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一种高纯度小鼠原代脑微血管内皮细胞的分离培养方法被引量：3: 2016年; 背景:脑微血管内皮细胞是神经科学研究领域的重要工具细胞,如何获得高纯度的脑微血管内皮细胞一直是体外研究的关键和难点。目的:探索一种简便易操作,高纯度的原代脑微血管内皮细胞的分离培养方法。方法:使用6-8周龄C57BL/6小鼠,经酶消化及梯度离心法获得微血管段,使用药物进一步纯化内皮细胞,利用CD31和GFAP免疫荧光染色鉴定内皮细胞纯度。使用Claudin-5免疫荧光染色鉴定紧密连接蛋白的表达情况。结果与结论:1细胞呈旋涡状或铺路石样排列、生长;2免疫荧光显示内皮细胞纯度达99%以上,并广泛表达紧密连接蛋白;3结果表明,实验建立了一种简便、易操作的,可以获得大量高纯度的原代小鼠脑微血管内皮细胞的培养方法。; 张作慧陈晨陈浩崔桂云花放; 关键词：内皮细胞荧光免疫测定血管内皮细胞脑微血管内皮细胞小鼠 CD31 CLAUDIN-5

阿尔茨海默病患者外周血单个核细胞Toll样受体4和9的表达水平: 2016年; 目的分析AD患者外周血单个核细胞Toll样受体（TLR）4和9的改变，寻找取材容易、特异性高的生物学标志物。方法纳入72例AD患者，60例年龄、性别匹配的健康状况良好的体检者作为对照组。收集相关临床资料，采集外周血液，分离单个核细胞，采用流式细胞术检测TLR4和TLR9的蛋白表达，采用Real-time PCR检测其mRNA的表达。结果Real-time PCR结果显示，与对照组相比，AD组TLR4的mRNA表达明显升高（1.43±0.27），而TLR9的mRNA表达明显降低（065±0.11），两组比较差异均有统计学意义（P〈0.05）。流式细胞结果显示，AD组TLR4的蛋白表达明显升高［（31.5±15.1）%比（10.2±7.5）%］，TLR9表达明显降低［（17.3±13.2）%比（43.7±20.6）］，差异均有统计学意义（P〈0.01）。结论外周单个核细胞参与AD的炎性反应，其TLR4和TLR9的表达改变，有可能作为AD诊断的生物学标准物，为AD的诊断提供新的思路。; 张作慧陈晨陈浩崔桂云花放; 关键词：阿尔茨海默病外周血单个核细胞

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陈晨