王超男
- 作品数：4 被引量：5H指数：2
- 供职机构：军事医学科学院基础医学研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生更多>>
- ADAM17在膜蛋白胞外结构域剪切机制中的作用被引量：2
- 2016年
- ADAM17蛋白属于解聚素金属蛋白酶家族，是Ⅰ型多结构域跨膜蛋白，表达于多种组织及肿瘤细胞中。该蛋白是剪切跨膜蛋白胞外结构域的关键蛋白，对膜结合型蛋白的翻译后修饰及蛋白活性的产生具有重要的调节作用，与免疫反应、肿瘤的发生发展、神经发育、病毒传播及衰老等过程密切相关。对ADAM17跨膜蛋白胞外段的剪切功能及其生物学意义进行深入研究，对相关疾病的诊断与治疗具有重要的理论与临床应用价值。
- 王超男董洁邵宁生
- 关键词：跨膜蛋白翻译后修饰
- 人vasorin蛋白胞外结构域单克隆抗体的纯化及应用被引量：2
- 2016年
- 目的:纯化人vasorin(VASN)蛋白胞外结构域的单克隆抗体并鉴定。方法:用表达人VASN蛋白胞外结构域单克隆抗体的杂交瘤细胞免疫小鼠,收集腹水,纯化抗体;ELISA检测单抗的特异性和亲和力,Western印迹、免疫共沉淀、细胞免疫荧光等实验检测单抗的特异性与可能的用途。结果:纯化获得2株抗VASN胞外结构域单抗V20和V21,ELISA结果显示二者均特异性强、亲和力高;Western印迹显示2株单抗均可结合Hep G2细胞中的VASN蛋白,以V20为佳;免疫共沉淀实验结果显示V21能够钓取Hep G2细胞中的VASN蛋白及细胞培养上清中的分泌型VASN;免疫荧光实验结果显示V21能与Hep G2细胞的VASN蛋白结合。结论:纯化获得2株抗人VASN胞外结构域单抗,为进一步研究VASN蛋白的生物学功能提供了实验工具。
- 王超男孙乐桥沈雪莲李少华李洁丁红梅李慧黄皑雪郭晓华郑伟董洁邵宁生
- 关键词：单克隆抗体
- 人肿瘤坏死因子α特异性结合miR-146b的新生物学特性研究
- 2016年
- 目的:探讨人肿瘤坏死因子α(TNF-α)作为micro RNA(mi RNA)结合蛋白的生物学特性。方法:Western印迹检测LPS激活的U937细胞中TNF-α蛋白表达水平,RT-PCR检测几种炎症相关的mi RNA在激活前后表达水平的变化;用RNA结合蛋白免疫共沉淀(RIP)技术钓取U937细胞中TNF-α结合的mi RNA,RT-PCR检测RIP产物中上述几种mi RNA的含量;用凝胶阻滞实验检测TNF-α与mi RNA是否直接结合。结果:LPS激活的U937细胞中能检测到膜结合型和可溶性2种形式的TNF-α,细胞激活前后mi R-16和mi R-21的表达水平在检测的几种mi RNA中最高,mi R-146b和mi R155次之;而RIP产物中mi R-146b的水平在实验组和对照组中有显著差异,其他mi RNA差异不明显;凝胶阻滞实验结果显示mi R-146b能与人TNF-α直接结合。结论:首次证实人TNF-α能够直接特异地结合mi R-146b,提示TNF-α可能作为mi RNA结合蛋白发挥生物学功能。
- 沈雪莲李洁黄皑雪王超男孙乐桥李少华丁红梅李慧郭晓华郑伟董洁邵宁生
- 关键词：人肿瘤坏死因子ΑMICRORNARNA结合蛋白
- 乙醇刺激HepG2细胞分泌VASN蛋白的生物学功能研究被引量：1
- 2016年
- 目的：探究乙醇对HepG2细胞VASN蛋白表达与分泌水平的影响，及其对HUVEC细胞迁移的影响。方法乙醇刺激HepG2细胞，定量PCR （ qPCR）检测HepG2细胞VASN mRNA水平的变化， Western印迹检测HepG2细胞与细胞上清中VASN蛋白水平的变化。划痕愈合实验检测细胞共培养条件下，乙醇刺激的HepG2细胞培养上清对HUVEC细胞迁移的影响。结果 qPCR结果显示，乙醇可上调HepG2细胞VASN mRNA水平。 Western印迹结果显示，细胞VASN蛋白表达与分泌水平升高。划痕愈合实验结果表明乙醇刺激HepG2细胞VASN蛋白的分泌增加，可以促进HUVEC细胞的迁移。结论乙醇刺激导致HepG2细胞VASN蛋白表达水平和分泌水平升高，并可促进与其共培养的HUVEC细胞迁移。
- 孙乐桥王超男郑伟黄皑雪沈雪莲丁红梅李少华李洁李慧白琛俊郭晓华董洁邵宁生
- 关键词：乙醇人脐静脉血管内皮细胞
