王琦
- 作品数：3 被引量：6H指数：1
- 供职机构：重庆医科大学附属第一医院更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- HPLC法检测兔胫骨及骨髓中的左氧氟沙星被引量：4
- 2016年
- 目的:建立反相高效液相色谱仪(high performance liquid chromatography,HPLC)检测兔胫骨及骨髓中左氧氟沙星的方法,用于评价纳米微球载左氧氟沙星可控降解骨修复材料中的左氧氟沙星在兔局部骨组织及骨髓中的缓释特点。方法:分别将不同浓度左氧氟沙星加入空白胫骨、骨髓,以环丙沙星作为内标,采用Sepax BR-C18(250 mm×4.6 mm 5μm)色谱柱,流动相为:0.01 mol/L磷酸二氢钾—甲醇—0.5 mol/L四丁基溴化铵(75∶25∶4),流速:1.0 ml/min,柱温:40℃,紫外检测波长290 nm。评价指标为:专属性、检测线、定量线、回收率、稳定性、精密度。结果:当胫骨中的左氧氟沙星浓度在0.05μg/ml^300μg/ml范围内线性关系良好(r=0.999);低、中、高3个浓度的方法回收率分别为(108.81±1.14)%、(96.85±3.64)%、(114.38±0.27)%;提取回收率分别为(110.92±0.42)%、(110.48±0.97)%、(80.39±0.08)%;日内精密度的RSD分别为1.30%、0.23%、5.51%;日间精密度的RSD分别为:7.09%、3.71%、2.55%,样品稳定性良好。骨髓中的左氧氟沙星浓度在0.01μg/ml^300μg/ml范围内线性关系良好(r=0.999);低、中、高3个浓度的方法回收率分别为(91.67±3.73)%、(101.77±0.26)%、(87.72±0.72)%;提取回收率分别为(102.97±0.81)%、(87.00±0.62)%、(99.97±1.15)%;日内精密度的RSD分别为1.49%、1.06%、0.11%;日间精密度的RSD分别为:5.61%、2.56%、2.37%,样品稳定性良好。结论:本方法操作简便、灵敏、稳定、回收率高,适用于检测新型载药骨修复材料中的左氧氟沙星在兔局部骨组织中的分布。
- 王琦黄伟梁熙胡宁周年赵辰孙泽绪于超张晶夏春勇
- 关键词：高效液相色谱法左氧氟沙星胫骨骨髓
- HPLC与UV-VIS法测定骨修复材料复合纳米微球中左氧氟沙星的比较被引量：1
- 2016年
- 目的比较高效液相色谱法（High performance liquid chromatography,HPLC）与紫外一可见分光光度计法（Ultraviolet-visible spectroscopy,UVoVIS）检测纳米微球中的左氧氟沙星，为评价可控降解骨修复材料中的药物缓释提供方法学。方法直接测定标准品左氧氟沙星，绘制两种方法的标准曲线，线性范围内选低、中、高3个浓度，计算回收率。将10个载药骨修复材料（10mm×6mm×6mm）分别浸泡于3mL模拟体液中，1天后取样，经两种方法检测，配对t检验，比较两种方法测得的结果有无统计学差异。结果HPLC法的线性回归方程：Y=O．0334X-0．叭（r==0．9996），线性范围：（0．5～250）pg／mL。UV-VIS法的线性回归方程为：Y=0．06588X＋0．01669（r==0．9999），线性范围：（0．5～50）μg／mL。HPLC法在低、中、高浓度的回收率分别为：（96．33＋0．58）％、（111．00±0．00）％、（105．00±0．00）％，RSD分别为0．37％、0．17％、0．06％；UV-VIS法的回收率分别为：（96．00±2．00）％、（99．00±0．00）％、（98．66±0．00）％，RSD分别为1．34％、0．00％、0．03％。HPLC法测得的平均浓度为：（30．43±10．27）μg／mL；UV-VIS法测得的平均浓度为：（187．93±33．52）μg／mL。两种方法测得的结果有显著统计学差异（t=20．169，P=0．000）。结论HPLC法专属性强、回收率高、精确度高，是评价纳米微球载左氧氟沙星可控降解骨修复材料中药物缓释的理想方法。
- 王琦陈诚何小强黄伟
- 关键词：左氧氟沙星骨修复材料纳米微球
- 抑制Runx2的表达增强BMP2诱导的干细胞成软骨分化被引量：1
- 2016年
- 目的:利用腺病毒介导RNA干扰抑制成骨分化关键转录调控因子Runx2(Runt-related transcription factor 2)的表达,研究其对骨形态发生蛋白2(bone morphogenetic protein 2,BMP2)诱导间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)成软骨分化的影响,并初步探讨相关机制。方法:利用腺病毒Ad-GFP、Ad-BMP2、Ad-SiRunx2感染C3H10T1/2细胞;共分4组:GFP组、BMP2组、BMP2+SiRunx2组和SiRunx2组。Alcian blue染色检测各组软骨细胞基质糖胺聚糖分泌;RTPCR检测Runx2、早期成软骨标志物(Col2a1)、蛋白聚糖(Aggrecan)及晚期成软骨标志物(Col10a1)mRNA表达水平;Western blot检测目的蛋白BMP2、Ⅱ型胶原(Col2a1)及X型胶原(Col10a1)的蛋白表达。结果:在BMP2诱导C3H10T1/2细胞成软骨分化过程中,下调Runx2的表达可以增强Col2a1、Aggrecan及软骨细胞外基质糖胺聚糖的合成,抑制Col10a1的合成。结论:下调Runx2表达可以增强BMP2诱导间充质干细胞成软骨分化能力,并抑制软骨细胞的成熟和肥大。
- 孙泽绪赵辰廖军义王琦徐伟陈诚黄伟
- 关键词：RUNX2骨形态发生蛋白2C3H10T1/2细胞成软骨分化
