汪劲
- 作品数：3 被引量：7H指数：1
- 供职机构：纽约州立大学更多>>
- 发文基金：吉林省科技发展计划基金更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生理学自动化与计算机技术更多>>
- 延胡索乙素通过线粒体活性氧调控能量代谢表型转换促进人肝细胞癌凋亡被引量：7
- 2022年
- 线粒体是维持细胞稳态的重要细胞器,在决定细胞命运中起着至关重要的作用。该文旨在探讨延胡索乙素(levo-tetrahydropalmatine, THP)上调线粒体活性氧(mitochondrial reactive oxygen species, mtROS)对人肝细胞癌自噬流和能量代谢表型的影响。选用SMMC-7721和BEL-7402细胞株作为模型,经THP(100μmol·L^(-1))和/或N-乙酰-L-半胱氨酸(N-acetyl-L-cysteine, NAC)(10μmol·L^(-1))处理SMMC-7721和BEL-7402细胞24 h后,利用MitoSOX荧光探针与流式细胞术检测mtROS变化水平,并同时通过荧光显微镜对mtROS进行可视化观察;利用CYTO-ID自噬荧光探针检测自噬流的变化情况,采用Western blot检测2种肝癌细胞中微管相关蛋白轻链3(microtubule-associated protein light chain 3,LC3)与磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶(AMP-activated protein kinase, AMPK)蛋白表达;Seahorse XFp检测细胞线粒体能量代谢变化趋势,通过实时无标记RTCA检测对肝癌细胞增殖的影响;Annexin V-FITC和PI/RNase染色流式细胞术检测细胞凋亡率,MitoTracker Red CMXRos荧光探针可视化观察线粒体膜电位变化。结果表明,与对照组相比,THP可促进SMMC-7721和BEL-7402肝癌细胞内mtROS产生,发现联合NAC后削弱了由THP单独引发的自噬或自噬流的增加。添加自噬抑制剂氯喹(chloroquine, CQ)后发现,THP可进一步促进mtROS产生并增加凋亡率。进一步实验表明,THP可以抑制线粒体呼吸水平,导致线粒体基础呼吸、三磷酸腺苷(adenosine triphosphate, ATP)产量及最大呼吸能力下降。同时,THP显著降低了肝癌细胞的增殖指数和线粒体膜电位,进而诱导细胞发生凋亡达到抑制细胞增殖的目的,而NAC则缓解这种细胞凋亡的产生。结果表明,THP上调mtROS水平可显著促进人肝细胞癌细胞自噬,引发的自噬为保护性自噬,并通过重编程能量代谢表型进而抑制线粒体呼吸,激活线粒体凋亡途径而引发细胞凋亡。
- 尹逊哲刘作家汪劲
- 关键词：延胡索乙素自噬能量代谢线粒体呼吸
- 基于生物分子折叠—结合能量地貌的动力学路径
- 分子识别是现代分子生物学的一个重要问题。亲合性和特异性在理解自然界分子结合的过程中是至关重要的。亲合性通过非结合状态同结合状态的自由能之差来量度。而特异性是用来表征自然状态和其它状态之间的差别。在实际中,合理的药物设计需...
- 汪劲张坤吕宏阳汪尔康
- 文献传递
