杨继辉
- 作品数：12 被引量：12H指数：3
- 供职机构：宁夏医科大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金留学人员科技活动项目择优资助经费宁夏回族自治区自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生农业科学生物学更多>>
- PCOS卵巢颗粒细胞中核糖体蛋白S6蛋白激酶表达的研究
- 2016年
- 目的:检测磷酸化核糖体S6蛋白激酶在PCOS卵巢颗粒细胞中的表达,探讨S6K1激酶表达与PCOS颗粒细胞增殖的关系。方法:分离行体外受精一胚胎移植的患者的卵泡颗粒细胞,接种于M199培养基进行原代培养,RT-PCR方法分析所培养的卵泡颗粒细胞S6K1基因表达及免疫荧光细胞化学染色法进行S6K1蛋白定位和western blot方法分析S6K1蛋白表达。结果:分离培养的人卵泡颗粒细胞经过RT-PCR扩增获得长度为212bp的特异性片段。免疫荧光细胞化学染色显示S6K1阳性染色定位于细胞胞浆,呈红色荧光。与正常组相比,经过Real-time PCR检测分析两组S6K1基因表达具有统计学差异(P<0.05),经过western blot检测分析两组S6K1蛋白表达具有统计学差异(P<0.05)。结论:与对照组相比PCOS患者颗粒细胞S6K1表达显著性降低,可能与PCOS颗粒细胞增殖缓慢有关。
- 杨继辉陈蕊马会明赵巍裴秀英
- 关键词：多囊卵巢综合症颗粒细胞
- 缺氧条件下NRF-1基因过表达的大鼠心肌细胞增殖和凋亡变化被引量：4
- 2018年
- 目的构建核呼吸因子-1(NRF-1)过表达的大鼠心肌细胞,观察缺氧条件下细胞增殖和细胞凋亡的变化。方法将大鼠心肌细胞H9C2分为NRF-1过表达组、空载体组和正常对照组,NRF-1过表达组和空载体组分别用NRF-1过表达慢病毒及空载体病毒进行转染,正常对照组不做处理。将三组细胞置于缺氧用三气培养箱中进行缺氧培养(37℃、1%O_2+5%CO_2+94%N2)24 h。采用实时无标记分析(RTCA)技术观察缺氧6、12、24 h时的细胞增殖水平,流式细胞仪检测缺氧24 h时细胞凋亡率,qRT-PCR法检测缺氧24 h时半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(caspase-3)mRNA的相对表达量。结果缺氧12、24 h时,NRF-1过表达组细胞增殖水平高于正常对照组和空载体组;缺氧24 h时,与空载体组和正常对照组比较,NRF-1过表达组细胞凋亡水平降低,且caspase-3 mRNA表达水平较低(P均<0.05)。结论 NRF-1过表达可以降低缺氧条件下心肌细胞的凋亡,从而提高心肌细胞在缺氧条件下的存活能力。
- 孙红丽杨继辉牛楠朱明星赵巍宋熔
- 关键词：缺氧心肌细胞半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3
- 基于慢病毒系统的双荧光标记多功能自噬流监测系统建立与应用
- 2019年
- 目的:构建能够用于稳定动态监测细胞自噬流变化和过表达基因的红色荧光蛋白-绿色荧光蛋白-鼠源LC3融合慢病毒多功能表达载体(PCDH-Duo-mRFP-eGFPph-LC3rat,PCDH-Duo),并构建小鼠腹腔巨噬细胞Raw264. 7稳转株观察自噬流变化。方法:应用基于PCR精确合成mRFP-eGFPph-LC3rat融合全基因,将其克隆至慢病毒表达载体PCDH-CMV-MCS-EF1a-GFP中,重组质粒经菌落PCR、酶切及测序分析正确无误后,包装慢病毒,转染Raw264. 7细胞,并利用流式分选术获取稳转株,经氯喹抑制自噬模型及Western blot鉴定eGFP蛋白表达确认其可靠性。结果:成功构建了PCDH-Duo重组慢病毒质粒,包被慢病毒并获得Raw264. 7稳定细胞系(Raw264. 7-PCDHDuo),可稳定表达双荧光蛋白,经3mmol/L氯喹作用6h后,能够稳定准确指示自噬流变化。结论:成功构建了基于慢病毒系统的双荧光标记多功能自噬流监测系统,为研究细胞自噬与编码基因及非编码基因之间的关系提供了方便有力的工具。
- 马占兵党洁党洁杨继辉霍正浩
- 关键词：慢病毒
- 一种小鼠解剖用固定装置
- 本实用新型公开了一种小鼠解剖用固定装置，包括底板，所述底板的底部固定连接有底座，所述底板的顶部固定安装有壳体，所述底板顶部的两侧均开设有限位槽，所述壳体内两侧底部均开设有旋转槽，所述底板顶部的靠中心位置设置有工作台，所述...
- 赵巍徐士梅杜先才朱明星王婵杨继辉陶佳刘成
- 文献传递
- 一种抗包虫病重组疫苗P29表位肽免疫小鼠后产生的免疫应答效应
- 本发明公开了一种抗包虫病重组疫苗P29表位肽免疫小鼠后产生的免疫应答效应，属于生物工程技术领域，本申请通过将KLH载体与申请人先前研究中筛选的T细胞和B细胞表位肽耦联构建了三种表位疫苗(rEg.P29<Sub>T</Su...
- 赵巍吕咏雪杨继辉赵殷奇朱明星徐士梅
- 多参数流式细胞术分选人骨骼肌源性血管内皮细胞和血管外膜细胞的方法被引量：6
- 2018年
- 背景:目前分离骨骼肌源性干细胞广泛应用的方法是差速贴壁培养法,而运用多参数流式细胞术分选人骨骼肌源性干细胞的研究较为少见。目的:探索利用多参数流式细胞分选术从人体骨骼肌组织中分选高纯度肌源性血管内皮细胞和血管外膜细胞的方法。方法:收集人体骨骼肌组织,用胶原酶(Ⅰ型和Ⅳ型)及分散酶消化、获得单个核细胞,通过多参数流式细胞分选术分选表型为CD56^+CD34^+CD144^+CD45^-的肌血管内皮细胞和表型为CD146^+CD45^-CD34^-CD144^-CD56^-的肌血管外膜细胞。结果与结论:(1)利用多参数流式细胞分选术分选肌血管内皮细胞和肌血管外膜细胞各14例,肌血管内皮细胞在人骨骼肌单个核细胞中占(0.04±0.01)%,肌血管外膜细胞在人骨骼肌单个核细胞中占(0.30±0.07)%;(2)将新分选的细胞经过流式细胞仪回测后,肌血管内皮细胞纯度达到(96.8±1.16)%,肌血管外膜细胞纯度达到(92.50±0.50)%,锥虫蓝染色检测肌血管内皮细胞存活率达到(95.58±1.10)%,肌血管外膜细胞存活率达到(95.15±0.67)%;(3)肌血管内皮细胞和肌血管外膜细胞均能在体外诱导分化为成骨细胞和脂肪细胞,表明二者具有良好的多向分化能力;(4)实验建立了利用多参数流式细胞分选术分选肌血管内皮细胞和肌血管外膜细胞的有效方法,经过分选所得的肌血管内皮细胞和肌血管外膜细胞纯度高、活性良好。
- 古晶晶杨继辉杨婷婷杨小萍郑波
- 关键词：人骨骼肌国家自然科学基金骨骼内皮细胞流式细胞术
- 绵羊外周血中T淋巴细胞基础免疫指标检测研究
- 背景:绵羊不仅是重要的牲畜品种,也是畜牧兽医研究中重要的大型动物模型。了解它们的基本免疫指标对于畜牧相关疾病及疫苗的研究具有重要意义。目的:通过对外周血T淋巴细胞基础免疫指标的检测,为绵羊相关的免疫学研究提供有意义的参考...
- 杨继辉吕咏雪吴长有赵巍
- 关键词：绵羊外周血T淋巴细胞免疫
- 一种细粒棘球蚴重组抗原P29优势表位肽筛选及应用
- 本发明公开了一种细粒棘球蚴重组抗原P29优势表位肽筛选，涉及生物工程技术领域，包括如下步骤：S1、表位肽设计；S2、B细胞表位混合肽的筛选；S3、B细胞表位单肽筛选；S4、B细胞优势表位肽的优化筛选；S5、T细胞表位混合...
- 赵巍杨继辉吕咏雪赵殷奇朱明星徐士梅
- miR-126a-5p在CD4<Sup>+</Sup>T细胞分化中的应用
- 本发明属于细胞工程和基因工程技术领域，具体涉及miR‑126a‑5p在CD4<Sup>+</Sup>T细胞分化的应用。所述miR‑126a‑5p的核苷酸序列为CAUUAUUACUUUUGGUACGCG。<Image fi...
- 朱明星杜先才徐士梅赵殷奇杨继辉杨慧赵巍
- 一种细粒棘球蚴重组抗原P29优势表位肽筛选及应用
- 本发明公开了一种细粒棘球蚴重组抗原P29优势表位肽筛选，涉及生物工程技术领域，包括如下步骤：S1、表位肽设计；S2、B细胞表位混合肽的筛选；S3、B细胞表位单肽筛选；S4、B细胞优势表位肽的优化筛选；S5、T细胞表位混合...
- 赵巍杨继辉吕咏雪赵殷奇朱明星徐士梅
