- miR-184对小鼠神经干细胞增殖的影响及其机制被引量：2
- 2017年
- 目的观察miR-184对小鼠神经干细胞（NSCs）增殖的影响及其机制。方法构建包装pHBLV-U6-GFP-miR-184基因过表达和pHBLV—U6-GFP-sh-miR-184基因干扰慢病毒载体和各自对照无义序列慢病毒载体，分离培养孕14d的CD1胎鼠大脑侧脑室下区的NSCs并鉴定。实验细胞分为过表达对照组、miR-184过表达组、干扰对照组和miR-184干扰组，各组细胞在感染对应的慢病毒后，用嘌呤霉素进行抗性筛选。筛选后，继续培养细胞至3代，实时定量PCR进行miR-184过表达验证。通过targetScan、iRTarBase、miRanda等软件预测 miR—184的靶基因并进行内源性验证，采用5-溴脱氧尿嘧啶核苷（Brdu）细胞渗入实验观察各实验组的增殖情况，通过Western blotting实验和实时定量PCR观察各组Notch信号通路相关蛋白Hes1和Hes5及其mRNA的表达情况。结果免疫荧光染色显示，90％的分离培养细胞呈巢蛋A（nestin）和Y性别决定转录因子2（Sox2）双阳性，miR-184过表达组的miR—184表达量是过表达对照组的（67．63±7．53）倍，差异具有统计学意义（P〈0．05）。Brdu细胞渗入实验结果显示与各自对照组比，miR-184过表达组的细胞增值率是过表达对照组的（1．47±0．05）倍，而miR—184干扰组的细胞增值率是干扰对照组的（0．84±0．03）倍．差异均具有统计学意义（P〈0．05）。iRTarBase和miRanda软件预测，Numblike蛋白（Numbl蛋白）作为miR-184的潜在靶基因，miR—184可以下调Numbl蛋白的表达，miR-184过表达组和miR-184干扰组的Numbl相对表达量分别是各自对照组的（0．73±0．07）倍、（1．30±0．05）倍，差异均具有统计学意义（P〈0．05），但miR—184并不能改变Numbl mRNA的表达水平。miR-184可抑制Numb1蛋白的表达．使Notch信号通路的下游相关蛋白Hes1和Hes5及其mRNA表达升高，差异均具有统计学意义（P〈0．05）。结论miR-184通过在蛋白翻译水平抑制Numb1�
- 黄佛宝张昊驹刘钰罡罗丹徐如祥戴宜武
- 关键词：神经干细胞NOTCH信号通路蛋白
- 阿维菌素抗胶质瘤作用及其相关机制研究
- 研究背景: 脑胶质母细胞瘤是常见的中枢神经系统原发性肿瘤，其恶性程度高、发病率高，病人预后差。化疗作为治疗恶性肿瘤的一个重要手段，然而药物使用一段时间后，绝大多数的肿瘤细胞都会产生耐药性，从而导致化疗的失败。根据美国癌...
- 罗丹
- 关键词：脑胶质母细胞瘤阿维菌素替莫唑胺细胞活性抗肿瘤作用
- 文献传递
- 基于整体理论孕期压力性尿失禁盆底形态学的超声评估
- 孕期压力性尿失禁(Stress Urinary Incontinence，SUI)发生率高，对患者生活质量影响大，发生机制尚不明。多个学者提出了有关于SUI发生机制的假说和理论，整体理论是目前普遍认可的理论。然而该理论多...
- 罗丹
- 关键词：发病机理盆底形态学超声评估
- 阿维菌素对胶质母细胞瘤U251细胞增殖、凋亡的影响及其机制探讨被引量：1
- 2017年
- 目的观察阿维菌素(AVMs)对胶质母细胞瘤U251细胞增殖、凋亡的影响,并探讨其相关机制。方法传代培养U251细胞,将细胞分为药物实验组和阴性对照组,药物实验组给予不同浓度的AVMs处理,阴性对照组不加AVMs。取药物实验组细胞,分别给予2、4、6、8、10、12μmol/L的AVMs,采用MTT法测算给药24、48、72 h后U251细胞的增殖抑制率。取药物实验组细胞,分别给予4、8μmol/L的AVMs培养72 h后,测算各组细胞凋亡率,检测各组细胞线粒体膜电位及细胞中的Caspase-3、Bcl-2、Bax蛋白。结果 2、4、6、8、10、12μmol/L的AVMs作用于U251细胞后,细胞增殖抑制率逐渐升高,AVMs作用24、48、72 h后U251细胞增殖抑制率也逐渐升高;AVMs对U251细胞的增殖抑制作用呈时间、剂量依赖性(P均<0.01)。AVMs作用72 h时对U251细胞增殖的IC_(50)为5.220μmol/L。阴性对照组与药物实验组4、8μmol/L亚组的细胞凋亡率分别为5.2%±0.16%、31.5%±0.43%、52.4%±0.72%,细胞线粒体膜电位分别为92.4±2.52、85.2±1.32、45.3±0.75,三组细胞凋亡率和线粒体膜电位相比,P均<0.01。阴性对照组和药物实验组4μmol/L亚组、8μmol/L亚组细胞中Caspase-3、Bax蛋白相对表达量依次升高,Bcl-2蛋白相对表达量依次降低(P均<0.01)。结论 AVMs可抑制U251细胞增殖并促进其凋亡,作用机制可能与降低细胞线粒体膜电位、调节凋亡相关蛋白表达有关。
- 罗丹罗亮杨志军黄佛宝王燕燕
- 关键词：阿维菌素脑胶质母细胞瘤U251细胞线粒体膜电位
- TPD52在胶质瘤中的表达水平及临床意义
- 2016年
- 目的探究TPD52在胶质瘤及正常脑组织中的表达及其临床意义。方法收集46例胶质瘤患者病例标本及瘤旁正常脑组织,应用荧光定量PCR、Western blot、免疫组织化学染色方法检测TPD52 mRNA、蛋白的表达量,并分析临床指标与TPD52表达量之间的关系。结果荧光定量PCR及Western blot结果具有一致性,均提示TPD52的表达量随胶质瘤病理分级升高,Ⅲ、Ⅳ级胶质瘤TPD52表达量明显高于正常脑组织、Ⅰ、Ⅱ级胶质瘤,差异有统计学意义(P<0.05)。免疫组织化学染色显示TPD52蛋白定位在胶质瘤细胞质中,67.4%病理标本高表达TPD52(或)。结论TPD52 mRNA与蛋白在胶质瘤细胞中高表达,其蛋白表达量与胶质瘤病理分级呈正相关性,与生存期呈负相关性,其可能是胶质瘤临床治疗的一个潜在基因靶点。
- 高兵兵秦浩秦家振孙移坤张昊驹刘晨侯江雷黄佛宝罗丹戴宜武
- 关键词：胶质瘤病理分级生存期
