郑典宝 作品数:15 被引量:68 H指数:6 供职机构: 南京中医药大学 更多>> 发文基金: 卫生部科学研究基金 国家自然科学基金 江苏省中医药管理局科技项目 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 更多>>
手术联合中药治疗精索静脉曲张伴精液异常60例临床研究 2011年 目的:探讨手术联合中医药治疗精索静脉曲张不育症的效果。方法:将60例患者随机分成两组,分剐采用精索内静脉高位结扎手术(A组)及手术后结合中药(B组)的方法进行治疗,分别检测术前、术后6—12个月精子参数。结论:手术及术后运用中医药治疗均能有效改善精液质量,并且中药组比单纯手术组的效果明显,指出手术后联合中药治疗是一个比较有效的途径。 郑典宝 胡斌 王剑锋 荆志涛关键词:精索静脉曲张 精液异常 手术疗法 中药治疗 条件增殖性腺病毒及其在前列腺癌治疗中的应用 2006年 条件增殖性腺病毒(cond itionally replicative adenovirus,CRAds)以其只能在肿瘤细胞内特异性地增殖并裂解肿瘤细胞的特性,而成为肿瘤研究的热点,其用于前列腺癌的治疗已进入I、II期临床试验。现就CRAds的发现、分子结构与功能特点、肿瘤靶向性的机理及其在前列腺癌中的应用作一综述。 郑典宝 郑骏年关键词:前列腺肿瘤 腺病毒科 携带人白细胞介素18基因的复制缺陷型腺病毒载体的构建、鉴定和滴度测定 2006年 目的构建人白细胞介素18(IL-18)基因复制缺陷型腺病毒表达载体。方法以质粒pJWIL—18为模板,设计并合成上、下游引物,利用多聚酶链反应(PCR)扩增获得IL-18基因片段,酶切后克隆至pCA13质粒,构建重组质粒pCA13IL—18。鉴定正确后,将pCA13 IL—18与含有腺病毒右臂的质粒pBHGE3共转染HEK293细胞,9-12天出现病毒空斑。提取重组腺病毒的DNA。进行PCR鉴定。大量扩增后,氯化铯梯度离心纯化腺病毒,测病毒滴度。结果酶切分析、序列测定、PCR验证表明,IL-18基因成功克隆到复制缺陷型腺病毒载体中。结论成功构建了表达人IL-18基因的复制缺陷性腺病毒载体。 毛立军 郑骏年 郑典宝 郝林 郑宏祥 裴东生关键词:白细胞介素18 腺病毒载体 表达Ki67基因小干扰RNA的选择性增殖溶瘤腺病毒的构建 被引量:6 2006年 目的构建表达肿瘤增殖基因Ki67小干扰RNA(Ki67-siRNA)的选择性增殖溶瘤腺病毒。方法设计有小发夹结构的Ki67-siRNA对应模板DNA序列,煺火处理后克隆至pCA13质粒,构建重组质粒pCA13-Ki67。用BglⅡ从pCA13-Ki67酶切出包含CMV启动子及Ki67-siRNA模板DNA序列的表达框,将此表达框克隆进选择性增殖腺病毒质粒pZD55,构建重组质粒pZD55- Ki67。将pZD55-Ki67与含有腺病毒右臂的质粒pBHGE3共转染293细胞,9~12 d后出现病毒空斑。提取重组腺病毒的DNA,聚合酶链反应(PCR)鉴定正确者即为选择性增殖溶瘤腺病毒ZD55- Ki67。大量扩增,氯化铯梯度离心纯化,测病毒滴度。结果成功构建了表达Ki67-siRNA的选择性增殖溶瘤腺病毒。结论成功构建的ZD55-Ki67为利用Ki67-siRNA靶向肿瘤治疗奠定了基础。 陈家存 郑骏年 毛立军 郑宏祥 郑典宝 刘俊杰 李望关键词:RNA干扰 腺病毒 基因表达 Ki67基因短发夹状RNA表达载体对肾癌细胞生长的抑制作用 被引量:15 2006年 目的研究针对Ki67基因的短发夹状RNA(shRNA)表达载体pSilencer-Ki67对人肾癌细胞生长的抑制作用。方法将pSilencer-Ki67转染人肾癌786-0细胞,24、48、72、120、144 h后分别采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)、Western blot技术检测Ki67 mRNA、蛋白表达,噻唑蓝(MTT)比色法检测细胞增殖,原位末端标记法检测细胞凋亡。结果pSilencer-Ki67转染后48 h 786-0细胞Ki67mRNA表达(34.1±1.7)%、蛋白表达(42.6±1.7)%降低最明显,与空质粒对照组[(97.7±0.9)%、(97.3±1.6)%]比较差异均有统计学意义(P<0.01)。pSilencer-Ki67处理后48 h细胞增殖抑制率(76.7±3.2)%最高,72 h凋亡细胞阳性率(74.3±5.9)%最高,与空质粒对照组[(7.0±0.5)%、(8.4±1.1)%]比较差异有统计学意义(P<0.01)。pSilencer-Ki67的这些作用可持续144 h。结论pSilencer-Ki67能有效、持续抑制人肾癌786-0细胞生长,有望成为肾癌基因治疗的有效工具。 郑骏年 陈家存 孙晓青 郑典宝 曹敬毅 温儒民 王军起 刘俊杰 史启铎 韩瑞发 马腾骧关键词:肾癌 短发夹状RNA 质粒 基因治疗 基因放射性核素反义治疗肾癌的体内外实验 被引量:2 2006年 目的:探讨Ki-67基因放射性核素反义治疗对人肾癌细胞生长及凋亡的影响。方法:125I标记的反义核酸(125I-ASODNs)处理人肾癌786-0细胞及荷瘤小鼠,采用免疫组化、Westernblot检测Ki-67表达;TUNEL法检测细胞凋亡。结果:肾癌细胞Ki-67抗原表达降低、Ki-67蛋白降低、凋亡细胞阳性率升高、小鼠肿瘤体积减小。结论:Ki-67基因放射性核素反义治疗能抑制肾癌细胞Ki-67基因表达及细胞增殖、促进凋亡。 郑典宝 郑骏年 孙晓青 陈家存 温儒民 李望 刘俊杰关键词:肾癌 反义寡核苷酸 放射性核素 KI-67基因 Ki67基因siRNA表达质粒的构建、鉴定及功能研究 目的:siRNA可有效、特异敲除靶基因mRNA。但合成的siRNA成本太大且作用时间短暂,使其应用受到限制。将siRNAs所对应的模板DNA双链序列克隆入质粒转染细胞,DNA模板在细胞内转录成小片段发夹状RNAs(shR... 孙晓青 郑典宝 郑骏年 陈家存 温儒民 曹敬毅 李望 刘俊杰关键词:SIRNA 酶切位点 文献传递 连续性护理干预对老年女性压力性尿失禁的影响 被引量:10 2016年 目的:探讨连续性护理干预对老年女性压力性尿失禁(SUI)的影响。方法:将60例老年女性SUI患者随机分为对照组和观察组各30例,对照组进行中药穴位贴敷,观察组在此基础上进行连续性护理干预,于疗程8周后比较两组疗效。结果:观察组有效率高于对照组(P<0.05)。结论:对行中药穴位贴敷治疗老年女性SUI患者同时给予连续性护理干预,能明显提高疗效。 刘京荣 胡斌 郑典宝关键词:压力性尿失禁 连续性护理 老年女性 女性膀胱颈梗阻的诊断与治疗 被引量:14 2008年 目的探讨女性膀胱颈梗阻的临床诊断和治疗方法。方法对36例女性膀胱颈梗阻患者行超声、膀胱尿道镜检查及尿流动力学检查,8例行保守治疗,28例行经尿道膀胱颈电切术(transurethral resection of bladder neck,TURBn)。结果36例经治疗后排尿通畅,尿流率增大,症状改善,无尿失禁及尿瘘发生。结论超声、膀胱尿道镜检查结合尿流动力学检查是女性膀胱颈梗阻的可靠诊断手段,TURBn是治疗症状严重、剩余尿多的女性膀胱颈梗阻的首选方法,具疗效稳定、安全性高、患者恢复快及术后并发症少等优点,但手术适应证及范围应严格控制。 王剑锋 郑典宝 荆志涛关键词:女性膀胱颈梗阻 肾癌G250抗原蛋白多糖(PG)区蛋白cDNA的克隆和序列测定 2006年 目的克隆肾癌G250抗原蛋白多糖(PG)区cDNA,为制备G250杂交瘤及抗G250的单克隆抗体奠定基础。方法从肾癌细胞786-0中提取总RNA,以RT-PCR方法扩增出全长360 bp的G250抗原PG区cDNA,将其与表达载体pCA13连接,转化大肠杆菌JM109,构建G250抗原PG区cDNA克隆。结果酶切及序列分析表明,与GenBank报道的G250抗原PG区cDNA序列完全一致。结论G250抗原PG区cDNA已成功地得到克隆。 郑典宝 郑骏年 郝林 武艺 刘俊杰 裴东生 胡书群 陈家存 孙晓青关键词:CDNA克隆