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缺氧状态下人视网膜色素上皮细胞中音猥因子与血管内皮生长因子表达的关系被引量：1: 2018年; 目的观察缺氧状态下人视网膜色素上皮（hRPE）细胞中音猥因子（Shh）与血管内皮生长因子（VEGF）表达的关系。方法传代培养hRPE细胞，取对数生长期3～6代细胞用于实验。将hRPE细胞分为正常对照组、缺氧实验组及环巴明抑制组。缺氧实验组加入100gmol／LCoCl2，环巴明抑制组于制作缺氧状态前1h加入20μmol／L的环巴明进行预处理。3组细胞培养4、8、12、24h。采用荧光定量聚合酶链反应检测3组hRPE细胞中Shh、VEGFmRNA表达。采用酶联免疫吸附法检测正常对照组、缺氧实验组细胞培养上清液中Shh、VEGF蛋白表达。采用Pearson相关性分析法分析缺氧实验组hRPE细胞中Shh、VEGFmRNA表达与蛋白表达之间的关系。结果正常对照组可见少量Shh、VEGFmRNA及蛋白表达。缺氧实验组Shh、VEGFmRNA及蛋白表达较正常对照组明显增加，差异有统计学意义（F=178．364、183．732、77．456、91．572，P〈0．01）。环巴明抑制组Shh、VEGFmRNA表达较缺氧实验组明显降低，差异有统计学意义（F=68．745、121．834，P〈0．01）。相关性分析结果显示，缺氧实验组hRPE细胞中Shh蛋白表达与VEGF蛋白表达呈正相关（r=0．942，P〈0．05）；ShhmRNA表达与VEGFmRNA表达呈正相关（r=0．970，P〈0．01）。环巴明抑制组hRPE细胞中ShhmRNA表达与VEGFmRNA表达无相关性（r=0．915，P〉0．05）。结论缺氧状态下hRPE细胞中Shh与VEGF表达呈正相关。; 纪鹏雷宁玉宋斌王丽君侯亚南; 关键词：血管内皮生长因子类视网膜色素上皮缺氧

音猬因子信号通路在缺氧诱导的人视网膜色素上皮细胞中血管内皮生长因子表达中的作用被引量：1: 2016年; 目的观察探讨音猬因子（Shh）信号转导通路在缺氧诱导的人视网膜色素上皮（hRPE）细胞血管内皮生长因子（VEGF）表达中的作用。方法hRPE-19细胞分为正常对照组（Cont组）、缺氧组。缺氧组加入100μmol／L CoCl2再分为缺氧对照组（CoCl2组）、cyclopamine处理组（CYA组）、二甲基亚砜对照组（DMSO组）。CYA组于造成缺氧前lh加入20μmol／L的cyclopamine进行预处理；DMSO组加入1‰DMSO。各组细胞培养4、8、12、24h。采用荧光定量PCR（RT—PCR）检测细胞内Shh、VEGFmRNA的表达；酶联免疫吸附测定试验（ELISA）检测细胞培养上清液中VEGF蛋白含量。结果RT—PCT检测结果显示，缺氧刺激4、8、12、24h，缺氧组细胞内Shh、VEGFmRNA表达逐渐增高，与Cont组细胞内Shh（F=45．260）、VEGFmRNA（F=264．938）表达比较，差异有统计学意义（P=0．001）。CYA组细胞内Shh、VEGFmRNA表达与CoCl2组比较，差异均有统计学意义（P〈0．01）；DMSO组细胞内Shh、VEGFmRNA表达与CoCI。组比较，差异均无统计学意义（P〉0．05）。ELISA检测结果显示，CoCl2组细胞培养上清液中VEGF蛋白含量与Cont组比较，差异有统计学意义（F=3156．676，P=0．001）。cYA组细胞培养上清液中VEGF蛋白含量较CoCl2组明显降低，差异均有统计学意义（P〈0．01）。结论Shh信号转导通路可能参与了缺氧引起的hRPE细胞中VEGF的表达。; 侯亚南雷宁玉宋斌王丽君; 关键词：血管内皮生长因子类视网膜色素上皮细胞

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侯亚南

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