李爽
- 作品数：27 被引量：49H指数：4
- 供职机构：南方医科大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金广东省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生自动化与计算机技术社会学经济管理更多>>
- 大鼠白细胞介素10复制缺陷型重组腺病毒前体质粒的构建被引量：2
- 2007年
- 目的:构建含有大鼠白细胞介素10基因的重组复制缺陷型腺病毒前体质粒pAd.rIL-10,为后续病毒构建、真核表达及其动物模型研究提供实验基础。方法:实验于2005-07/2006-04在中山大学附属第一医院普通外科实验室完成。①实验材料:SD大鼠购自中山大学动物实验中心(SCXK(粤)2004-0011)。AdEasy系统由美国John Hopkins肿瘤研究中心惠赠。Thermoscript TMR Tkit和Trizol为Invitrogen产品;质粒小量提取试剂盒(QIAGENE公司);PCR试剂盒、限制性内切酶HindⅢ和SaⅡ、DNA marker(大连宝生物公司);限制性内切酶PmeⅠ(英国NEB公司)。克隆大鼠白细胞介素10基因引物合成及测序由上海博亚生物技术有限公司完成。②实验方法:采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法从健康SD大鼠脾脏新鲜组织中提取的总RNA中,克隆大鼠白细胞介素10基因,采用AdEasy-1腺病毒载体系统,经两步氯化钙法通过E.ColiB J5183细菌内同源重组而获得重组腺病毒前体质粒pAd.rIL-10。③实验评估:使用PCR、酶切及DNA测序方法证实重组质粒中的目的基因。结果:①克隆大鼠白细胞介素10基因:用RT-PCR的方法从健康SD大鼠脾脏组织提取的总RNA中扩增出大鼠白细胞介素10基因,基因两端加上了限制酶酶切位点,均经测序证实。②重组腺病毒前体质粒pAd.rIL-10的鉴定:重组转移质粒pAdTrack-CMV.rIL-10及腺病毒前体质粒pAd.rIL-10均含大鼠白细胞介素10基因,经Hind Ⅲ和SaⅡ双酶切后均获得538bp的大鼠白细胞介素10片段。结论:采用AdEasy-1系统经两步氯化钙法成功构建出大鼠白细胞介素10重组腺病毒前体质粒,方法简便易行,结果稳定可靠。
- 李爽朱家源唐冰朱斌李新强朱旭红毕良宽
- 关键词：白细胞介素10腺病毒载体基因治疗
- 苦味酸-天狼猩红偏振光法对疤痕动物模型的鉴定被引量：2
- 2004年
- 目的:运用组织学方法对裸鼠疤痕动物模型进行鉴定。方法:选取15只4～6周龄裸鼠,建立疤痕 动物模型;疤痕移植后4～6周处死动物,取移植物行苦味酸 天狼猩红染色偏振光观察组织特点。结果:移植 物与临床取材特性一致,符合增生性疤痕特点。结论:苦味酸 天狼猩红染色偏振光检测瘢痕组织胶原是对增 生性瘢痕组织测定的简便、有效手段;运用裸鼠建立疤痕动物模型是行之有效的、稳定的。
- 朱斌朱家源张涛唐冰李新强郑树森陈东张伟李爽
- 关键词：裸鼠动物
- SD大鼠骨髓间充质干细胞体外分离培养及其生长特性和表型的初步研究
- 目的体外分离培养、纯化 SD 大鼠骨髓间充质干细胞（rat mesenchymal stem cells, rMSCs）并进行鉴定,明确其生长和增殖特性,为后续研究提供最理想的基因载体细胞。方法取6 周龄大鼠股骨和胫骨骨...
- 李爽朱家源朱斌唐冰李新强
- 文献传递
- 2002—2005年中山大学附一院烧伤病区患者感染病原菌及抗生素耐药率的调查分析
- 目的实时监测和回顾性分析烧伤病房感染细菌的菌种和药物敏感率,以指导临床合理用药。方法应用 VITEK-AMS 系统检测2002—2005年我院烧伤病区患者病原菌进行分离、鉴定及药敏试验并对资料进行统计分析。结果4年来检出...
- 李爽朱家源崔颖鹏朱斌唐冰刘阳
- 文献传递
- 特重烧伤休克期大面积切痂植皮生存率的分析
- 目的探讨特重烧伤患者休克期大面积切痂、自体微粒皮移植对提高生存率的作用。方法收集1995-2004年多家医院收治的以及相关资料提供的特重烧伤手术病例130例,记录第一次手术时间、切痂面积、并发症出现的时间:使用非条件Lo...
- 朱家源李爽朱斌唐冰李新强钟展芳张伟陈东张晋昕
- 文献传递
- SD大鼠白细胞介素10复制缺陷型重组腺病毒的构建及鉴定(英文)被引量：1
- 2009年
- 背景:重组腺病毒质粒的构建是重组腺病毒制备过程中的中枢环节,传统的细胞内同源重组法步骤多、成功率低、实验周期长。目的:构建含有大鼠白细胞介素10(rIL-10)基因的重组复制缺陷型腺病毒Ad.rIL-10,为真核表达及其动物模型的研究提供实验基础。设计、时间及地点:开放性实验,于2005-07/2006-04在中山大学附属第一医院完成。材料:SD大鼠1只。AdEasy系统由美国JohnHopkins肿瘤研究中心惠赠。ThermoscriptTMRTkit和Trizol为Invitrogen产品;HEK-293保存于中山大学动物实验中心细胞库;克隆大鼠白细胞介素10基因引物合成及测序由上海博亚生物技术有限公司完成。方法:采用反转录聚合酶链反应的方法从健康SD大鼠脾脏新鲜组织中提取的总RNA中克隆rIL-10基因,采用AdEasy-1腺病毒载体系统经E.ColiBJ5183细菌内同源重组及HEK-293包装而获得重组腺病毒Ad.rIL-10。主要观察指标:用Westernblot和RT-PCR的方法鉴定Ad.rIL-10并进行滴度测定。结果:自健康SD大鼠脾脏组织中克隆rIL-10基因,构建出重组腺病毒Ad.rIL-10。经PCR扩增、酶切鉴定、DNA测序最终确定插入序列为rIL-10,Westernblot和RT-PCR均检测出细胞内rIL-10基因及其蛋白表达。再通过扩增、纯化后获得滴度为1.0×1014pfu/mL的重组腺病毒。结论:采用AdEasy-1系统,经细菌内同源重组及HEK-293细胞包装、扩增,纯化后获得足够数量和质量的病毒,方法简便易行,结果稳定可靠。
- 李爽宋仁刚唐冰朱斌朱旭红朱家源毕良宽
- 关键词：白细胞介素10腺病毒载体基因疗法
- rIL-10复制缺陷型重组腺病毒载体的构建
- 目的构建含有大鼠白细胞介素10(rat interleukin 10,rIL-10)基因的重组复制缺陷型腺病毒 Ad．rIL-10,为真核表达及其动物模型的研究提供实验基础并为脓毒症等严重感染性疾病的基因治疗做
- 李爽朱家源朱斌唐冰李新强
- 文献传递
- 同型半胱氨酸通过下调血红素加氧酶--1加重顺铂诱导的小鼠急性肾损伤
- 急性肾损伤(acute kidney injury，AKI)是一组以肾功能急剧减退为特征的临床综合征。顺铂引起的急性肾损伤模型成为了一个研究各种类型急性。肾损伤的早期病理生理特征的一个比较理想的动物模型。同型半胱氨酸是一...
- 李爽
- 关键词：急性肾损伤同型半胱氨酸血红素加氧酶-1病理机制
- 文献传递
- 大鼠骨髓间充质干细胞的体外分离培养及其生长特性和表型被引量：15
- 2007年
- 间充质干细胞（MSC）是一种具有多向分化、体外扩增、自我更新能力的细胞。本研究旨在分离rMSCs，并观察其类型特征及生长特性。
- 李爽朱家源朱斌唐冰李新强朱旭红毕良宽
- 关键词：骨髓间充质干细胞体外分离培养表型自我更新能力多向分化
- rIL-10复制缺陷型重组腺病毒前体质粒的构建
- 目的利用大肠杆菌 E.coli BJ5183内同源重组构建载有大鼠白细胞介素10（rat interleukine-10,rIL-10）的,为其后续的真核表达及动物模型的研究提供实验基础。方法采用 RT-PCR 的方法从...
- 李爽朱家源朱斌唐冰李新强
- 文献传递
