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大豆低温诱导启动子GmERF9P的克隆及活性鉴定被引量：6: 2017年; 为获得低温诱导基因GmERF9启动子,并分析该启动子的功能,利用PCR技术从大豆叶片基因组DNA中克隆1885bp的GmERF9启动子序列GmERF9P。序列分析表明,GmERF9P序列中含有多种与逆境相关的顺式作用元件。将GmERF9P构建到植物表达载体pCAMBIA1301上并转化烟草。通过PCR检测共获得6株T_1阳性转基因烟草株系。对野生型烟草和转基因烟草进行低温处理2h,通过GUS组织化学染色和实时荧光定量PCR检测GUS基因的表达量。结果显示GmERF9P在低温处理下能够提高GUS基因的表达量,具有低温诱导启动活性。; 翟莹张军任巍巍张闯赵艳张梅娟; 关键词：大豆启动子转基因烟草

大豆低温诱导型启动子、包含该启动子的重组表达载体及应用: 大豆低温诱导型启动子、包含该启动子的重组表达载体及应用，本发明涉及植物基因工程领域，具体涉及大豆基因启动子序列在低温胁迫下可以作为启动子调控基因的表达。本发明的目的是为了解决有效的大豆低温诱导型启动子未被研制出来的问题。...; 翟莹邵淑丽张军赵艳任巍巍张闯; 文献传递

沉默MDR1基因可增强三尖杉酯碱诱导的SGC7901/ADM细胞凋亡: 2018年; 为探讨沉默MDR1基因对三尖杉酯碱诱导SGC7901/ADM细胞凋亡的影响,将本实验室构建的靶向MDR1基因的RNAi干扰载体pSilencer 2.1-3,转染胃癌SGC7901/ADM细胞,经三尖杉酯碱处理后,通过MTT法检测细胞活力,激光共聚焦显微镜和DNA琼脂糖凝胶电泳检测细胞凋亡现象。研究发现,pSilencer 2.1-3稳定转染SGC7901/ADM细胞后,三尖杉酯碱对细胞的IC_950）值由（2.527±0.316）μg/m L降至（0.719±0.087）μg/mL,相对逆转率达到（72.435±2.921）%,从而提高了SGC7901/ADM细胞对三尖杉酯碱的敏感性。激光共聚焦显微镜下,细胞形态发生改变,染色质凝聚、边缘化,琼脂糖凝胶电泳DNA呈梯状条带,呈现明显的凋亡特征,结果表明,沉默MDR1基因增强了三尖杉酯碱诱导的SGC7901/ADM细胞凋亡。; 张闯邵淑丽李旭艳张珍珠张伟伟恽冬泽; 关键词：三尖杉酯碱

大豆5个新发现ERF基因的生物信息学及表达分析被引量：4: 2016年; ERF转录因子广泛存在于植物中并且参与植物对生物及非生物胁迫的响应。从NCBI数据库中获得5个新的ERF基因,Gm ERFa/b/c/d/e。蛋白序列分析显示,5个ERF基因均含有一个保守的AP2/ERF结合域。进化分析表明,Gm ERFe与Gm ERF3和Gm ERF7同源性最高,Gm ERFb、Gm ERFc与Gm ERF5的同源性最高,Gm ERFd与Gm EREBP1的同源性较高,而Gm ERFa与其他ERF蛋白的同源性均较低。实时荧光定量PCR结果显示,5个基因都主要在大豆的根和叶中表达。逆境处理后的实时荧光定量PCR结果显示,Gm ERFd/e主要对乙烯信号和低温产生响应,Gm ERFb主要对干旱产生响应,而Gm ERFa主要对低温产生响应。; 翟莹张军赵艳高士童孙婉姝张闯任巍巍王秀文王玉书; 关键词：大豆 ERF转录因子生物信息学分析

大豆ERF转录因子基因GmERF8的克隆与表达分析被引量：8: 2016年; ERF转录因子广泛存在于植物中并且参与植物应对生物及非生物胁迫的响应。本研究利用RT-PCR技术从大豆中克隆获得1个新的ERF转录因子基因Gm ERF8,开放阅读框全长627 bp,编码1个由208个氨基酸残基组成的分子量为23.43 k D的蛋白。蛋白结构预测发现,该蛋白含有1个典型的AP2/ERF结合域,2个预测的核定位信号和1个保守的EAR抑制元件。进化分析表明Gm ERF8蛋白与烟草Nt ERF3蛋白的同源性最高。实时荧光定量PCR表明,Gm ERF8在大豆的根和叶中表达量较高。ABA、高盐和低温处理均使Gm ERF8表达量下降;乙烯(ET)和干旱处理则使Gm ERF8的表达量先下降后升高。转录调节能力分析结果显示,Gm ERF8可以抑制报告基因的表达。上述实验结果表明,Gm ERF8可能作为转录抑制子参与大豆对环境胁迫的应答。; 翟莹张军赵艳任巍巍张闯孙婉姝高士童; 关键词：大豆 ERF转录因子 GM 抑制子

大豆低温诱导型启动子、包含该启动子的重组表达载体及应用: 大豆低温诱导型启动子、包含该启动子的重组表达载体及应用，本发明涉及植物基因工程领域，具体涉及大豆基因启动子序列在低温胁迫下可以作为启动子调控基因的表达。本发明的目的是为了解决有效的大豆低温诱导型启动子未被研制出来的问题。...; 翟莹邵淑丽张军赵艳任巍巍张闯

大豆SbPRP1和SbPRP2基因在非生物胁迫下的表达及载体构建: 2017年; 为研究大豆细胞壁脯氨酸富集蛋白基因在非生物胁迫下发挥的作用,利用实时荧光定量PCR,对大豆中的两个脯氨酸富集蛋白基因SbPRP1和SbPRP2在非生物胁迫下的表达情况进行检测。结果显示:SbPRP1在高盐和低温处理下表达量下降,分别在处理后1和24 h达到最低值;在模拟干旱处理下表达量先下降后升高,处理后24 h达到最大值。SbPRP2在高盐、模拟干旱和低温处理下表达量均有所升高,分别在处理后24,1和5 h达到最大值。表明SbPRP1和SbPRP2可能参与了大豆对不利环境的适应性调控。通过RT-PCR从大豆叶片中扩增SbPRP1和SbPRP2的基因全序列并构建到植物表达载体pRI101-AN上。; 翟莹张军赵艳任巍巍张闯; 关键词：大豆抗逆性

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张闯