李飞
- 作品数:3 被引量:8H指数:2
- 供职机构:中国药科大学更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金中央高校基本科研业务费专项资金更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学更多>>
- 抗βhCG蛋白疫苗的抗肿瘤作用被引量:4
- 2010年
- 以人绒毛膜促性腺激素β亚基(βhCG)的羧基端109~118的6段串联重复表位为靶点、热休克蛋白65(HSP65)为载体,设计一种新型的蛋白疫苗HSP65-X6-βhCGCTP37,探讨其能否抑制小鼠前列腺癌,并且对其抗肿瘤的作用机理进行部分探讨。以制备的HSP65-X6-βhCGCTP37免疫C57BL/6小鼠,分别检测体液免疫应答和细胞免疫应答。通过ELISA法,从血清中检测到高滴度的抗βhCGIgG类抗体。Western blot实验证明小鼠血清中的抗体能够特异性识别βhCG表位。淋巴细胞增殖实验的结果显示,HSP65-X6-βhCGCTP37的免疫能够有效的刺激脾淋巴细胞的增殖。预防性实验的结果显示,HSP65-X6-βhCGCTP37激发的免疫应答对于RM-1肿瘤攻击起到有效的保护作用,与PBS阴性对照组比较,平均肿瘤重显著降低(P〈0.05)。同时有效地减少了小鼠的肺转移(P〈0.01);抑制了小鼠皮内肿瘤模型中的血管新生(P〈0.01)。HSP65-X6-βhCGCTP37蛋白疫苗能有效地抑制小鼠前列腺癌的生长。
- 叶嘉燕胡向兵邢芸侯景李飞张帆金亮李泰明刘景晶曹荣月
- 关键词:蛋白疫苗前列腺癌
- 鼠粒细胞巨噬细胞集落刺激因子的纯化和复性研究(英文)被引量:1
- 2013年
- 粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)是一种造血生长因子和促炎细胞因子。重组鼠源粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子在抗肿瘤及抗炎研究中有着极其重要的作用。以NcoI和BamH I为酶切位点将mGM-CSF编码序列插入到pET-28a载体中。转染E.coli宿主菌BL21后得到以包涵体形式表达的蛋白,表达量占菌体总蛋白量51.6%。包涵体的纯化条件在实验中进一步优化,然后溶解于8 mol/L尿素中。采用稀释法在2 mol/L尿素缓冲液中添加PEG对蛋白进行复性。复性后的产物经过离子交换层析纯化后得到高纯度的有活性的mGM-CSF。通过体内白细胞计数和体外髓样细胞增殖检测表明纯化的蛋白具有mGM-CSF全部的生物活性。这种制备方法能够从每升发酵液中获得8.06 mg蛋白,具有蛋白表达量高,复性和纯化方法简便易得的特点,适用于规模生产。
- 曹荣月陈檬葛驰宇汤啸天李飞张鹏徐茂磊刘景晶
- 关键词:包涵体聚乙二醇纯化复性
- 肿瘤细胞裂解物疫苗与其修饰的树突状细胞联合抗A20鼠淋巴瘤的作用被引量:3
- 2013年
- 将A20淋巴瘤细胞,反复冻融,获得肿瘤细胞裂解物的抗原肽,以来源于结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis)热休克蛋白70(HSP70)第407-426(mHSP70407~426,M)的两段串联重复序列M2小肽为佐剂,通过双功能偶联试剂戊二醛偶联制备肿瘤细胞疫苗A20-M2,偶联产物在体外修饰未成熟的DC,通过检测负载肿瘤细胞抗原的DC细胞分泌的细胞因子以及抗原来确定被修饰DC细胞的成熟度,获得成熟DC即获得DC疫苗。用A20-M2与DC两种疫苗联合给药治疗小鼠,实验结果显示,激发的免疫应答对于A20肿瘤攻击起到有效的保护作用,与PBS阴性对照组比较,平均肿瘤重显著降低(P〈0.01),通过ELISA法,从小鼠血清中检测到高滴度抗细胞裂解物类抗体,淋巴细胞增殖试验显示疫苗联合给药后能够有效的刺激脾淋巴细胞的增殖反应。A20-M2能够有效的刺激DC细胞成熟,A20-M2与成熟DC细胞联合给药能够有效的抑制小鼠A20淋巴瘤的生长。
- 曹荣月李飞邢芸徐茂磊陈檬张鹏汤啸天黄巧玲
- 关键词:疫苗树突状细胞生物治疗