秦少杰
- 作品数:5 被引量:9H指数:2
- 供职机构:宁夏医科大学总医院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金宁夏回族自治区自然科学基金宁夏回族自治区科技厅科技攻关项目更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- siRNA干扰CTHRC1可体外抑制甲状腺乳头状癌TPC-1细胞的增殖并诱导凋亡
- 2021年
- 目的探讨胶原三股螺旋重复蛋白1(CTHRC1)甲状腺乳头状癌TPC-1细胞增殖、凋亡的影响。方法成功筛选干扰甲状腺乳头状癌TPC-1细胞CTHRC1表达的siRNA,以脂质体转染法将siRNA转染甲状腺乳头状癌TPC-1细胞,采用real-time PCR和Western blot检测转染后TCP-1细胞中CTHRC1mRNA和蛋白表达的变化。实验分组:将筛选的干扰序列转染TPC-1细胞作为干扰组(si-CTHRC1组),将随机阴性对照序列转染的TPC-1细胞作为阴性对照组(si-NC组),以不做任何处理TPC-1细胞为空白组(WT组)。采用CCK-8实验检测细胞增殖;流式细胞术AV/PI双染观察各组TCP-1细胞凋亡的变化;采用Western blot法检测各组TPC-1细胞中含剪切型半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶-3(c-Caspase-3)蛋白、剪切型多聚ADP核糖聚合酶1(c-PARP1)蛋白表达水平以及磷酸化细胞外信号调节激酶1/2(ERK1/2)表达水平。结果将筛选出明显抑制TPC-1细胞CTHCR1表达的siRNA转染细胞后,TPC-1细胞中CTHRC1的mRNA和蛋白表达水平降低(P<0.05)。与WT组和si-NC组相比,si-CTHRC1组的细胞活降低(P<0.05);与对照组相比,si-CTHRC1组的TPC-1细胞细胞凋亡率升高,Western blot实验发现:si-CTHRC1组的c-caspase-3、c-PARP1蛋白表达水平均升高(P<0.05);si-CTHRC1组ERK1/2蛋白的磷酸化水平增加。结论干扰CTHRC1能够抑制TPC-1细胞的增殖并诱导凋亡,此过程可能通过激活ERK1/2信号通路介导。
- 唐振宁丁小云秦少杰张朝林
- 关键词:甲状腺癌凋亡SIRNA干扰
- miR-509-3p靶向BCL2基因调控乳腺癌细胞增殖、侵袭、迁移及凋亡的分子机制被引量:6
- 2019年
- 目的探讨微小RNA-509-3p(miR-509-3p)调控乳腺癌细胞增殖、侵袭、迁移及凋亡的分子机制。方法 qRT-PCR检测miR-509-3p、B淋巴细胞瘤(BCL)2在乳腺癌组织及不同乳腺癌细胞株中的表达情况;双荧光素酶报告基因实验检测miR-509-3p与BCL2之间的相互作用;噻唑蓝(MTT)实验与流式细胞术分别检测miR-509-3p对乳腺癌MDA-MB-231细胞增殖及凋亡能力的变化情况;Transwell迁移及侵袭实验检测miR-509-3p对MDA-MB-231细胞迁移及侵袭行为的变化情况;Western印迹检测miR-509-3p对BCL2、细胞周期蛋白(CyclinD)1、p21、基质金属蛋白酶(MMP)-2、MMP-9蛋白的调控情况。结果与癌旁正常组织相比,乳腺癌组织中miR-509-3p的表达水平显著下调(P<0.05),与其他乳腺癌细胞相比,乳腺癌MDA-MB-231细胞中miR-509-3p表达最低,而BCL2的表达水平相反;上调miR-509-3p表达MDA-MB-231细胞的增殖、迁移及侵袭能力明显降低(P<0.05),而细胞凋亡水平明显升高(P<0.05),CyclinD1、MMP-2、MMP-9表达水平明显降低(P<0.05),而p21表达水平明显升高(P<0.05);miR-509-3p可靶向调控BCL2表达;上调BCL2表达可逆转上调miR-509-3p表达对乳腺癌MDA-MB-231细胞增殖、凋亡、迁移及侵袭的作用。结论 miR-509-3p能够靶向抑制BCL2而抑制乳腺癌细胞增殖、迁移、侵袭并促进细胞凋亡。
- 秦少杰刘清媛唐振宁刘奇伦
- 关键词:乳腺癌迁移
- 腹腔镜与开腹手术治疗胃癌D2根治术的近期疗效被引量:2
- 2016年
- 目的通过对腹腔镜辅助胃癌D2根治术与开腹胃癌根治术的比较分析,评价其对肿瘤的根治性和近期疗效。方法采用统一入组标准、同期临床对比研究方法,对2014年1月-2015年10月对行腹腔镜辅助胃癌D2根治术(腹腔镜手术组,104例)与开腹胃癌根治术(开腹手术组,122例)的226例患者围手术期临床指标进行分析。结果腹腔镜手术组与开腹手术组病理分期、并发症发生率、清扫淋巴结数、手术时间、术后24h白细胞数差异均无统计学意义(P均<0.05);与开腹胃癌手术组比较,腹腔镜手术组术中出血量少、切口小、住院时间短、术后排便排气时间早、进食时间早(P均>0.05);两组并发症发生率差异无统计学意义(P<0.05)。结论腹腔镜胃癌D2根治术与传统开腹手术相比较,不增加患者炎症反应,也不增多手术并发症,具有手术出血少、切口小、术后恢复快、住院时间短等优点。
- 秦少杰吴立刚胡志强刘奇伦
- 关键词:胃癌腹腔镜开腹手术
- 食管癌术后并发胃瘫的防治
- 2013年
- 目的探讨食管癌术后胃瘫发生的高危因素及其防治措施。方法回顾性调查我院2003—2011年诊治的食管癌术后18例胃瘫病例(A组),并与同期未发生胃瘫377例患者(B组)进行比较分析。结果患者术时>4h、颈吻合、合并糖尿病、术后紧张忧虑的患者术后较易发生胃瘫。结论术时长、高位吻合、合并糖尿病、术后紧张忧虑是术后发生胃瘫的高危因素。
- 秦少杰张红霞李涛
- 关键词:食管癌胃瘫
- 环状RNA hsa_circ_0002185对乳腺癌细胞瘤细胞活力和侵袭能力的影响及其作用机制被引量:1
- 2022年
- 目的:探讨环状RNA hsa_circ_0002185对乳腺癌细胞瘤细胞活力和侵袭能力的影响及其作用机制。方法:收集2018年1月至2020年1月在宁夏医科大学总医院接受根治性手术治疗的20对乳腺癌组织及癌旁,通过qRT-PCR检测hsa_circ_0002185和hsa-miR-1248在人乳腺上皮细胞MCF10A和人乳腺癌细胞(MCF-7、T47D、BT-474和SK-BR-3)中mRNA的表达水平。构建T47D-siCirc(hsa_circ_0002185沉默)和T47D-NC(空载体对照)细胞株系,并以T47D作为空白对照,qRT-PCR检测hsa_circ_0002185 mRNA的表达水平;分别采用CCK-8细胞活性实验、划痕实验和Transwell实验检测hsa_circ_0002185对T47D细胞的增殖、迁移和侵袭能力;免疫荧光实验检测E-cadherin和Vimentin表达;使用生物信息学网站Circular RNA Interactome预测hsa_circ_0002185可互补结合的miRNA,再根据Targetscan网站预测相应miRNA可靶向结合的基因;Western blot检测MAPK/ERK信号通路蛋白和E-cadherin和Vimentin表达情况;回复实验通过下调hsa-miR-1248验证hsa_circ_0002185对T47D细胞的影响。结果:hsa_circ_0002185在4种人乳腺癌细胞的表达水平均比在人乳腺上皮细胞MCF10A中高,并且在乳腺癌组织中的mRNA表达水平比在正常组织高;hsa-miR-1248的表达水平呈相反情况;T47D-siCirc细胞系相比空白对照细胞系和T47D-NC细胞系,细胞的活性明显降低,迁移能力和侵袭能力显著下降,E-cadherin表达明显升高,Vimentin明显下降(P<0.05);Circular RNA Interactome网站预测结果显示,hsa_circ_0002185可与hsa-miR-1248互补结合,Targetscan网站预测分析显示,hsa-miR-1248与Raf1存在靶向结合位点;Western blot检测结果显示T47D-siCirc组中hsa-miR-1248表达明显高于空白对照组与T47D-NC组,Raf1、P-MEK1/2、MEK1/2、P-ERK1/2和ERK1/2的表达明显低于空白对照组与T47D-NC组(P<0.05);空白对照组和T47D-NC组中上述指标的表达量无统计学意义(P>0.05);回复实验表明下调hsa-miR-1248可逆转hsa_circ_0002185沉默对T47D细胞的影响。
- 秦少杰宁明亮刘清媛唐振宁
- 关键词:乳腺癌MAPK/ERK信号通路上皮间质转化