高珍 作品数:7 被引量:48 H指数:4 供职机构: 南昌大学第二附属医院 更多>> 发文基金: 江西省科技支撑计划项目 江西省卫生厅基金资助项目 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 更多>>
GFP/HBxn、GFP/HBxc融合蛋白重组载体的构建和稳定表达细胞系的建立 2017年 目的分别构建绿色荧光蛋白(GFP)与氨基端或羧基端缺失突变乙型肝炎病毒X蛋白(hepatitis B virus X protein,HBx)的重组表达载体,建立稳定表达GFP/HBxn、GFP/HBxc融合蛋白的HepG2细胞系,以进一步研究HBx缺失突变对其生物功能的影响。方法 PCR法分别扩增氨基端缺失50aa的HBx及羧基端缺失50aa的HBx基因,用HindⅢ和KpnⅠ双酶切定向插入pEGFP-C1相应酶切位点并转化宿主菌DH5α,双酶切鉴定pGFP/HBxn、pGFP/HBxc;脂质体转染法转染HepG2细胞,G418筛选出抗性细胞克隆,荧光显微镜下观察GFP的表达,挑选抗性克隆细胞扩大培养并传代。RT-PCR法、Western blot法检测转染细胞HBxn、HBxc基因、蛋白的表达。结果扩增的HBxn、Hbxc基因片段琼脂糖凝胶电泳显示符合预估大小。重组质粒pGFP/HBxn、pGFP/HBxc经HindⅢ和KpnⅠ双酶切后电泳,符合预估大小;转染pGFP/HBxn及pGFP/HBxc的HepG2细胞可见抗性细胞克隆形成,并可见阳性克隆细胞均有GFP表达。RT-PCR与Western blot法检测到HBxn、HBxc的表达。结论成功构建了GFP/HBxn、GFP/HBxc真核重组表达载体pGFP/HBXn、pGFP/HBxc,获得了稳定表达GFP/HBxn、GFP/HBxc融合蛋白的HepG2细胞系,为进一步研究HBx缺失突变对其生物功能的影响奠定了基础。 姚雪兵 杨林 高珍 罗杰 孙水林关键词:乙型肝炎病毒X蛋白 缺失突变 HEPG2细胞系 人工肝不同模式治疗肝衰竭疗效分析 被引量:8 2018年 目的探讨人工肝血浆灌流(PP)模式、血浆透析滤过(PDF)模式、PP联合PDF模式治疗肝衰竭患者的临床疗效。方法对收治的76例患者根据人工肝治疗模式分为PP组、PDF组、PP联合PDF组,并进行回顾性分析,比较不同人工肝模式疗效的差异。结果 3种模式治疗后肝衰竭患者临床指标均有改善,3组间差异无统计学意义(P>0.05)。经人工肝治疗出院后12、24周,3组患者生存率差异无统计学意义(P>0.05)。结论人工肝PP模式、PDF模式及PP联合PDF模式均能有效清除血液中胆红素等有毒物质、改善机体的内环境,3种模式均能提高肝衰竭患者的生存率,且3种治疗模式疗效无明显差异。 郑晓君 严敬 龚文兰 龙林 向海鸿 刘翠芸 刘文革 陈明发 罗杰 席文娜 姚雪兵 高珍 孙珂 孙水林关键词:人工肝 肝衰竭 临床疗效 血清降钙素原在肝衰竭合并细菌感染诊断价值的初步研究 目的 探讨肝衰竭患者血清 PCT 水平,比较 PCT 和传统炎症指标(CRP、WBC、N%)对诊断肝衰竭细菌感染的诊断价值。方法 采用回顾性队列研究的方法,收集 2015 年01 月至2015 年05月诊断为肝衰竭的患者... 杨文龙 高珍 罗杰 孙水林关键词:降钙素原 肝衰竭 白介素-7对小鼠肝纤维化模型肝组织病理的影响 被引量:5 2014年 目的:观察白介素-7(interleukin-7,IL-7)对小鼠肝纤维化模型肝组织病理的影响.方法:用CCl4诱导形成小鼠肝纤维化模型.将♀Balb/c小鼠18只随机分成3组,每组6只,A组(生理盐水对照组);B组(纤维化模型组);C组(IL-7干预组).造模4 wk末处死小鼠,取肝组织肉眼及组织病理形态学法(常规HE染色、网状纤维染色及Masson染色)观察肝组织标本,并采用Ishaki评分系统对小鼠肝组织炎症活动度及纤维化程度进行评分.结果:成功建立小鼠肝纤维化模型,表现为汇管区周围纤维化明显,有芒状纤维和纤维间隔形成,组织病理:HE染色、网状纤维染色及Masson染色显示均显示C组与B组相比,肝组织炎症及肝纤维化程度明显减轻,肝脏坏死性炎症分级Ishaki评分A组(0-3分)6只;B组(7-9分)1只,(10-14分)2只,(15-18分)3只;C组(4-6分)1只,(7-9分)3只,(10-14分)2只;3组炎症活动度得分有统计学差异(HC=14.14,P<0.01).肝纤维化分期Ishaki评分A组中0分5只,1分1只;B组4分2只,5分2只,6分2只;C组1分1只,2分1只,3分2只,4分2只;3组纤维化得分有统计学差异(HC=15.2,P<0.01).结论:IL-7能够阻断CCl4诱导的小鼠肝纤维化,减轻肝脏炎症反应. 刘佩佩 刘翠芸 付文娟 余东山 陈明发 罗杰 姚雪兵 席文娜 高珍 孙水林关键词:白介素-7 四氯化碳 肝纤维化 血浆透析滤过模式在重型肝炎治疗中的血液净化配合应用 被引量:10 2018年 目的探讨血浆透析滤过(PDF)模式应用在重症肝炎患者治疗中的有效性及安全性。方法收集9例本院住院的重型肝炎肝衰竭应用PDF模式的临床资料,包括应用前后的临床表现、血生化等主要指标,院内感染、输血不良反应等次要指标,做回顾性分析与统计学处理。结果 1)重症肝炎患者应用PDF模式后,乏力、纳差、黄疸症状缓解(改善) 87. 5%(14/16)、75%(12/16)、100. 0%(16/16),表现为食欲增加、尿色变淡、黄疸消退以及精神好转等; 2)应用PDF模式前后,ALT(U/L)、AST(U/L)、TBIL(μmol/L)、DBIL(μmol/L)及GLB(g/L)分别为221. 8±221. 7vs 114. 1±121. 7、109. 5±104. 7 vs 58. 0±57. 7、370. 3±118. 8 vs 223. 8±91. 9、230. 0±76. 9 vs 133. 8±58. 7及24. 1±4. 2vs 26. 1±3. 8 (P 〈0. 05),ALB(g/L)为30. 6±2. 1 vs 29. 4±2. 9 (P〉 0. 05); 3)应用PDF模式前后,凝血酶原活动度(PTA)明显上升,凝血酶原时间(PT)明显缩短(P〈0. 05); 4) PDF治疗后,血Na~+、Ca^(2+)、Cl^-均有所上升(P〈0. 05),血Mg^(2+)稍有下降、K~+稍有上升(P〉0. 05)。5)应用PDF模式后,院内感染率0(0/9),荨麻疹率11. 1%(1/9)。结论PDF模式是重症肝炎治疗中1种安全有效的支持治疗手段,可大大减少患者血浆用量,适用于临床应用推广。 饶美英 孙珂 喻蓉艳 刘翠芸 陈明发 罗杰 刘燕 杨文龙 席文娜 高珍 姚雪兵 孙水林关键词:重症肝炎 血浆置换 血生化 输血反应 终末期肝病模型评分与Child-Turcotte-Pugh分级对非生物型人工肝治疗乙型肝炎相关性肝衰竭患者预测价值的研究 被引量:22 2016年 目的应用终末期肝病模型(MELD)评分和Child-Turcotte-Pugh(CTP)分级系统评估和预测非生物型人工肝支持系统(NB-ALSS)治疗乙型肝炎相关性肝衰竭患者疗效和预后的临床价值。方法将210例乙型肝炎相关性肝衰竭患者分为人工肝组(115例)和对照组(95例),并进行MELD和CTP评分。根据评分将每组进一步分成MELD<20分、20分≤MELD<30分、30分≤MELD<40分和MELD>40分四个亚组。观察两组患者治疗前后各亚组MELD分值的变化和人工肝组患者治疗前后临床生化指标的变化,并对各亚组实际病死率与预期病死率及不同CTP评分分级进行比较。同时,绘制Kaplan-Meier生存曲线,分析比较不同MELD评分的短期生存率和病死率。结果人工肝治疗后各亚组患者的临床生化指标中凝血酶原时间国际标准化比值(INR)[(1.3±0.3)vs.(1.4±0.3);(2.2±0.8)vs.(2.6±0.8);(4.1±1.5)vs.(5.2±1.7);(9.6±2.8)vs.(12.2±4.8),t=4.303、3.152、3.545、3.130,P均<0.05]和总胆红素(TBIL)水平[(152±74)μmol/L vs.(287±118)μmol/L;(266±160)μmol/L vs.(422±114)μmol/L;(370±144)μmol/L vs.(517±126)μmol/L;(564±180)μmol/L vs.(628±121)μmol/L,t=4.960、5.951、4.915、2.577,P均<0.05]均低于治疗前。人工肝治疗后MELD分值除MELD≥40分组外,其他三组较治疗前均显著下降[(10.2±3.4)分vs.(16.6±2.5)分;(18.2±4.2)分vs.(24.7±2.6)分;(30.1±7.5)分vs.(36.2±2.3)分,t=7.036、9.094、5.476,P均<0.05],并且此三组的人工肝组与对照组治疗前后MELD下降分值(△MELD)的比较,差异均有统计学意义(t=2.286、2.906、2.021,P均<0.05)。20分≤MELD<30分及30分≤MELD<40分,人工肝组病死率低于预期病死率(40.8%vs.76.0%、51.4%vs.83.0%,χ2=12.119、8.880,P均<0.05),且均低于对照组病死率(40.8%vs.61.9%、51.4%vs.82.4%,χ2=4.030、4.710,P均<0.05);20分≤MELD<30分及30分≤MELD<40分,CTP C级人工肝组患者病死率均低于对照组(38.8%vs.59.6%、51.4%vs.76.5%,χ2=3.900、4.400,P均<0.05)。同时,Kaplan-Meier生存曲� 杨文龙 孙水林 周锡进 陈明发 席文娜 高珍 杨玲玲 罗杰 何金秋关键词:人工肝支持系统 终末期肝病模型评分 非疫区布鲁氏菌病9例临床特点分析 被引量:3 2017年 目的分析非疫区布鲁氏菌病患者临床特点。方法回顾性分析2014年1月至2015年7月医院确诊的9例布鲁氏菌病患者的流行病学、临床资料及转归。结果 9例江西本地区确诊病例中,有羊接触史7例,牛接触史1例,无明确牛羊接触史1例;临床上主要表现为发热(88.89%)、头痛头(66.67%)、乏力(55.56%)、多汗(55.56%)、关节痛(44.44%)、消瘦(11.11%)、肝肿大(33.33%)、脾肿大(44.44%)、淋巴结肿大(33.33%);实验室检查,白细胞计数下降为3例,嗜酸性粒细胞下降为5例,6例ALP轻度升高;6例GGT升高,其中3例GGT>3ULN;7例血沉及CRP轻度升高。4例有肺部病变;9例患者经多西环素联合利福平或多西环素联合左氧氟沙星均痊愈。结论对于血象不高的不明原因发热患者,应考虑布鲁氏菌病的可能。 姚雪兵 罗杰 席文娜 高珍 孙水林关键词:布鲁氏菌病