进行了改进,并比较了CTAB法、试剂盒法、改良CTAB法的提取效果,结果发现:改良CTAB法提取的浑浊果汁DNA,浓度都在24.10μg/m L以上,澄清果汁的DNA,浓度都在5.72μg/m L以上,且两类果汁的DNA纯度均为1.8左右,同时都能扩增出18Sr DNA的137 bp的条带,从而确定了高效通用的果汁DNA提取方法——改良CTAB法。
- 齐玲倩刘秀丁梦璇李静媛刘远远尹建军
- 关键词：果汁DNA提取改良CTAB法
