目的:检测膀胱癌细胞中SPOCK1(sparc/osteonectin,cwcv and kazal-like domains proteoglycan 1)基因的表达情况,并进一步研究下调SPOCK1基因表达对膀胱癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响。方法 :采用实时荧光定量PCR和蛋白质印迹法检测人输尿管上皮永生化细胞SV-HUC-1以及膀胱癌细胞株5637和T24中SPOCK1基因的表达情况。构建特异性针对SPOCK1基因的si RNA片段,并将其通过脂质体介导转染至膀胱癌5637细胞;同时设立未转染的空白对照组和转染无义序列的阴性对照组。采用实时荧光定量PCR法和蛋白质印迹法检测各组细胞中SPOCK1 m RNA和蛋白的表达差异。然后采用CCK-8法、划痕愈合实验和Transwell小室法分别检测SPOCK1基因表达下调后膀胱癌细胞增殖、迁移和侵袭能力的变化情况。结果 :膀胱癌细胞中SPOCK1基因表达水平高于输尿管上皮永生化细胞,尤以膀胱癌5637细胞中的表达水平最高(P值均<0.05)。SPOCK1 si RNA转染后,膀胱癌5637细胞中SPOCK1基因的表达明显下调(P<0.05),而膀胱癌细胞的增殖、迁移和侵袭能力均被明显抑制(P值均<0.05)。结论:膀胱癌细胞中SPOCK1基因存在过表达现象。下调SPOCK1基因表达可以降低膀胱癌5637细胞的增殖、迁移和侵袭能力。
