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马晓玲: 作品数：16 被引量：18H指数：2; 供职机构：新疆大学生命科学与技术学院生物资源基因工程重点实验室更多>>; 发文基金：国家自然科学基金新疆维吾尔自治区高技术研究发展计划项目更多>>; 相关领域：生物学医药卫生农业科学经济管理更多>>

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采用高通量测序技术发现和鉴定抗卵泡刺激素受体骆驼纳米抗体: 卵泡刺激素受体（Follicle-stimulating hormone receptor，FSHR）不仅在生殖系统中发挥重要作用，最近研究发现其在多种肿瘤血管内皮细胞特异性表达，与肿瘤血管新生有密切关系，并且可能参与骨...; 马晓玲; 关键词：高通量测序技术卵泡刺激素受体细胞免疫化学

抗CD47单链抗体制备及抗原结合活性分析被引量：1: 2017年; [目的]研究旨在制备抗CD47小分子单链抗体,并分析其与抗原的结合能力和阻断作用的活性。[方法]采用DNA合成方法,将抗CD47的单克隆抗体B6H12的重链可变区(VH)和轻链可变区(VL),通过短肽(Gly4Ser)3连接形成B6H12单链抗体(B6H12-scFv),在大肠杆菌中可溶性表达并纯化B6H12-scFv。ELISA和Western Blot方法检测与人重组CD47的结合。检测EC9706和KYSE150两种食管癌细胞表面CD47的表达,细胞ELISA和流式细胞术分析B6H12-scFv与细胞表面CD47的结合。最后采用竞争ELISA分析B6H12-scFv对CD47与髓样细胞表面的信号调节蛋白α(SIRPα)结合的阻断能力。[结果]成功获得纯度达到90%以上的可溶性单链抗体。EC9706和KYSE150细胞均高表达CD47。细胞ELISA和流式检测B6H12-scFv浓度为50μg/m L可与EC9706表面CD47有较好结合。B6H12-scFv浓度为40μg/m L时也可以竞争性阻断CD47与SIRPα的结合。[结论]成功地构建了抗CD47单链抗体,浓度在20μg/m L具有EC9706的结合活性,也具有阻断作用。; 席欧彦贾二坷赵婷秦瑞坪马晓玲李江伟; 关键词：CD47 单链抗体阻断作用

采用免疫亲和色谱方法从骆驼血清中纯化抗CD47特异性抗体被引量：2: 2019年; 本研究从骆驼血清中制备抗CD47特异性抗体并分析其与重组蛋白CD47和EC9706细胞膜表面CD47结合情况。从骆驼血清中纯化出总Ig G,再利用偶联上CD47的CNBr琼脂糖树脂免疫亲和纯化出抗CD47特异性抗体,通过ELISA和Western blotting验证其结合情况,通过细胞ELISA鉴定抗CD47特异性抗体与食管癌细胞膜表面CD47结合。结果显示通过两步免疫亲和色谱成功获得抗CD47特异性抗体,ELISA和Western blotting说明该抗体与重组蛋白CD47有强的结合活性和特异性,细胞ELISA检测抗CD47抗体浓度在20μg/mL时与EC9706细胞表面CD47有较好的结合。本研究首次利用免疫亲和色谱方法从骆驼血清中获得抗CD47特异性抗体,并与食管癌细胞有一定的结合活性,为肿瘤靶向治疗提供了可能。; 李宁娟合木巴提.卡马勒汗马晓玲李江伟; 关键词：特异性抗体

携带人卵泡刺激素受体的慢病毒载体疫苗的构建及其免疫效应检测被引量：1: 2016年; 制备携带卵泡刺激素受体的慢病毒载体疫苗,并研究其对小鼠的免疫效应。将卵泡刺激素受体胞外区(fshr366)基因克隆到慢病毒载体上,采用脂质体转染法将重组质粒转染至293T细胞中,包装并产生含有目的基因的病毒颗粒;分别利用RT-PCR和Western blot检测感染病毒颗粒的293T细胞中fshr366在m RNA水平及蛋白水平的表达情况;用携带fshr366的病毒颗粒单次腹腔免疫BALB/c小鼠,分别在免疫0、14、21和28 d对小鼠眼眶采血,ELISA法检测免疫小鼠血清的特异性并测定抗体滴度。酶切和测序结果表明fshr366基因片段成功构建到慢病毒载体上。将包装产生的携带fshr366的慢病毒颗粒感染293T细胞后,RT-PCR和Western blot检测结果表明细胞在转录水平和蛋白水平均表达fshr基因。ELISA结果显示携带fshr366的慢病毒颗粒单次腹腔免疫小鼠后,免疫14 d就激起了机体的体液免疫反应,抗体滴度达到1∶1 600。成功制备了携带卵泡刺激素受体的慢病毒载体疫苗,其可以在小鼠体内激发FSHR抗原特异的早期持续性免疫反应。; 马晓玲刘红春李江伟; 关键词：卵泡刺激素受体慢病毒载体疫苗体液免疫反应

抗程序性死亡受体-1纳米抗体的制备及鉴定被引量：1: 2018年; 目的制备能与程序性死亡受体-1（PD-1）抗原高亲和力结合的骆驼源纳米抗体,为后续开展其功能性研究提供实验基础.方法采用真核表达的PD-1-Fc重组蛋白对新疆双峰驼进行6次免疫,采集其外周血并从中分离得到淋巴细胞,进行巢式PCR扩增获取骆驼重链抗体可变区（VHH）基因,并构建噬菌体展示文库.然后采用固相酶联免疫吸附测定（ELISA）法筛选噬菌体展示文库,包被质量浓度依次降低（5.00、2.50、1.00 μg/ml）的PD-1抗原于ELISA板中,对噬菌体展示文库进行3轮亲和淘选.接着采用可溶性单克隆ELISA法进一步筛选与PD-1结合的单个克隆.根据DNA测序结果挑选具有多次重复序列的3个VHH单克隆构建至pET22b载体,转化大肠杆菌BL21 （DE3）感受态细胞后采用异丙基-β-D-硫代半乳糖苷进行诱导表达.最后采用镍柱亲和层析纯化重组VHH抗体蛋白,蛋白质印迹法（Western Blot）和ELISA法检测其与PD-1抗原的结合活性和亲和力.结果采用重组蛋白PD-1-Fc对双峰驼免疫6次后,激发了高滴度的特异抗体,免疫血清效价达到1∶32 000.从免疫后的骆驼淋巴细胞构建了库容大小为2.6× 108 cfu/ml的VHH噬菌体展示文库.经3轮亲和筛选后,采用可溶性单克隆ELISA法进一步筛选获得46个吸光度（A600）值在0.6以上的单个VHH克隆.其中VHH-B7、VHH-H5和VHH-H12三个克隆序列具有较高重复,表明获得了显著富集.Western Blot及ELISA法检测结果显示,纯化的B7、H5和H12纳米抗体均与PD-1抗原具有较好的结合活性,且具有较高的亲和力,亲和力常数分别为1.19×1011、1.63×1011、1.59×1011 L/mol.结论通过对VHH噬菌体展示文库进行亲和筛选,获得了能与PD-1抗原高亲和力结合的抗PD-1骆驼源纳米抗体,为后续开展其功能性研究提供了实验基础.; 范利华马晓玲李江伟; 关键词：程序性死亡受体-1 噬菌体展示

新疆生产建设兵团土地利用变化及驱动力分析: 土地利用与覆被变化目前是全球变化研究的前沿和热点课题,而土地利用与覆被变化的驱动力研究又是该研究的核心内容。本文以新疆生产建设兵团为例,通过对其1996-2005年10年间的土地利用的动态变化分析,从不同的角...; 马晓玲; 关键词：土地利用变化驱动力主成分分析新疆生产建设兵团; 文献传递

基于GIS的鼓浪屿旅游信息系统的设计与开发被引量：5: 2011年; 如今GIS技术日渐成熟,发展旅游地理信息系统不仅可以保护旅游资源,而且能够提高旅游业的服务质量,为旅游者出外旅游提供方便。以厦门鼓浪屿为例,以组件式地理信息系统软件为基础平台,论述了利用MO控件设计和开发旅游地理信息系统,并结合VB语言定制开发了鼓浪屿旅游信息系统。该系统是在GIS工具系统的功能支持下,结合游客的实际需求,探索传统旅游信息发布管理方式与GIS技术进一步结合的关键技术问题,开发了基本图层操作、信息查询检索、标注功能、线路推荐、数据输出、路线选择分析等实用性功能,特别突出信息以多媒体形式呈现。为实现旅游信息的多源、实时、动态、形象管理提供了快速有效的技术途径,也便于旅游者进行有关旅游服务信息的查询分析,真正实现"数字旅游"。; 艾尧高敏华马晓玲; 关键词：旅游地理信息系统

新疆双峰驼纳米抗体噬菌体展示文库多样性的生物信息学分析: 2016年; 【目的】骆驼免疫系统中只存在重链抗体,其可变区VHH片段是最小的天然抗体片段。通过对双峰驼VHH基因进行序列分析,了解双峰驼VHH基因特征,分析VHH文库多样性组成。【方法】采用新疆双峰驼VHH特异引物扩增全部抗体基因片段,连接到M13噬菌粒载体上,与p III蛋白融合表达在噬菌体表面,构建噬菌体展示文库。基因测序和菌落PCR方法,分析文库大小和阳性克隆插入率。NCBI-Ig GBLAST工具对抗体序列进行IMGT编号命名,Web Logo工具分析抗体保守序列分布频率,MEGA6软件对VHH序列进行同源性比对和系统进化树构建。【结果】利用免疫的新疆双峰驼淋巴细胞,构建了库容量为1.4×109的VHH抗体噬菌体展示文库。对91个随机挑选的文库TG1单菌落进行PCR。结果表明该文库VHH阳性插入率为97%,DNA测序表明文库多样性为97.8%。对91个克隆DNA测序结果进一步分析表明,这些基因中除2个为常规VH抗体外,其余均为重链VHH抗体。根据抗体序列中的特征氨基酸分布,将91个抗体序列划分为7个亚群。【结论】构建的新疆双峰驼VHH文库多样性较好,生物信息学分析揭示出文库中多样性克隆的分布和特征,有助于新疆双峰驼纳米抗体噬菌体展示文库的进一步构建。; 冯亚宁姜志强马晓玲李江伟; 关键词：双峰驼单域抗体生物信息学分析

采用CDR3亲和力转移方法快速获得抗FSHR抗体: 2017年; 【目的】评价骆驼来源的纳米抗体c Ab BCII10作为非抗体亲和力转移骨架的潜能,采用亲和力转移的方法,将FSHR结合肽段移植到c Ab BCII10的抗原结合区以快速获得抗FSHR抗体。【方法】将FSHR结合肽FSH33-53编码序列,分别移植入纳米抗体c Ab BCII10的CDR1和CDR3区域中,命名为VHH-h FSH1和VHH-h FSH3。采用DNA合成方法获得VHH-h FSH1,VHH-h FSH3和c Ab BCII10的DNA编码序列,把这些DNA序列克隆到p ET22b载体上,将其转化到BL21(DE3)感受态细胞中。经过诱导和表达再用Ni离子亲和纯化获得纯的单域抗体。采取ELISA方法鉴定纯化的c Ab BCII10,VHH-h FSH1、VHH-h FSH3与FSHR的结合能力及特异性。【结果】通过框架移植获得的VHH-h FSH1,VHH-h FSH3和c Ab BCII10蛋白均在细菌胞间质可溶性表达。将FSHR结合肽FSH33-53移植到c Ab BCII10的CDR3获得的VHH-h FSH3具有特异结合FSHR活性。【结论】c Ab BCII10可以作为移植的框架,FSH和FSHR结合肽段移植到c Ab BCII10的CDR1和CDR3区可以获得亲和性较高的抗FSHR抗体。; 席欧彦邱玲玲马晓玲秦瑞坪赵婷李江伟; 关键词：FSHR

基于双峰驼单域抗体库的蒜氨酸酶抑制剂的筛选和鉴定: 骆驼体内存在一种缺失轻链仅具有两条重链的IgG抗体,称为重链抗体(heavy chain antibody,HCAb)。重链抗体可变区VHH(variable domain of the heavy chain of H...; 席欧彦邱玲玲秦瑞坪赵婷范利华陈姣李宁娟马晓玲李江伟; 关键词：双峰驼单域抗体蒜氨酸酶酶抑制剂

马晓玲

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