李方存
- 作品数：15 被引量：19H指数：3
- 供职机构：广西中医药大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金广西壮族自治区自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 基于miR-126/ADAM9信号通路探讨五脏温阳化瘀汤抗大鼠动脉粥样硬化的作用机制被引量：1
- 2023年
- 目的基于微小RNA-126(miR-126)/解整合素金属蛋白酶9(ADAM9)信号通路研究五脏温阳化瘀汤抗大鼠动脉粥样硬化的作用。方法取SPF级SD雄性大鼠38只,随机选择6只大鼠设为空白组,剩余32只大鼠通过腹腔注射维生素D 3注射液联合高脂饲料喂养方法制备动脉粥样硬化模型。造模6周后将造模成功的大鼠随机分为模型组,阿托伐他汀组及五脏温阳化瘀方低、中、高剂量组,每组6只。空白组和模型组给予生理盐水灌胃,阿托伐他汀组给予阿托伐他汀钙片27.3 mg/(kg·d)灌胃,五脏温阳化瘀方低、中、高剂量组分别给予五脏温阳化瘀汤1.25 g/(kg·d)、2.5 g/(kg·d)、5 g/(kg·d)灌胃,均1次/d,连续灌胃12周。灌胃结束后,采用ELISA法检测血清总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)水平,HE染色观察主动脉病理形态,qRT-PCR法检测主动脉组织中miR126及ADAM9 mRNA表达情况,Western blot法检测主动脉组织中ADAM9蛋白表达情况。结果与空白组比较,模型组大鼠血清TC、TG、LDL-C、TNF-α、IL-1β水平和主动脉组织中ADAM9 mRNA及蛋白相对表达量均明显升高(P均<0.05),血清HDL-C水平和主动脉组织中miR-126相对表达量均明显降低(P均<0.05);与模型组比较,各药物组大鼠血清TC、TG、LDL-C、TNF-α、IL-1β水平和主动脉组织中ADAM9 mRNA及蛋白相对表达量均明显降低(P均<0.05),血清HDL-C水平和主动脉组织中miR-126相对表达量均明显升高(P均<0.05);与五脏温阳化瘀方低、中剂量组比较,阿托伐他汀组与五脏温阳化瘀方高剂量组大鼠血清TC、TG、LDL-C、TNF-α、IL-1β水平和主动脉组织中ADAM9 mRNA及蛋白相对表达量均更低(P均<0.05),血清HDL-C水平和主动脉组织中miR-126相对表达量均更高(P均<0.05),五脏温阳化瘀方高剂量组与阿托伐他汀组各指标比较差异均无统计学意�
- 姜明贺朱欢欢张鼎李方存宋晨曦陈炜胡跃强
- 关键词：动脉粥样硬化
- 温肺降浊方通过Aβ_(25-35)诱导PC12细胞损伤对PINK1/PARKIN介导的线粒体自噬的影响被引量：1
- 2024年
- 目的:探讨温肺降浊方通过Aβ_(25-35)诱导PC12细胞损伤对线粒体自噬的影响。方法:通过重组大鼠β-NGF分化PC12细胞,Aβ_(25-35)干预其成为阿尔茨海默病细胞模型,确定Aβ_(25-35)造模的最佳浓度和时间点,设立温肺降浊方含药血清低(2%)、中(4%)、高(8%)浓度组。MDC染色和JC-1染色法观察自噬小体和线粒体膜电位,免疫荧光化学染色、qPCR和Western Blot检测各组细胞中PINK1、PARKIN、Ubl、Ub、p-Ub、LC3B mRNA和(或)蛋白表达。结果:β-NGF分化PC12细胞在第6天后成为海马神经元细胞形态结构,AD细胞造模条件以5μmol/L终浓度的Aβ_(25-35)干预48 h最佳。与正常对照组比较,模型组自噬小体显著增多,线粒体膜电位明显降低,PINK1、PARKIN、Ubl、Ub、p-Ub、LC3B mRNA和(或)蛋白表达显著升高(P<0.05)。与模型组比较,温肺降浊方含药血清可使模型细胞自噬小体减少,线粒体膜电位明显升高,PINK1、PARKIN、Ubl、Ub、p-Ub、LC3B mRNA和(或)蛋白表达显著降低(P<0.05)。结论:温肺降浊方可减轻Aβ_(25-35)诱导的PC12细胞损伤,其机制可能与PINK1/PARKIN介导的线粒体自噬通路有关。
- 张鼎胡芷涵宋晨曦李方存姜明贺陈炜胡跃强
- 关键词：PC12细胞
- 温肺降浊方对血管性痴呆大鼠海马神经元的作用机制被引量：2
- 2024年
- 目的:观察温肺降浊方对血管性痴呆(VaD)大鼠的作用机制。方法:建立VaD大鼠模型,随机分为模型组、西药组、温肺降浊方低剂量组、温肺降浊方中剂量组、温肺降浊方高剂量组,每组6只。另取6只大鼠设为假手术组,模型组和假手术组给予0.9%氯化钠溶液灌胃;西药组给予尼莫地平灌胃;温肺降浊方各剂量组给予相应剂量的温肺降浊汤灌胃。给药28 d后,采用Morris水迷宫实验评价各组大鼠学习记忆能力;HE及Nissl染色法进行组织病理学检测。采用RT-qPCR和Western blot检测各组大鼠海马组织中沉默信息调节因子1(SIRT1)/肌醇需求酶1α(IRE1α)/剪接型X-盒结合蛋白1(XBP1S)/CCAAT增强子结合蛋白同源蛋白(CHOP)信号通路相关mRNA和蛋白表达。结果:与假手术组比较,模型组大鼠逃避潜伏期明显延长,穿越平台次数则减少。与假手术组比较,模型组大鼠海马CA1区病理损伤严重,神经元细胞明显减少,尼氏小体数量明显减少,SIRT1 mRNA和蛋白表达则降低(均P<0.01)。与假手术组比较,模型组大鼠IRE1α、XBP1S、CHOP mRNA和XBP1S、CHOP蛋白及p-IRE1α/IRE1α明显升高(均P<0.01)。与模型组比较,温肺降浊方中剂量组、温肺降浊方高剂量组、西药组大鼠逃避潜伏期缩短,穿越平台次数增加(均P<0.05)。与模型组比较,西药组和温肺降浊方各剂量组大鼠海马CA1区病理损伤减轻,神经元细胞数量增加,尼氏小体数量增加。与模型组比较,西药组和温肺降浊方各剂量组SIRT1 mRNA和蛋白表达升高,且温肺降浊方高剂量组和西药组表达较高。IRE1α、XBP1S、CHOP mRNA和XBP1S、CHOP蛋白以及p-IRE1α/IRE1α水平降低,且温肺降浊方高剂量组和西药组水平更低(均P<0.01)。结论:温肺降浊方通过激活SIRT1/IRE1α/XBP1S/CHOP信号通路,减轻VaD大鼠海马神经元区病变,从而发挥改善VaD大鼠认知能力的作用。
- 姜明贺张鼎朱欢欢李方存李丽琴宋晨曦陈炜胡跃强
- 关键词：血管性痴呆海马神经元CCAAT增强子结合蛋白
- 五脏温阳化瘀方对血管性痴呆大鼠FLVCR1及BCRP表达的影响
- 2024年
- 目的探讨五脏温阳化瘀方对血管性痴呆大鼠猫白血病病毒C亚类受体1(feline leukemia virus subgroup C receptor,FLVCR1)及胸腺癌抵抗蛋白(breast cancer resistance protein,BCRP)表达的影响。方法通过双侧颈总动脉永久性结扎法建立血管性痴呆大鼠模型,然后将实验动物分为模型组、西药组(尼莫地平片20mg·kg^(-1)·d^(-1))及五脏温阳化瘀方低(1.25 g·kg^(-1)·d^(-1))、中(2.5 g·kg^(-1)·d^(-1))、高(5 g·kg^(-1)·d^(-1))剂量组,另取6只大鼠设为假手术组。各组大鼠给予相应药物干预28 d后,采用Morris水迷宫实验评价各组大鼠学习记忆能力;HE及Nissl染色法进行组织病理学检测;Perls’铁染色检测各组大鼠海马CA1区铁沉积情况;采用qRT-PCR和Western blotting检测各组大鼠海马组织中FLVCR1和BCRP mRNA和蛋白表达水平。结果与假手术组比较,模型组大鼠逃避潜伏期显著性延长(P<0.01);穿越平台次数明显减少(P<0.01);海马CA1区病理损伤严重,尼氏小体数量明显减少,铁沉积明显增多;FLVCR1和BCRP mRNA和蛋白表达水平显著性降低(P<0.01);与模型组比较,西药组、五脏温阳化瘀方中剂量和高剂量组大鼠逃避潜伏期显著缩短(P<0.01),穿越平台次数明显增加(P<0.01);与模型组比较,西药组和五脏温阳化瘀方各剂量组大鼠海马CA1区病理损伤减轻,尼氏小体数量明显增加,铁沉积明显减少;FLVCR1和BCRP mRNA和蛋白表达水平显著性升高,且高剂量组及西药组升高效果最显著(P<0.01);高剂量组与西药组比较无显著差异(P>0.05)。结论五脏温阳化瘀方可以通过上调FLVCR1和BCRP的表达,减少细胞内铁过载,调节铁代谢,抑制铁死亡,从而发挥改善血管性痴呆大鼠认知能力的作用。
- 姜明贺朱欢欢张鼎李方存宋晨曦陈炜胡跃强
- 关键词：血管性痴呆BCRP
- 温阳复元方对脑缺血再灌注损伤大鼠的治疗机制被引量：7
- 2023年
- 目的:观察温阳复元方对脑缺血再灌注损伤模型大鼠JNK1、Bax表达的影响,探究其相关的作用机制。方法:将32只雄性大鼠随机分为五组,模型组、假手术组给予0.9%氯化钠溶液灌胃,温阳复元方低剂量组、温阳复元方中剂量组、温阳复元方高剂量组分别按1.5、3、6 ml剂量给予温阳复元方灌胃。观察成模后各组大鼠TTC染色及第1、3、7天的神经功能缺陷评分;Nissl染色观测组织病理学;IF和RT-qPCR检测脑组织中JNK1、Bax阳性细胞和mRNA表达。Western blotting检测大鼠脑组织中JNK1、Bax蛋白表达。结果:与假手术组相比,模型组大鼠神经功能缺陷评分较高,差异有统计学意义(P<0.01)。造模后,大鼠脑组织出现明显的白色梗死灶,缺血侧神经元轮廓模糊,部分胞质自溶,颗粒脱失,着色不均匀,胞核碎裂消失,尼氏小体含量明显减少,结构不清。与模型组比较,第1、3、7天温阳复元方中剂量组、温阳复元方高剂量组的神经功能缺陷评分均低,差异有统计学意义(均P<0.05)。与模型组比较,温阳复元方低剂量组、温阳复元方中剂量组、温阳复元方高剂量组JNK1、Bax阳性细胞数和mRNA表达均低,且温阳复元方高剂量组最低,差异有统计学意义(均P<0.05)。与模型组比较,温阳复元方低剂量组、温阳复元方中剂量组、温阳复元方高剂量组p-JNK1、Bax、p-Bax蛋白表达均低,且温阳复元方高剂量组最低,差异有统计学意义(均P<0.05)。结论:脑缺血再灌注损伤可能与大脑组织中的JNK1、Bax蛋白增多有关,温阳复元方通过抑制JNK1、Bax蛋白活化,减少神经细胞凋亡,延缓疾病进展,且以高剂量效果较好。
- 张鼎向军军李方存黄晶晶陈炜胡跃强
- 关键词：脑缺血再灌注
- 名中医胡跃强基于“扶阳三焦次第法”论治顽固性失眠经验被引量：6
- 2023年
- 总结胡跃强教授基于“扶阳三焦次第法”治疗顽固性失眠经验。胡跃强教授认为三焦阳虚是顽固性失眠的根本病因,从三焦阳虚导致心肺失降、脾胃气机失调、肝肾失升,分析顽固性失眠的发病机制。根据三焦是人体气血、水火运行的通道,是调和阴阳的关键枢机,阳气以温为用、常易亏易损等生理特点,在治法上采用“三焦次第法”即桂枝法宣通中上二焦,四逆法温固下焦,并倡导择时服药的诊疗思想,疗效显著。
- 李方存张鼎李姿姜明贺宋晨曦胡跃强
- 关键词：顽固性失眠阳虚
- 基于PGAM5-Drp1轴调控线粒体稳态探讨温肺降浊方对血管性痴呆模型大鼠的神经保护作用
- 2024年
- 目的观察温肺降浊方对血管性痴呆(vascular dementia,VaD)大鼠的影响,探究其可能的作用机制。方法36只健康雄性SD大鼠随机分为Sham group、Model group、Donepezil group、WFJZF-L group、WFJZF-M group和WFJZF-H group,每组6只,除Sham group,其余各组制备VaD模型,造模成功后各组以相应药物灌胃,治疗3周后进行各项检测。观察各组大鼠的行为学、海马CA1区形态学、神经树突及线粒体的变化,检测磷酸甘油酸变位酶5(phosphoglycerate mutase 5,PGAM5)、粒体动力相关蛋白(dynamics-related proteins1,Drp1)、神经萎缩相关蛋白1(opticatrophyprotein-1,OPA1)及相关蛋白的表达。结果与Sham group比较,Model group和各干预组大鼠逃避潜伏期延长(P<0.05),穿越平台次数缩短(P<0.05),海马神经元形态稀疏,二级树突棘减少,线粒体外膜破裂;海马组织中PGAM5、Drp1蛋白表达升高(P<0.05),OPA1、Mfn1/2蛋白表达下降(P<0.05);与Model group比较,Donepezil group和WFJZF-H group大鼠逃避潜伏期缩短(P<0.05),穿越平台次数增加(P<0.05),海马神经元数量增多,排列紧密,二级树突增多,线粒体损伤减少;PGAM5、Drp1蛋白表达下降(P<0.05),OPA1、Mfn1/2蛋白表达升高(P<0.05)。结论温肺降浊方可以调控PGAM5-Drp1信号轴以改善线粒体稳态平衡,从而改善大脑认知情况,发挥脑保护效应。
- 张鼎胡芷涵孙春英朱晓东李方存姜明贺秦红玲陈炜胡跃强
- 关键词：血管性痴呆神经保护
- 基于AGE-RAGE/p38MAPK信号通路探讨温阳复元方对脑缺血再灌注损伤大鼠脑损伤的保护作用
- 2024年
- 目的探究温阳复元方对脑缺血再灌注损伤(CIRI)大鼠脑损伤的保护作用。方法大鼠随机分为假手术组、模型组、FPS-ZM1组、温阳复元方组,每组6只。除假手术组外,其余各组大鼠建立CIRI模型,采用TTC染色和改良神经病学严重程度评分(mNSS)评判模型成功与否,TUNEL染色检测神经细胞凋亡情况,免疫荧光染色检测脑组织RAGE、S100β蛋白表达,RT-qPCR法检测脑组织RAGE、p38MAPK mRNA表达,Western blot法检测脑组织RAGE、AGE、HMGB1、p38、Bcl-2蛋白表达。结果与假手术组比较,模型组大鼠脑组织出现明显白色梗死灶,梗死面积增加(P<0.05),神经功能评分升高(P<0.05),神经元凋亡细胞数增多(P<0.05),脑组织RAGE、S100β蛋白表达升高(P<0.05),脑组织AGE、RAGE、HMGB1、p38MAPK蛋白与mRNA表达升高(P<0.05);与模型组比较,FPS-ZM1组和温阳复元方组上述指标均有改善(P<0.05),其中温阳复元方组作用更佳。结论温阳复元方可能通过抑制AGE-RAGE及其下游p38MAPK信号通路的活化,从而减轻神经元凋亡,发挥对大鼠的脑保护作用。
- 张鼎李方存姜明贺宋晨曦陈炜胡跃强
- 关键词：脑缺血再灌注神经元凋亡
- 温肺降浊方通过调节Nrf2/Keap 1-GPx4信号通路抑制铁死亡改善血管性痴呆模型大鼠认知功能障碍的研究
- 2024年
- 目的:观察温肺降浊方对血管性痴呆模型大鼠的影响,探究其可能的作用机制。方法:制备永久性双侧颈总动脉闭塞(2VO)大鼠模型,使用Ferrostatin-1抑制剂和温肺降浊方2.95、5.9、11.8 g/kg干预,持续2个月。观察成模后大鼠学习认知能力,HE染色观察海马病理情况,普鲁士蓝染色、免疫组化、qRT-PCR和Western Blot法检测大鼠海马组织中铁沉积和GPx4、Nrf2、HO-1、Keap 1、Cox2 mRNA及蛋白的表达情况。结果:与假手术对照组比较,模型对照组大鼠逃避潜伏期延长、穿越平台次数明显缩短(P<0.05),海马细胞出现明显水肿及棕蓝色铁颗粒沉积;海马组织中GPx4、Nrf2、HO-1蛋白及mRNA的表达下调(P<0.05),Keap 1、Cox2蛋白及mRNA的表达上调(P<0.05);与模型对照组比较,Ferrostatin-1抑制剂和温肺降浊方各剂量组大鼠逃避潜伏期缩短、穿越平台次数明显增加(P<0.05),海马组织细胞水肿化减少;GPx4、Nrf2、HO-1蛋白及mRNA的表达上调(P<0.05),Keap 1、Cox2蛋白及mRNA的表达下调(P<0.05)。结论:温肺降浊方可能通过调节Nrf2/Keap 1/GPx4信号通路相关蛋白抑制铁死亡,从而减少大脑海马组织中铁颗粒的沉积,从而改善大脑认知情况,以温肺降浊方11.8 g/kg组作用最佳。
- 张鼎李方存姜明贺周珂青秦红玲陈炜胡跃强
- 关键词：血管性痴呆认知功能障碍
- 探索干细胞在阿尔茨海默病的研究前景:2002–2021年文献计量分析
- 2023年
- 随着干细胞在阿尔茨海默病的研究越来越多,这项研究已经成为该领域的研究热点。干细胞疗法是最具前景的一种治疗方法。本研究通过文献计量学可视化分析,以探索干细胞在阿尔茨海默病的研究热点和趋势。构建干细胞对阿尔茨海默病研究的检索式,数据来自Web of Science Core Collection database,使用Cite Space和VOS viewer软件对2002至2021年的文献数据进行分析。干细胞对AD的研究涉及94个国家/地区,共有3629个机构参与,每年呈上升趋势,其中美国和中国是主要的研究国家。Takahashi团队首次培养出诱导多能干细胞,成为众多研究者理论的来源。University of California System是研究成果影响最大的机构, Plos One是最受欢迎的期刊, Maiese发现SIRT1是AD的治疗靶点,并且他的研究成果最多。研究重点包括Brain,Dentate gyrus,Amyloid-beta,Oxidative stress,Neurodegeneration,Inflammation,Pluripotent stem cells, Neural stem cells, Microglia。我们的研究揭示了干细胞在AD中的全球研究趋势,目前研究的热点是诱导多能干细胞模型在AD中的研究,为该领域的研究工作者提高了重要的信息和参考。
- 李方存李方存李梓侯召猛陈炜陈炜陈洁
- 关键词：干细胞阿尔茨海默病文献计量学
