前期已证实红花-葶苈子药对作用于成纤维细胞抑制心肌纤维化,该研究则联合网络药理学和实验验证进一步探究红花-葶苈子药对通过改善心脏微环境抑制心肌纤维化的可能机制。通过检索中药系统药理学数据库与分析平台(Traditional Chinese Medicine Systems Pharmacology Database and Analysis Platform,TCMSP)筛选红花-葶苈子药对活性成分及靶点,GeneCards、药物遗传学与药物基因组学知识库(Pharmacogenetics and Pharmacogenomics Knowledge Base,PharmGKB)、在线孟德尔人类遗传数据库(Online Mendelian Inheritance in Man,OMIM)等数据库获取心肌纤维化靶点,运用Cytoscape 3.8.1软件绘制"活性成分-靶点-疾病"网络。采用STRING数据库构建靶点相互作用网络,CluoGo插件进行生物过程分析,联合使用京都基因与基因组百科全书(Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes,KEGG)和Funrich数据库进行通路富集分析。构建血管紧张素Ⅱ诱导心肌纤维化大鼠,观察红花-葶苈子药对抑制心肌纤维化疗效;选取网络药理学预测与血管内皮细胞相关的信号通路,RT-PCR、ELISA验证红花-葶苈子药对对其相关靶标的影响。结果共筛选出红花-葶苈子药对活性成分31个及相应靶点204个,心肌纤维化靶点4 671个,交集靶点174个。红花-葶苈子药对治疗心肌纤维化的关键靶点包括RAC-α丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶(RAC-alpha serine/threonine-protein kinase,AKT1)、转录因子激活蛋白-1 (transcription factor AP-1,JUN)、丝裂原激活的蛋白激酶1 (mitogen-activated protein kinase 1,MAPK1)、p53蛋白(cellular tumor antigen p53,TP53)、转录因子p65 (transcription factor p65,RELA)、丝裂原激活的蛋白激酶8 (mitogen-activated protein kinase 8,MAPK8)等,生物过程涉及血管直径调节、血管内皮细胞迁移调节、氧化应激引起的细胞死亡等。通路富集分析涉及晚期糖基化产物(advanced glycation end products,AGE)-晚期糖基化终末产物受体(receptor
