朱华宇
- 作品数:1 被引量:3H指数:1
- 供职机构:第四军医大学西京医院更多>>
- 发文基金:福建省自然科学基金更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- miR-375通过调控EMT参与HER2阳性乳腺癌细胞对曲妥珠单抗的耐药被引量:3
- 2016年
- 目的 :探讨微RNA-375(micro RNA-375,mi R-375)通过调控上皮-间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT),参与人类表皮生长因子受体2(human epidermal growth factor receptor 2,HER2)阳性乳腺癌细胞对曲妥珠单抗耐药的作用及其可能的分子机制。方法:应用MTT法检测并比较HER2阳性乳腺癌亲本敏感细胞株SKBR-3和耐药细胞株SK-BR-3R对曲妥珠单抗的敏感性,采用实时荧光定量PCR和蛋白质印迹法检测两种细胞中mi R-375以及EMT相关蛋白E-钙黏蛋白(E-cadherin)和波形蛋白(vimentin)的表达水平。将mi R-375模拟物转染耐药细胞SK-BR-3R后,采用实时荧光定量PCR和蛋白质印迹法检测细胞中mi R-375、E-cadherin和vimentin表达水平的改变,MTT法检测耐药细胞对曲妥珠单抗的敏感性变化。应用生物信息学软件预测mi R-375的靶基因,并选取异黏蛋白(metadherin,MTDH)基因作为靶基因。进一步应用荧光素酶报告基因系统检测mi R-375对MTDH基因的转录调控作用。设计特异性针对MTDH基因的si RNA,并将其转染耐药细胞SK-BR-3R后,采用蛋白质印迹法观察MTDH表达被干扰后细胞中E-cadherin和vimentin表达水平的改变。结果 :与敏感细胞株SK-BR-3相比,耐药细胞株SK-BR-3R对曲妥珠单抗的敏感性明显降低(P<0.001),而且耐药细胞SK-BR-3R中mi R-375和vimentin的表达水平均明显下调(P<0.001,P<0.05),而EMT特征蛋白E-cadherin的表达水平明显上调(P<0.05)。mi R-375模拟物转染耐药细胞后,mi R-375的表达水平明显升高(P<0.001),vimentin表达水平明显上调(P<0.01),而E-cadherin表达水平下调(P<0.001),并且耐药细胞株对曲妥珠单抗的敏感性升高(P<0.001)。mi R-375对MTDH基因转录具有负向调控作用(P<0.001)。MTDH si RNA转染后,耐药细胞中MTDH和E-cadherin表达水平均下调(P值均<0.001),而vimentin表达水平上调(P<0.001)。结论:mi R-375通过调控细胞EMT,参与了HER2阳性乳腺癌细胞对曲妥珠单抗的耐药;这一作用可能与靶�
- 叶星明贾静王淋林露朱华宇陈颖
- 关键词:微RNA上皮-间质转化曲妥珠单抗