唐蕾
- 作品数：7 被引量：6H指数：2
- 供职机构：中国水产科学研究院南海水产研究所更多>>
- 发文基金：国家现代农业产业技术体系建设项目广东省科技计划工业攻关项目海南省自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学环境科学与工程更多>>
- 斑节对虾含硒谷胱甘肽过氧化物酶基因全长克隆及表达分析被引量：3
- 2016年
- 为了研究含硒谷胱甘肽过氧化物酶(selenium-dependent glutathione peroxidase,SeGPx)在斑节对虾应激反应和卵巢发育中的作用,实验以斑节对虾肝胰腺转录组数据中筛选获得的Se-GPx基因(Pm Se-GPx)片段为基础,利用RACE技术获得Pm Se-GPx基因的c DNA全长,并对其进行了生物信息学分析;利用荧光定量PCR技术研究了Pm Se-GPx在斑节对虾不同组织、卵巢发育各期、肝胰腺组织在pH9、硫酸铜(Cu^(2+))应激下的相对表达量和变化趋势。结果显示,Pm Se-GPx基因c DNA全长为959 bp,5'非编码区(UTR)长10bp,开放阅读框(ORF)长639 bp,编码212个氨基酸,310 bp的3'UTR包含一个硒代半胱氨酸插入序列(SECIS),ORF中的密码子209TGA211编码硒代半胱氨酸(selenocysteine,U67)。实时定量PCR实验结果表明,Pm Se-GPx在斑节对虾的肝胰腺、卵巢、精巢、心脏等组织中均有表达,其中肝胰腺中表达量显著高于其他组织,卵巢次之;卵巢发育阶段表达结果则显示Pm Se-GPx在卵巢发育各期均有表达,在卵巢Ⅲ期表达量最高,其次是V期;在Cu^(2+)胁迫下,其表达量总体呈现先下降后上升然后又下降的趋势;在环境pH为9胁迫下,表达趋势呈现先下降,后回升,然后又下降,再大幅上升的趋势。研究表明,SeGPx在斑节对虾卵巢发育过程中具有重要作用,且Se-GPx参与斑节对虾对环境理化因子应激的免疫调控。
- 唐蕾傅明骏赵超邱丽华刘文生江世贵
- 关键词：斑节对虾卵巢发育
- 斑节对虾含硒谷胱甘肽过氧化物酶全长克隆及表达分析
- 为了研究含硒谷胱甘肽过氧化物酶(selenium-dependent glutathione peroxidase,Se-GPx)在斑节对虾(Penaeus monodon)免疫防御和卵巢发育中的作用,本实验以斑节对虾肝...
- 唐蕾傅明骏史进选杨其彬邱丽华刘文生江世贵
- 关键词：斑节对虾卵巢发育PH
- 文献传递
- 黄颡鱼IGF-Ⅰ基因cDNA的克隆及原核表达
- 根据已知鱼类的IGF-Ⅰ氨基酸序列,利用CODEHOP网站在线设计兼并性引物,用黄颡鱼(Pelteobagrus fulvidraco)肝胰脏总RNA反转录作为模板,克隆得到中间序列,通过SMART RACE技术获得了I...
- 刘文生苏莲娇李美娟唐蕾李林潘庆
- 关键词：黄颡鱼克隆重组蛋白
- 文献传递
- 斑节对虾UBE2H基因克隆及其表达被引量：3
- 2016年
- 【目的】克隆斑节对虾（Penaeusmonodon）泛素结合酶E2 H基因（UBE2H），了解其组织特异性表达情况，为揭示UBE2H在斑节对虾卵巢发育过程的作用提供依据。【方法】PCR扩增斑节对虾UBE2H基因的开放阅读框，利用实时荧光定量PCR检测UBE2H基因在斑节对虾各组织及不同发育期斑节对虾肝胰腺和卵巢中的表达情况；并构建pET32a-UBE2H原核表达重组质粒，进行诱导表达及蛋白纯化。【结果】克隆获得的斑节对虾UBE2H基因全长1010 bp （GenBank登录号KU870456），其中，5＇非编码区77 bp，3＇非编码区378 bp，开放阅读框555 bp（编码184个氨基酸）。斑节对虾UBE2H蛋白等电点（pI）4.88，分子量20.85 kD。斑节对虾UBE2H氨基酸序列与其他物种相似度很高，为78.00%-83.00%。实时荧光定量PCR检测结果显示，UBE2H基因在斑节对虾淋巴组织中表达量最高，其次为鳃；在斑节对虾不同卵巢发育期肝胰腺和卵巢中的表达量均呈先上升后下降的变化趋势，但其峰值出现时间存在差异，肝胰腺的最高表达量出现在卵巢III期，卵巢的最高表达量出现在卵巢II期。经原核表达获得的斑节对虾UBE2H融合蛋白约39.00 kD，纯化后的蛋白浓度为2.92μg/μL。【结论】斑节对虾UBE2H参与了其卵母细胞发育和肝胰腺中卵黄蛋白的转运过程，与斑节对虾的卵巢发育密切相关。
- 唐蕾傅明骏刘文生黄建华周发林江世贵
- 关键词：斑节对虾克隆实时荧光定量PCR原核表达
- 斑节对虾泛素融合蛋白UbS27基因克隆与表达分析
- 2016年
- 从构建的斑节对虾（Penaeus monodon）肝胰腺转录组数据中筛选出泛素核糖体融合蛋白Ub S27基因（ubiquitin/ribosomal S27 fusion protein,Pm Ub S27）片段,利用SMART-RACE技术克隆出Pm Ub S27基因c DNA全长,并利用软件对其结构进行分析;利用实时荧光定量技术检测Pm Ub S27基因在斑节对虾不同组织及卵巢不同发育期的表达情况。结果显示,Pm Ub S27基因c DNA全长为514 bp,开放阅读框465 bp,编码154个氨基酸,含有泛素（1~72 aa）和核糖体蛋白（101~147 aa）2个结构域。以DNA为模板克隆得到的基因序列由3个内含子和4个外显子组成。实时荧光定量结果显示,Pm Ub S27基因在斑节对虾各组织中均有表达,但是在卵巢中表达量最高,其次为肝胰腺、血淋巴和精巢。Pm Ub S27在卵巢发育前期（Ⅱ期）和成熟期（Ⅴ期）的表达量显著高于其他各期（P〈0.05）。结果表明,Pm Ub S27参与斑节对虾卵巢发育的过程并可能在卵巢发育进程中起到重要的调控作用。
- 吴松唐蕾傅明骏杨丽诗黄建华周发林江世贵
- 关键词：斑节对虾卵巢发育实时定量PCR
- 斑节对虾泛素融合蛋白UbL40基因的克隆及表达分析
- 2016年
- 从斑节对虾（Penaeus monodon）肝胰腺转录组数据中筛选获得泛素融合蛋白Ub L40基因（ubiquitin/ribosomal L40 fusion protein,Pm Ub L40）的部分序列,利用RACE技术克隆其c DNA全长序列,通过生物信息学进行结构分析;利用实时定量PCR技术检测该基因在斑节对虾不同组织及卵巢不同发育期的表达情况。结果表明,Pm Ub L40基因c DNA全长571 bp,开放阅读框（Open reading frame,ORF）长390 bp,编码129个氨基酸,预测分子量约14.7 ku,理论等电点为9.76。预测氨基酸序列的N-末端（1～76aa）为高度保守的泛素结构域,C-末端（77～129aa）为典型的核糖体蛋白L40结构域。多重序列比对表明不同物种的Ub L40在进化过程中高度保守。实时定量PCR结果显示Pm Ub L40基因在肝胰腺的表达量最高,肌肉、卵巢次之,其他组织的表达较低;在卵巢发育过程中Pm Ub L40基因在II期表达最高,其次是V期,显著高于I、III、IV期。研究结果表明Pm Ub L40基因在斑节对虾卵巢发育过程中可能具有重要作用。
- 傅明骏吴松唐蕾周发林邱丽华江世贵
- 关键词：斑节对虾卵巢发育基因克隆
- 斑节对虾泛素结合酶G1全长克隆及原核表达分析
- 泛素-蛋白酶体途径(ubiquitin/proteasome pathway,UPP)可通过酶体降解来调节多种代谢途径,广泛分布于机体各组织中,研究表明其与动物的性腺发育也有一定关系.泛素结合酶是泛素一蛋白酶体通路中重要...
- 唐蕾傅明骏杨其彬邱丽华刘文生江世贵
- 关键词：斑节对虾卵巢发育
