闫春玲
- 作品数：2 被引量：2H指数：1
- 供职机构：中国农业科学院生物技术研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：生物学更多>>
- 固氮斯氏假单胞菌四碳二羧酸转移酶DctPQM的跨膜结构分析与功能研究被引量：1
- 2003年
- 固氮斯氏假单胞菌(Pseudomonas stutzeri)A1501四碳二羧酸转移酶系由dctPQM基因编码。基因序列和结构分析表明,dctP,dctQ和dctM紧密连锁,并在核苷酸和氨基酸水平上与自生固氮菌棕色固氮菌的四碳二羧酸结合蛋白基因dctP和转运蛋白基因dctQM高度同源。经分析表明,DctP不含跨膜区,DctQ包含5个跨膜区,DctM包含12个跨膜区。为验证四碳二羧酸转运系统对固氮能力的增强作用,将含有完整dctPQM基因的DNA片段连接在自杀性转移质粒载体pSZ21的Tn5转座区域中,获得重组质粒pSZY6.采用三亲接合方法,经Tn5转座作用将dctPQM基因随机插入到野生型菌株A1501的染色体上,构建了重组菌株 A-142.经nptⅡ基因的PCR扩增实验证明,该重组菌株确实携带了额外拷贝的dct结构基因。该重组菌株以不同浓度的琥珀酸、延胡索酸和苹果酸(20,10和 5 mmol/L)为惟一碳源生长时,其固氮活性均明显高于野生型菌株A1501,表明额外拷贝的四碳二羧酸转移酶系编码基因dctPQM能增强受体菌的固氮能力。
- 闫春玲林敏宛煜嵩侯胜强平淑珍陈明张保明C.Elmerich
- 关键词：固氮活性
- 转dct结构基因固氮斯氏假单胞菌工程菌株构建及其特性研究被引量：1
- 2003年
- 固氮斯氏假单胞菌 (Pseudomonasstutzeri)A15 0 1是一种定殖于水稻根部的联合固氮菌。将含有A15 0 1四碳二羧酸转运系统 (Dct transportsystem)结构基因dctPQM的亚克隆大片段克隆到具有广泛宿主范围转移特性的质粒载体 pSZ2 1上。通过三亲接合试验 ,重组质粒 pSZY6中所携带的dctPQM基因随机转座插入到菌株A15 0 1的染色体基因组中 ,构建了含有额外拷贝dct结构基因的遗传工程菌株。在A15卡那霉素 (5 0 μg/mol)平板上 ,共筛选到约 6 0株转接合子。其中工程菌株A 136、A 115和A 14 2在以不同的四碳二羧酸如琥珀酸、延胡索酸和苹果酸 ,以及乳酸为唯一碳源生长时 ,表现了较高的固氮活性 ,其固氮水平明显高于野生型菌株A15 0 1。
- 闫春玲林敏徐玉泉平淑珍陈明张保明
- 关键词：固氮斯氏假单胞菌染色体
