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亚天花粉蛋白突变体R163Kn-TCS及其复合物R163Kn-TCS/Ade的晶体结构: 1999年; 用悬滴汽相扩散法得到了Ｒ１６３Ｋｎ－ＴＣＳ的晶体，并用ＡＭＰ浸泡４８小时后得到复合物晶体。在Ｍａｒ－Ｒｅｓｅａｒｃｈ面探测器系统上分别收集了０．２０５和０．１８７ｎｍ分辨率的Ｘ－射线衍射数据。采用同晶差值傅立叶法解析结构，用Ｘ－ＰＬＯＲ软件包进行修正，最后两模型的偏差因子（Ｒ和Ｒｆｒｅｅ）分别为（０．１８７和０．２６３）和（０．１８０和０．２３３），键长偏差都为０．００１３ｎｍ，键角偏差分别为２．７０８°和２．５８４°。结构测定显示Ｒ１６３Ｋｎ－ＴＣＳ和Ｒ１６３Ｋｎ－ＴＣＳ／Ａｄｅ的主链结构无较大变化活性口袋区的结构和氢键体系发生了明显变化。生化分析表明Ｒ１６３Ｋｎ－ＴＣＳ具有糖苷酶活性，但活性降低。这说明，第１６３位侧链的Ｈ＋对ｎ－ＴＣＳ发挥Ｎ－糖苷酶活性至关重要。; 徐世臻吴伸黄岳顺施庆利董贻诚; 关键词：天花粉蛋白蓖麻蛋白突变体晶体结构

neo Trichosanthin及其突变体Y70A neo Trichosanthin的晶体结构研究: 1999年; 天花粉蛋白（Ｔｒｉｃｈｏｓａｎｔｈｉｎ，ＴＣＳ）的一个亚型，ｎｅｏＴｒｉｃｈｏｓａｎｔｈｉｎ（ｎ－ＴＣＳ），及其突变体Ｙ７０Ａｎ－ＴＣＳ被克隆和表达为重组蛋白。用悬滴汽相扩散法得到ｎ－ＴＣＳ和Ｙ７０Ａｎ－ＴＣＳ的晶体。在ＭａｒＲｅｓｅａｒｃｈ面探测器系统上分别收集了０．２０ｎｍ和０．２０５ｎｍ分辨率的Ｘ射线衍射数据。用同晶差值傅立叶法解析了结构。最后晶体学Ｒ因子分别为０．１８３和０．１８４。键长的ｒ．ｍ．ｓ．偏差分别为０．００１６ｎｍ和０．００１４ｎｍ，键角的ｒ．ｍ．ｓ．偏差分别为２．９３０°和２．７３２°。ｎ－ＴＣＳ虽然与ＴＣＳ有１１个氨基酸的差别，但它们都不是活性口袋区的关键残基。并且这些氨基酸的替换绝大多数属于保守替换。和ＴＣＳ相比，这１１个残基及其附近残基的主链间形成的保守氢键在ｎ－ＴＣＳ中没被破坏，它们所处的二级结构也保持不变。所以ｎ－ＴＣＳ的整体结构与ＴＣＳ十分相近。Ｙ７０Ａｎ－ＴＣＳ的晶体在收集数据前曾用含５＇ＡＭＰ的缓冲液浸泡过，活性口袋区没发现可与Ａｄｅｎｉｎｅ相匹配的密度。用ＨＰＬＣ检测Ｙ７０Ａｎ－ＴＣＳ与５＇ＡＭＰ作用后产物，层析图谱上相应位置也没有出现Ａｄｅｎｉｎｅ。上述结果表明，７?; 颜丽吴伸李会广李建辉黄岳顺施庆利董贻诚; 关键词：天花粉蛋白失活蛋白晶体结构

亚天花粉蛋白突变体(R163H n-TCS和R163Q n-TCS)的晶体结构研究: 1999年; 用悬滴汽相扩散法得到了Ｒ１６３Ｈｎ－ＴＣＳ和Ｒ６１３Ｑｎ－ＴＣＳ的晶体，在Ｍａｒ－Ｒｅｓｅａｒｃｈ面探测器系统上分别收集了０．２００和０．２０５ｎｍ分辨率的Ｘ－射线衍射数据。采用同晶差值傅立叶法解析结构，用Ｘ－ＰＬＯＲ软件包进行修正，最后的晶体学Ｒ因子分别为０．１８４和０．１８５，键长偏差分别为０．００１３ｎｍ和０．００１４ｎｍ，键角偏差分别为２．５９０°和２．８１５°。结构测定显示Ｒ１６３Ｈｎ－ＴＣＳ和Ｒ１６３Ｑｎ－ＴＣＳ与ｎ－ＴＣＳ的主链结构无较大变化，活性口袋区的结构和氢键体系发生了明显变化。生化分析表明Ｒ１６３Ｈｎ－ＴＣＳ具有糖苷酶活性，Ｒ１６３Ｑｎ－ＴＣＳ没有糖苷酶活性。这说明，第１６３位侧链的Ｈ＋对ｎ－ＴＣＳ发挥Ｎ－糖苷酶活性至关重要。; 李会广吴伸颜丽李建辉李建辉施庆利黄岳顺; 关键词：突变体晶体结构

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施庆利

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