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猪圆环病毒2d亚型病毒样颗粒的制备与鉴定被引量：5: 2017年; 本研究从临床病料中扩增获得猪圆环病毒2型(PCV2)Cap基因,并进行序列分析和抗原性比对,然后利用杆状病毒表达系统在昆虫细胞内将Cap基因进行表达,目的蛋白进行Western-blot、IFA、质谱鉴定以及透射电镜和免疫电镜检测。结果表明,扩增获得的PCV2 Cap基因属于PCV2d亚型,在抗原性方面与国内PCV2a、PCV2b代表性毒株及疫苗株存在4个部位的差异;在昆虫细胞内PCV2d Cap蛋白成功表达并具有良好的免疫原性;PCV2d Cap蛋白在昆虫细胞内完成自组装,形成与天然病毒结构相似的病毒样颗粒(VLP)。本研究首次在昆虫细胞内制备出PCV2d亚型病毒样颗粒,为PCV2d亚单位疫苗研制及诊断抗原开发奠定了基础。; 侯强侯绍华贾红姜一曈鑫婷李明陈青朱鸿飞; 关键词：核衣壳蛋白杆状病毒表达系统病毒样颗粒

虎杖苯亚甲基丙酮合酶PcPKS2的表达纯化和晶体生长: 2016年; 植物类型Ⅲ聚酮合酶超家族(PKSs),又称查尔酮合酶(Chalcone synthase,CHS)超家族,催化合成多种植物次生代谢产物的分子骨架。苯亚甲基丙酮合酶(Benzalacetone synthase,BAS)催化4-香豆酰辅酶A与丙二酰辅酶A通过一步脱羧缩合反应生成苯亚甲基丙酮,是一系列具有重要生物学活性苯丁烷类化合物及其衍生物的前体化合物。前期工作从虎杖中分离出苯亚甲基丙酮合酶BAS(PcPKS2)和1个具有CHS和BAS活性的双功能酶(PcPKS1)。两者与超家族其他成员序列经比较,在包括门卫氨基酸Phe215和Phe265在内的重要氨基酸序列存在一定差异。已有蛋白晶体学研究结果表明,PKSs家族不同成员的功能多样性来自于酶催化位点的非常微小的构象变化。为了能够从结构上比较PcPKS2和Pc PKS1双功能酶活性差异可能产生的机制,以确定其高效BAS活性的分子机理,研究利用了大肠杆菌原核表达系统过量表达了C-端融合有His6标签的重组蛋白,经纯化得到了高纯度蛋白。经过对其晶体生长条件进行摸索和优化,得到了能用于X-射线衍射的单晶,为其结构解析、催化机理研究、了解虎杖聚酮类化合物生物合成机制和该类酶在基因工程中的应用提供了基础。; 马文瑞柳春梅杨明峰薛飞燕陈青马兰青吕鹤书; 关键词：虎杖晶体生长

DNA模式识别受体研究进展被引量：1: 2016年; 固有免疫系统利用模式识别受体识别病原相关分子模式。近期研究发现,外源DNA能够被宿主细胞中多种DNA受体识别,激活多种信号通路,上调Ⅰ型干扰素和促炎性细胞因子的表达。基于DNA的免疫识别在激活宿主抗感染免疫过程中起重要作用,因此仅对现已报道的DNA受体进行概述,同时对DNA的免疫识别与自身免疫病之间的关系进行探讨。; 陈青朱鸿飞郭晓宇; 关键词：固有免疫模式识别促炎性细胞因子

非洲猪瘟疫苗研究进展被引量：38: 2018年; 非洲猪瘟是由非洲猪瘟病毒引起的一种急性、热性和高度接触性传染病,可感染各品种及各年龄段家猪以及欧洲野猪,死亡率高达100%。近年来,非洲猪瘟在北高加索地区、俄罗斯境内多个州以及东欧多国扩散、流行,在全球分布呈扩大趋势并对我国养猪业构成潜在巨大威胁。由于非洲猪瘟病毒拥有庞大的基因组结构和复杂的免疫逃逸机制,使得该病目前仍未有有效疫苗问世。本文针对非洲猪瘟灭活疫苗、减毒活疫苗、病毒活载体疫苗、核酸疫苗和基因工程亚单位疫苗等研究进展进行概述,以期为该病疫苗研发提供参考。; 王西西陈青吴映彤郭晓宇李金祥; 关键词：非洲猪瘟免疫逃逸疫苗

抗猪圆环病毒2型病毒样颗粒单克隆抗体的制备及鉴定被引量：1: 2018年; 为制备能够特异性识别猪圆环病毒2型(PCV2)病毒样颗粒(VLP)的单克隆抗体(MAb),本研究利用杆状病毒表达系统分别制备了具有VLP结构的核衣壳蛋白(Cap)和去掉核定位信号肽的tCap蛋白,以前者为免疫原,后者为筛选抗原制备了一株杂交瘤细胞(1F6),通过western blot、间接免疫荧光和透射电镜对其生物学特性进行鉴定。结果显示,1F6 MAb与PCV2 VLP具有良好的特异性反应,同时能够特异性识别天然PCV2和线性结构的Cap蛋白。本研究制备的MAb为PCV2抗原表位的鉴定和PCV2 VLP定量方法的建立提供了工具。; 侯强侯绍华贾红姜一曈鑫婷李明陈青朱鸿飞; 关键词：猪圆环病毒2型单克隆抗体核衣壳蛋白病毒样颗粒

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陈青