孔繁瑞
- 作品数：7 被引量：32H指数：4
- 供职机构：中国科学院遗传与发育生物学研究所更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 萝卜叶绿体DNA花粉育性特异片段的定位被引量：7
- 1989年
- 本实验采用萝卜细胞质雄性不育系401A及其同核保持系401B为材料,利用BamH Ⅰ、EcoR Ⅰ、Bgl Ⅱ和Hind Ⅲ四种内切酶酶解其叶绿体DNA。除Hind Ⅲ外,其余三种内切酶电泳图谱中均显示两系之间的明显差异。将BamH Ⅰ的5个差异片段分别与载体pBR322进行体外连接,获得4种重组体克隆。利用3种膜蛋白质基因探针,分别与两系的叶绿体DNA杂交,杂交均未出现在差异片段所在部位,这说明,两系之间的差别可能与这3种基因无关。将重组体质粒分别与P700叶绿素a脱辅基蛋白质基因探针及反向重复区内rRNA基因区探针杂交,结果表明,有3种重组体质粒所携带的差异片段与rRNA基因探针在杂交中显示出明显的阳性反应。也就是说,这3个差异片段均位于rRNA基因所在的叶绿体基因组的反向重复区中。
- 王虹李继耕孔繁瑞
- 关键词：叶绿体DNA花粉育性
- 油菜叶绿体基因组雄性不育特异DNA片段的定位被引量：13
- 1992年
- 实验选用油菜湘矮不育系及同核保持系叶绿体DNA为材料,用4种限制性内切酶EcoRⅠ、BamHⅠ、PstⅠ和SmaⅠ完全酶解。在EcoRⅠ酶解的保持系ctDNA图式中,观察到唯一的差异片段E3.2kb。将此片段连接于载体pUC9进行克隆,经克隆杂交及电泳分析鉴定,获得重组子。以rRNA基因为探针,与EcoRⅠ酶解的保持系ctDNA杂交,其中一条阳性带显示在差异片段E3.2。进一步以E3.2片段为探针,与经过限制酶BamHⅠ、EcoRⅠ、salⅠ、BgⅢ、HindⅢ和PstⅠ酶解后的rRNA基因反杂交。根据rRNA基因图谱,这一与不育性有关的E3.2kb片段被定位于距16S rRNA基因5'端+2.0至+5.4kb的前导序列中。此结果表明,这段可能与花粉育性形成有关的片段定位于叶绿体基因组反向重复区。
- 孙威高洁李继耕孔繁瑞
- 关键词：雄性不育性叶绿体基因组油菜
- 通过花粉管途径建立泡桐转化系统的初探被引量：8
- 1994年
- 在木本科植物的遗传转化中，迄今所见到的报道全是将某一特定克隆基因导入木本植物。我们利用植物粘粒载体克隆了欧洲黑杨30kb左右的DNA片段，并利用其中的一个克隆片段，通过花粉管途径进行了导入泡桐的研究．泡桐转化植株经DNA分子杂交实验及NPTⅡ酶活性测定证实外源DNA片段已经转移到泡桐细胞中，NPTⅡ基因得到了表达，获得了转基因泡桐植株。
- 钟启宏孔繁瑞孙威李继耕熊耀国赵丹宁张维栋李峰
- 关键词：泡桐花粉管
- PSIIP680 ChlaAP基因在水稻叶绿体基因组中的定位被引量：2
- 1990年
- 本实验总结出一套水稻叶绿体DNA的提取方法,并获得清晰的叶绿体DNA限制性内切酶图谱。Southern杂交结果表明,菠菜PSIIP680ChlaAP基因探针与水稻叶绿体DNA的Pst-1,Pst-14,Pvu-2和Sal-1片段的部分顺序有较高的同源性。根据Hirai和赵衍的水稻叶绿体基因组物理图,可以确定该基因位于紧靠RuBPCaseLS基因,距反向重复区约26kb处。高等植物叶绿体基因组中这种基因排列方式还未见报道。
- 朱嘉晖李继耕孔繁瑞
- 关键词：水稻叶绿体基因组基因定位
- 泡桐基因文库的构建及actin基因同源顺序的亚克隆被引量：1
- 1990年
- 以λ系列EMBL3DNA为载体，LE392为宿主菌，建立了木本植物毛泡桐（Paulownia tomentosa (Thunb)Steudel)丛枝病抗病品系C161基因文库，命名为[λE3/PTS（Bam-Sau)]。其包装效价达到1．1×10^6pfu,重组率为98％。用动物肌动蛋白（actin)基因为探针，从这一基因库中筛选出3．9Kb的泡桐DNA同源顺序进行亚克隆。所得结果表明：动物actin基因在木本植物基因组中存在一定的同源性。
- 孙威孔繁瑞林友刚李继耕
- 关键词：泡桐基因文库亚克隆抗病基因抗病育种
- 叶绿体的遗体工程
- 1995年
- 孙桂华孔繁瑞赵世民
- 关键词：叶绿体转化叶绿体基因组原生质体融合转运肽同源重组
- 萝卜叶绿体DNA花粉育性有关的特异片段的部分序列组成被引量：5
- 1992年
- 本实验序列分析并精确定位了萝卜(Raphanus sativus)叶绿体DNA花粉育性片段B_(21)的部分序列(ZL1)。结果表明,ZL1片段长474bp,其碱基组成是AT丰富的。与烟草全序列的比较分析发现,该片段位于烟草全序列中反向重复区IR_A的142330到142803、IR_B的100199到99726区段,其核苷酸序列与相应的烟草序列比较有96.6%的同源性。该片段具有rps12—rps7操纵子的一部分结构,分别编码核糖体小亚基蛋白S12的C-末端的7个氨基酸残基和S7的N-末端的93个氨基酸残基。两者的氨基酸序列与烟草、玉米、地钱、眼虫藻,大肠杆菌及蓝细菌相应序列的同源性分别为71.4—100%及40—95.5%。 上述结果意味着叶绿体核糖体蛋白质可能和细胞质雄性不育性存在某种联系。
- 张露李继耕孔繁瑞
- 关键词：萝卜叶绿体DNA花粉育性
