罗海燕
- 作品数：3 被引量：5H指数：1
- 供职机构：东北农业大学动物医学学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金黑龙江省自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 抗chTLR3单克隆抗体制备及其初步应用被引量：4
- 2019年
- Toll样受体3(TLR3)是激发机体天然免疫的模式识别受体,为了制备能与天然结构的鸡TLR3(chTLR3)蛋白结合的单克隆抗体,将前期构建的可以在细胞内表达的真核重组质粒pVAX1-Igk-chTLR3免疫BALB/c小鼠,采用杂交瘤技术制备抗chTLR3单克隆抗体;并应用该抗体采用Western blot、流式细胞术及间接免疫荧光技术检测镉中毒雏鸡外周血淋巴细胞与脾内chTLR3的表达变化。结果发现,获得1株阳性杂交瘤细胞,该细胞株单个细胞染色体数量为(94±2)条,细胞上清效价为1∶25,抗体亚类鉴定为IgG3,细胞上清能够与原核表达的chTLR3胞外区蛋白及鸡外周血淋巴细胞中的chTLR3特异性结合。应用此抗体采用Western blot、流式细胞术及间接免疫荧光技术均能够在对照组和染镉组雏鸡外周血淋巴细胞及脾内检测到chTLR3的蛋白表达。结果表明,成功制备了具有天然活性的chTLR3单克隆抗体,该抗体可用于Western blot、间接免疫荧光技术及流式细胞术研究chTLR3在鸡组织细胞的分布定位、表达变化,为示踪chTLR3蛋白分布、表达及研究其在鸡发病机制中的作用提供了重要的物质基础。
- 唐泽群罗海燕葛铭郭荣许丹蕾张瑞莉
- 关键词：单克隆抗体WESTERNBLOT间接免疫荧光
- 鸡传染性腔上囊病病毒(IBDV)感染雏鸡免疫器官巨噬细胞的数量变化被引量：1
- 2017年
- 为明确传染性腔上囊病病毒(IBDV)感染雏鸡免疫器官巨噬细胞的数量变化,将50只14日龄SPF雏鸡随机分为感染组和对照组。感染组经点眼、滴鼻途径每只感染传染性腔上囊病病毒,6×10^(6.5)TCID_(50)。对照组经相同途径给予相同剂量PBS。于感染后第1、4、7、21天及35天快速采取胸腺、腔上囊及脾脏并制成冰冻切片,应用间接免疫荧光法检测免疫器官巨噬细胞的数量变化。结果显示,感染组雏鸡胸腺巨噬细胞数量在感染后第1-4天明显升高(P<0.01或P<0.05),腔上囊、脾脏巨噬细胞数量于感染后第1-7天明显高于对照组(P<0.01或P<0.05),随后降低,于第35天恢复正常(P>0.05)。结果表明,IBDV可导致雏鸡免疫器官内巨噬细胞数量先升高后降低,之后随着机体的自我调节逐渐恢复正常。
- 赵霞张瑞莉栾亚男罗海燕刘瑞葛铭
- 关键词：IBDV雏鸡免疫器官巨噬细胞
- 海兰白鸡CDCD14基因的克隆、表达及多克隆抗体的制备
- 2016年
- 通过克隆获得海兰白鸡CD14基因全长,其与红原鸡CD14氨基酸同源性为98.9%,将其插入pET-30a表达载体中,原核表达获得重组蛋白,约为55 ku,纯化后免疫兔制备多克隆抗体。间接ELISA结果显示多克隆抗体效价为25 600,Western-blot及间接免疫荧光试验结果显示多克隆抗体能够与chCD14重组蛋白、BHK-21细胞内chCD14蛋白及鸡外周血液淋巴细胞内chCD14蛋白特异性结合。本试验表明:制备的多克隆抗体具有天然活性,为进一步研究chCD14在雏鸡组织当中的表达分布奠定基础。
- 罗海燕葛铭解颖颖刘文静吕艾李广兴张瑞莉
- 关键词：CD14多克隆抗体
