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许彦鸣

作品数：73 被引量：187H指数：7
供职机构：汕头大学医学院更多>>
发文基金：国家自然科学基金国家杰出青年科学基金国家高技术研究发展计划更多>>
相关领域：医药卫生生物学文化科学农业科学更多>>

合作作者

文献类型

  • 67篇期刊文章
  • 3篇会议论文
  • 2篇专利

领域

  • 44篇医药卫生
  • 27篇生物学
  • 1篇农业科学
  • 1篇文化科学

主题

  • 44篇细胞
  • 37篇基因
  • 26篇凋亡
  • 20篇蛋白
  • 15篇HELA细胞
  • 14篇融合蛋白
  • 14篇细胞凋亡
  • 13篇凋亡作用
  • 13篇基因表达
  • 13篇促凋亡
  • 13篇促凋亡作用
  • 9篇肿瘤
  • 9篇克隆
  • 9篇CASPAS...
  • 8篇肉瘤
  • 8篇构型
  • 8篇骨肉瘤
  • 8篇癌细胞
  • 6篇荧光
  • 5篇蛋白基因

机构

  • 63篇第四军医大学
  • 20篇第四军医大学...
  • 9篇第四军医大学...
  • 7篇汕头大学
  • 3篇兰州军区乌鲁...
  • 1篇第三军医大学...
  • 1篇南京大学医学...
  • 1篇清华大学
  • 1篇第四军医大学...
  • 1篇第四军医大学...
  • 1篇免疫学教研室
  • 1篇生物化学与分...

作者

  • 72篇许彦鸣
  • 60篇杨安钢
  • 38篇王成济
  • 28篇赵晶
  • 24篇贾林涛
  • 21篇于翠娟
  • 15篇范清宇
  • 15篇裘秀春
  • 12篇金明
  • 9篇孟艳玲
  • 8篇杨彤涛
  • 8篇温伟红
  • 7篇王立锋
  • 7篇周勇
  • 7篇马保安
  • 7篇蔡娜丽
  • 7篇刘道然
  • 6篇龙华
  • 6篇单乐群
  • 5篇张淼丽

传媒

  • 15篇第四军医大学...
  • 13篇细胞与分子免...
  • 4篇中国肿瘤生物...
  • 4篇汕头大学医学...
  • 3篇现代肿瘤医学
  • 2篇听力学及言语...
  • 2篇生物化学与生...
  • 2篇实用医学杂志
  • 2篇实用口腔医学...
  • 2篇中国生物化学...
  • 2篇医学研究生学...
  • 1篇生物技术通讯
  • 1篇口腔颌面外科...
  • 1篇中国癌症杂志
  • 1篇科学通报
  • 1篇中华肿瘤杂志
  • 1篇中华医学杂志
  • 1篇安徽医科大学...
  • 1篇癌症
  • 1篇中国病理生理...

年份

  • 1篇2020
  • 4篇2017
  • 1篇2016
  • 1篇2015
  • 1篇2012
  • 1篇2011
  • 1篇2010
  • 1篇2009
  • 2篇2008
  • 8篇2007
  • 9篇2006
  • 4篇2005
  • 12篇2004
  • 7篇2003
  • 14篇2002
  • 3篇2001
  • 2篇2000
共 73 条 记 录，以下是 1-10
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排序方式：
PTI-1表达载体构建及在大肠杆菌中的高效表达和纯化被引量：2
2002年
目的　构建表达人前列腺癌诱导基因 1(PTI- 1)蛋白的重组质粒 ,在大肠杆菌中诱导高效表达并纯化 .方法　应用亚克隆 PTI- 1基因的 p U C19/ PTI- 1质粒 ,重新构建表达载体 PTI- 1/ p GEX4T- 1,酶谱分析鉴定出正确的重组质粒 ,诱导表达 ,进行 SDS- PAGE分析 ,应用 GSH树脂纯化表达产物 .结果　筛选出 5个与 p GEX4T- 1正向重组质粒 ,其中一株表达一个 Mr为 6 90 0 0的新蛋白 ,并以包涵体的形式存在 ,蛋白在宿主菌中高效表达 ,表达量为 43.2 %,纯化蛋白得到纯度为 79.72 %的 GST/ PTI- 1融合蛋白 .结论　重组质粒 PTI- 1/PGEX4T- 1的构建和 GST/ PTI- 1融合蛋白高效表达及纯化的成功使简便获得前列腺癌诱导蛋白成为可能 .
付振虹王禾武国军许彦鸣袁建林王成济杨安钢
关键词：大肠杆菌纯化前列腺肿瘤基因基因表达
重组人肿瘤坏死因子-α联合肿瘤坏死因子受体1基因转染杀伤舌癌细胞的实验研究被引量：4
2004年
目的 :观察重组人肿瘤坏死因子 α(rhTNF α)对建系细胞 (T T)作用效应与机制。方法 :反转录PCR方法克隆人TNFR1基因 ,并将其稳定转染入舌癌细胞中 ,建系并鉴定 ;通过MTT法检测、DNA降解片段琼脂糖凝胶电泳及电镜观察检测rhTNF α对T T细胞的作用效果与机制。结果 :成功构建含TNFR1基因的真核表达质粒 pcDNA3 TNFR1,并建立表达TNFR1蛋白活性的舌癌细胞系T T ;较之亲本Tca 8113细胞及转染空载体的T pc细胞 ,rhTNF α对T T细胞具有更强的细胞毒作用 ,且通过介导细胞凋亡的方式发挥其作用。结论 :重组人肿瘤坏死因子 α联合肿瘤坏死因子受体 1基因转染可有效地杀伤舌癌细胞 ,为舌癌基因治疗提供理论依据。
刘大庆司徒镇强曹云新许彦鸣于翠娟王成济杨安钢
关键词：肿瘤坏死因子受体肿瘤坏死因子舌癌细胞
分泌表达的抗ErbB2单链抗体与重构型人半胱氨酸蛋白水解酶3融合蛋白对SKBr3细胞的靶向杀伤作用被引量：1
2003年
目的　探讨分泌表达的抗erbB2单链抗体与重构型人半胱氨酸蛋白水解酶 (caspase 3)融合蛋白对ErbB2抗原阳性肿瘤细胞的靶向杀伤作用。方法　将重构型人caspase 3基因亚克隆入pCMV e2 3scFv PEII PEIII相应位点 ,构建表达分泌型的抗erbB2单链抗体与重构型人caspase 3融合蛋白基因的真核表达载体 pCMV e2 3scFv PEII revcasp 3,转染人T淋巴瘤细胞系Jurkat,筛选并建系 ,ELISA检测培养上清中融合蛋白的分泌表达以及对人乳腺癌细胞SKBr3生长的抑制作用 ,并将重组质粒经脂质体包裹后肌肉注射荷瘤裸鼠研究其对肿瘤的抑制作用 ,间接免疫荧光检测重构型人caspase 3蛋白在瘤体的靶向分布。结果　融合蛋白基因可通过Jurkat细胞分泌表达并杀伤SKBr3细胞 ,肌肉注射重组质粒明显延长荷瘤裸鼠生存时间 (延长 72 % )和抑制荷瘤裸鼠肿瘤生长 (抑制率为77% )。间接免疫荧光染色显示重构型人Caspase 3融合蛋白具有靶向分布。结论　分泌表达的抗erbB2单链抗体与重构型人Caspase 3融合蛋白靶向诱导SKBr3细胞死亡。
张立红贾林涛于翠娟曲萍董海龙赵晶许彦鸣王成济杨安钢
关键词：分泌表达融合蛋白靶向杀伤作用CASPASE-3基因疗法
针对HER2/neu的siRNA对非小细胞肺癌细胞生长的抑制作用被引量：4
2006年
目的:构建针对HER2/neu的RNA干涉载体,观察对HER2/neu表达抑制及抑制后对非小细胞肺癌生长的影响.方法:设计和合成长度为64nt的脱氧寡核苷酸链,退火互补成双链,克隆至pSUPER质粒载体,转化DH5α菌株,提取质粒,转染过表达HER2/neu的肺腺癌细胞系SPCA1,RTPCR检测HER2/neu的mRNA表达,Westernblot和间接免疫荧光法检测HER2/neu的蛋白表达,FCM分析细胞周期变化,MTT法观察细胞生长.结果:肺腺癌细胞系SPCA1存在HER2/neu过表达;成功构建了HER2/neu特异性RNA干涉载体pSUPERsiHER2;瞬时转染SPCA1细胞,HER2/neu的mRNA及蛋白表达均降低;G1期细胞较亲代增加9.9%;肿瘤细胞增殖速度减慢(P<0.05).结论:成功构建了HER2/neuRNA干涉载体,转染后可有效降低肺腺癌细胞系SPCA1HER2/neu的mRNA转录及蛋白水平表达,阻滞转染细胞于G1期,造成转染细胞生长速度减慢,这有望为肺癌基因治疗提供一种选择手段.
任新玲钱桂生鲍炜付海京贾林涛张瑞王涛许彦鸣杨安钢
关键词：SIRNARNA干涉HER2/NEU癌细胞生长
人fadd基因cDNA的克隆和诱导舌癌细胞凋亡的研究被引量：1
2002年
目的 :观察人 fadd基因对舌癌 (Tca 8113 )细胞的凋亡诱导作用。方法 :用反转录PCR获取人fadd基因 ,将基因克隆入真核表达载体 pcDNA3和 pIRES2 EGFP中 ,脂质体法转染舌癌细胞 ,通过细胞计数、荧光显微镜及电镜观察、流式细胞仪等检测被转染细胞的生长及其凋亡状况。结果 :成功获取了人fadd基因。与对照组相比 ,在转染 1～ 3d内 ,fadd基因的表达导致舌癌细胞存活数目减少 ,大量细胞发生凋亡。结论 :人 fadd基因可以诱导转染的舌癌细胞发生凋亡。
刘大庆司徒镇强许彦鸣曹云新于翠娟王成济杨安钢
关键词：克隆舌癌细胞凋亡基因疗法
NT3基因工程细胞经脑脊液途径的耳蜗内生物学效应的初步证明被引量：15
2002年
目的　通过脑脊液途径移植神经营养因子 - 3(NT3)基因工程细胞 ,初步观察其耳蜗内听觉生物学效应。方法　将体外构建的NT3基因工程细胞扩大培养 ,收集浓缩培养上清中的蛋白 ,用印迹杂交鉴定其分泌蛋白的生物学效应 ,再将适当的细胞直接移植到 2 0天龄近交BALB/C小鼠的脑脊液中 ,4 0天后比较移植前后的畸变产物耳声发射 (DPOAE)幅值。结果　体外构建NT3基因工程细胞是可行的 ,其具备分泌NT3的功能 ,经脑脊液途径注射后观察到BALB/C小鼠耳蜗功能的老化在高频范围内得到了延缓 ,DPOAE高频范围幅值下降减缓。结论　NT3基因工程细胞具有较好的体外体内生物学效应 ,可以用于进一步实验治疗感音性聋的研究 ;
高下王锦玲杨安钢金明许彦鸣王枫
关键词：生物学效应神经营养因子-3基因转染基因工程细胞耳蜗感音性聋
重构型caspase-3的表达及其对SKBr3细胞的凋亡诱导作用被引量：2
2002年
目的:探讨重构型caspase-3基因的表达对肿瘤细胞的凋亡诱导作用。方法:用重组PCR的方法获得大、小亚基顺序颠倒的重构型caspase-3基因并将其克隆入真核表达载体pcDNA3,转染乳腺癌细胞系SKBr3细胞,通过HE染色、流式细胞仪分析及免疫组化等方法观察其表达后对细胞的促凋亡活性,并将载体DNA直接注射荷瘤裸鼠研究其对肿瘤的抑制作用。结果:重构型caspase-3基因可在SKBr3细胞内表达,转染组较同期对照组出现明显的细胞死亡现象,pcDNA3-revcasp-3重组质粒直接注入对荷瘤裸鼠肿瘤生长有明显抑制作用。结论:重构型caspase-3基因表达可诱导SKBr3细胞凋亡。
张立红贾林涛陈广生曲萍于翠娟赵晶许彦鸣王成济杨安钢
关键词：凋亡SKBR3乳腺癌肿瘤细胞
重组抗HER2 ScFv/tbid基因的表达及其对乳腺癌SKBr-3细胞的促凋亡作用被引量：1
2006年
目的:观察构建的重组抗HER2ScFv/tbid基因在SKBr-3细胞中的表达及其对转染的SKBr-3细胞的作用.方法:用限制性内切酶双酶切已构建的pcDNA-bid质粒,获得带有PE转膜结构域和tbid的重组基因,将所获基因插入到真核表达载体pCMV单链抗体基因ScFv23e的下游,转染SKBr-3细胞.间接免疫荧光法检测目的蛋白的表达,MTT法检测目的基因转染后细胞的增殖情况.结果:转染SKBr-3细胞后,检测出目的蛋白的表达.MTT实验发现细胞的增殖被明显抑制.间接免疫荧光双标记染色检测tBid的表达,并可观察到Cytc在细胞质中存在,SKBr-3细胞出现凋亡.结论:重组抗HER2ScFv/tBid分子可以在转染的SKBr-3细胞中表达,并且可抑制转染细胞的生长,诱导细胞发生凋亡.
王芳裘秀春王立锋许彦鸣赵晶孟艳玲贾林涛王成济范清宇杨安钢
关键词：BID乳腺肿瘤
重组抗HER2融合蛋白基因ScFv/tBid对骨肉瘤E10细胞的促凋亡作用被引量：1
2008年
目的:构建抗HER2重组融合蛋白基因ScFv/tBid,并探讨其对骨肉瘤E10细胞的促调亡作用。方法:通过间接免疫荧光染色、流式细胞仪(FCM)检测E10细胞膜表面HER2的表达。将抗HER2单链抗体基因e23sFv与铜绿假单胞菌外毒素PE的转膜结构域基因(PEⅡ)和tBid基因连接,构建抗HER2重组融合蛋白基因ScFv/tBid,将其克隆入真核表达载体pCMV中构建重组pCMV-ScFv/tBid载体,转染骨肉瘤E10细胞。间接免疫荧光法检测目的蛋白表达和细胞形态学变化,Annexin V染色流式细胞术及TUNEL法检测E10细胞的凋亡情况。结果:流式细胞仪检测到E10细胞膜表面有HER2的表达。成功构建重组融合蛋白基因质粒pCMV-ScFv/tBid。重组质粒转染E10细胞后,间接免疫荧光双标记染色检测到E10细胞中tBid的过表达;细胞色素C在细胞质中出现;细胞出现明显的固缩、核浓缩等形态特征。Annexin V染色后流式细胞仪检测可见实验组细胞凋亡率较对照组明显升高(16.1% vs 4.5%);TUNEL染色显示,E10细胞出现典型的凋亡特征。结论:重组抗HER2融合蛋白基因ScFv/tBid可以在转染的骨肉瘤E10细胞中表达,并诱导骨肉瘤细胞发生凋亡。
裘秀春单乐群纪振钢杨彤涛龙华许彦鸣周勇马保安杨安钢范清宇
关键词：TBID人表皮生长因子受体2融合蛋白骨肉瘤细胞
针对HBV X基因的siRNA高效抑制HepG2.2.15细胞和转基因小鼠中HBV的基因表达和复制
＜正＞RNA干涉是双链RNA介导的、序列特异的转录后基因沉默现象。由于能够高效特异地关闭或降低特定基因的表达,且具有特异性高、起效快、作用效果强等特点,使得RNAi
杨安钢刘家云温伟红赵晶贾林涛许彦鸣孟艳玲
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