赵倩
- 作品数：3 被引量：8H指数：2
- 供职机构：南华大学医学院肿瘤研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金湖南省教育厅科研基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- miR-33b表达载体构建及表达活性检测
- 2017年
- 目的:构建miR-33b真核表达载体及其表达活性检测。方法:人工合成miR-33b成熟cDNA序列,以GV251为载体,构建miR-33b真核表达载体,并对重组克隆进行测序确保载体构建成功;采用脂质体转染法将miR-33b表达载体导入人胃癌细胞MKN-28中,通过倒置荧光显微镜观察转染效率,再利用实时定量RT-PCR检测miR-33b的表达,以检测外源基因的表达活性。结果:成功构建了miR-33b真核表达载体;转染细胞后采用倒置荧光显微镜观察表明载体中GFP的表达活性较好;实时定量RT-PCR结果表明,相较于对照组细胞,miR-33b转染组中miR-33b表达显著增加,且具有显著性差异(P<0.05)。结论:成功构建miR-33b真核表达载体,并为进一步研究miR-33b参与胃癌发生发展机制奠定基础。
- 杨晓燕赵倩尹华丽雷小勇甘润良
- 关键词：MIRNA真核表达载体
- 胃癌的分子分型研究进展被引量：6
- 2016年
- 胃癌是最常见的恶性肿瘤之一，是一种发病率和病死率较高的恶性肿瘤。据统计，全球每年新发胃癌近100万例，每年有72万余人因胃癌死亡，超过一半的新发病例发生在东亚，尤其以中国、日本及其他东亚国家多见。
- 赵倩杨晓燕甘润良
- 关键词：胃癌分子分型恶性肿瘤新发病例病死率发病率
- FBXO47 3'-UTR双荧光素酶报告载体构建及与miR-33b-5p靶向验证被引量：2
- 2018年
- [目的]构建FBXO47基因3'-UTR双荧光素酶报告载体,并验证miR-33b-5p与FBXO47的靶向关系。[方法]采用生物信息学软件预测miR-33b-5p与FBXO47结合位点;利用PCR扩增FBXO47基因3'-UTR序列,将其克隆到GV272载体中,构建FBXO47野生型及突变型双荧光素酶报告质粒;将miR-33b-5p或阴性对照分别与野生型GV272-FBXO47-wt 3'-UTR或突变型GV272-FBXO47-mut 3'-UTR双荧光素酶报告质粒共转染至293T细胞中,双荧光素酶报告系统检测各组荧光素酶活性。[结果]酶切及测序结果表明,野生型GV272-FBXO47-wt 3'-UTR及突变型GV272-FBXO47-mut 3'-UTR双荧光素酶报告载体构建成功;荧光素酶活性结果表明,相较于对照组,miR-33b-5p可使野生型GV272-FBXO47-wt 3'-UTR的荧光素酶活性降低66%左右;而定点突变GV272-FBXO47-mut 3'-UTR的荧光素酶荧光素酶活性没有显著变化。[结论]成功构建了FBXO47基因3'-UTR的荧光素酶报告基因载体,miR-33b-5p与FBXO47存在靶向性。
- 杨晓燕谢聃赵倩尹华丽雷小勇甘润良
