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刘计存
作品数:
1
被引量:1
H指数:1
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相关领域:
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2009
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基因成像体外监测人肿瘤坏死因子相关的诱导凋亡配体基因在肺癌A549细胞中表达的实验研究
被引量:1
2009年
目的应用作者构建的同时携带人肿瘤坏死因子相关的诱导凋亡配体(hTRAIL)基因和萤火虫荧光素酶(luc)基因的腺病毒双表达载体(Ad—hTRAIL—luc),以luc为报告基因,体外监测hTRAIL基因的表达及其作用。方法携带增强型绿色荧光蛋白(EGFP)基因的腺病毒载体(Ad—EGFP)以不同感染复数(MOI)感染肺癌A549细胞,48h后检测腺病毒载体的感染效率。Ad—hTRAIL—luc分别以不同MOI感染A549细胞,用流式细胞仪48h后分别检测hTRAIL的表达率及A549细胞的凋亡率;用液闪计数仪检测荧光素酶发光的每分钟计数(cpm)。携带luc基因的腺病毒载体(Ad—luc)以不同MOI感染A549细胞,48h后检测荧光素酶发光的cpm值。Ad—hTRAIL—luc转染A549细胞后,对各组细胞的hTRAIL表达率及细胞凋亡率结果(自然对数转换后)、cpm值结果进行完全随机设计资料的方差分析,并对hTRAIL表达率及细胞凋亡率的2组数据进行直线相关分析。对Ad—EGFP感染后阳性率及Ad—luc感染后cpm值进行完全随机设计多样本比较的秩和检验。结果Ad—hTRAIL—luc转染A549细胞后,各组hTRAIL基因的表达率经自然对数转换后分别为(2.37±0.04)%、(3.16±0.03)%、(3.64±0.03)%、(3.96±0.02)%、(4.24±0.02)%、(4.34±0.02)%,各组间差异具有统计学意义(F=7364,P〈0.01),两两比较差异均有统计学意义(P〈0.01);将各组细胞凋亡率进行自然对数转换后分别为(1.52±0.04)%、(2.93±0.02)%、(3.39±0.02)%、(3.64±0.02)%、(3.86±0.02)%、(4.08±0.02)%、(4.20±0.02)%,各组间差异具有统计学意义(F=12456.7,P〈0.01),两两比较差异均有统计学意义(P〈0.01);各组细胞检测到的cpm值分别为4655614-26801、10385764-29417、9376554-23197、7864324-20028、5242884-16338、4015664-15
赵纳
崔建岭
郭志远
郭志萍
孙英彩
刘计存
关键词:
基因表达调控
肿瘤坏死因子
基因疗法
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