郭敏
- 作品数:9 被引量:7H指数:2
- 供职机构:中国农业科学院上海兽医研究所更多>>
- 发文基金:上海市科技兴农重点攻关项目科技基础性工作专项更多>>
- 相关领域:农业科学生物学更多>>
- 大片吸虫组织蛋白酶L1在大肠杆菌中的表达及纯化被引量:1
- 2008年
- 利用PCR方法从pET28/FgCL1重组质粒中扩增FgCL1基因,定向克隆至原核表达载体pGEX-4T-2中,构建重组质粒pGEX/FgCL1,将该重组质粒转化大肠杆菌BL21中,转化子经IPTG诱导表达。重组蛋白以包涵体形式存在,相对分子质量为61 000。Western-blot、ELISA试验结果显示,纯化后的重组蛋白能被自然感染大片吸虫的牛血清所识别,表达产物具有良好的抗原性。
- 郭敏何国声徐梅倩高兴春岳城
- 关键词:大片吸虫原核表达
- 藏羚羊中华皮蝇蛆的分子生物学鉴定被引量:3
- 2008年
- 利用分子生物学技术对藏羚羊感染的中华皮蝇的线粒体COI基因种属特异性序列进行了研究。利用PCR方法扩增出长度为688 bp的序列,经TA克隆后测序,测序结果表明与中华皮蝇、牛皮蝇和纹皮蝇的相似性分别为99.1%、91.4%、93.6%,确定为中华皮蝇,证实藏羚羊中存在中华皮蝇的侵染,从而扩大了中华皮蝇的宿主范围。
- 高兴春蔡进忠徐梅倩于明胜曹杰李春花郭敏王玉梅朱顺海黄燕何国声
- 关键词:藏羚羊
- 一种生产大片吸虫组织蛋白酶L1的方法
- 本发明公开了一种生产大片吸虫组织蛋白酶L1的方法,包括一个用PCR从大片吸虫成虫cDNA文库中扩增出大片吸虫组织蛋白酶L1基因的过程,一个构建含有组织蛋白酶L1全长基因的重组质粒的过程,一个将重组质粒转化入大肠杆菌中进行...
- 何国声郭敏徐梅倩高兴春曹杰朱顺海黄燕赵其平李家诚庞程米荣升
- 文献传递
- 用毕赤酵母表达皮蝇素C蛋白的研究
- 牛皮蝇蛆病(Hypodermosis)是由双翅目皮蝇科皮蝇属的皮蝇幼虫引起的一种寄生虫病,通过在家畜体内移行和背部穿孔带来危害。皮蝇素C(Hypodermin C,HC)一种后生动物起源的昆虫胶原酶,分子量是 25.22...
- 高兴春郭敏徐梅倩何国声
- 关键词:毕赤酵母
- 文献传递
- 一种利用毕赤酵母生产皮蝇素C的方法
- 本发明公开一种利用毕赤酵母生产皮蝇素C的方法,包括如下步骤:首先用PCR扩增HC基因,酶切重组载体和片段HC,用连接酶连接后形成含有HC的重组质粒,将重组产物转入大肠杆菌,然后将含有HC的重组质粒酶切,线性化后通过电击转...
- 何国声高兴春徐梅倩郭敏曹杰朱顺海赵其平黄燕庞程李家诚
- 文献传递
- 上海市奶牛隐孢子虫感染现状调查被引量:2
- 2007年
- 徐梅倩朱顺海黄燕黄侠王赞江高兴春郭敏曹杰袁耀明何国声
- 关键词:隐孢子虫感染奶牛反刍动物隐孢子虫病人兽共患
- 一种生产大片吸虫组织蛋白酶L1的方法
- 本发明公开了一种生产大片吸虫组织蛋白酶L1的方法,包括一个用PCR从大片吸虫成虫cDNA文库中扩增出大片吸虫组织蛋白酶L1基因的过程,一个构建含有组织蛋白酶L1全长基因的重组质粒的过程,一个将重组质粒转化入大肠杆菌中进行...
- 何国声郭敏徐梅倩高兴春曹杰朱顺海黄燕赵其平李家诚庞程米荣升
- 文献传递
- 大片吸虫成虫cDNA文库的构建和组织蛋白酶L1基因的克隆被引量:1
- 2007年
- 目的大片吸虫cDNA文库的构建及组织蛋白酶L1(Fasciola gigantica Cathepsin L1,FgCL1)基因的克隆。方法提取大片吸虫成虫总RNA,运用SMART技术构建大片吸虫cDNA文库。根据文献设计并合成PCR引物,从上述文库中克隆大片吸虫FgCL1基因,定向克隆至原核表达载体pET28a中。结果文库容量为2.08×106pfu/mL,重组率为98%。扩增后的文库滴度为6.23×109 pfu/mL,插入片段平均大小约为1 000 bp。应用两个已知基因(FgCL1 FgGST)从文库中成功钓取到相应的全长基因。将含有FgCL1的阳性克隆测序,用Genebank Blast进行序列比较,证实为FgCL1基因。结论成功构建了cDNA文库,提供筛选大片吸虫基因资源;从该文库中克隆出FgCL1,为进一步表达该基因,研制诊断试剂盒创造了条件。
- 郭敏徐梅倩岳城何国声
- 关键词:大片吸虫CDNA文库
- 大片吸虫cDNA文库的构建及组织蛋白酶L1基因的克隆和表达
- 片形吸虫病(Fasciolasis)是由片形属的肝片吸虫(Fasciola hepiffca)和大片吸虫(Fasciola gigantica)寄生于牛、羊等多种动物的胆管和肝脏中引起的一种寄生虫病。该病在我国分布广泛,...
- 郭敏
- 关键词:大片吸虫CDNA文库组织蛋白酶片形吸虫病基因克隆基因表达
- 文献传递