张克忠
- 作品数：4 被引量：7H指数：2
- 供职机构：大连大学附属新华医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 氨基胍对大鼠胰腺移植保护作用的实验研究被引量：1
- 2008年
- 目的探讨诱导型一氧化氮合酶抑制剂氨基胍对大鼠移植胰腺的保护作用。方法糖尿病大鼠模型30只随机分成3组:(1)空白对照组(n=6),仅开腹手术,不作移植;(2)移植对照组(n=6),仅作胰腺移植;(3)氨基胍处理组(n=18),移植胰腺恢复血运前经阴茎背静脉注入盐酸氨基胍(AG)溶液,剂量分别为60,80,100mg/kg。再灌注4h后检测血清一氧化氮(NO)水平,血糖以及淀粉酶活性,定量分析胰腺组织中的结构型一氧化氮合酶(cNOS)和诱导型一氧化氮合酶(iNOS)活性,并对胰腺进行组织形态学和组织化学检查。结果与移植对照组比较,氨基胍处理组血NO水平及淀粉酶活性明显降低,胰腺病理损害较轻,其中以AG80mg/kg亚组效果更显著(P<0.01),且该亚组血糖及iNOS活性与表达也明显低于移植对照组(P<0.01)。结论诱导型一氧化氮合酶选择性抑制剂氨基胍在大鼠胰腺移植中起到保护作用。其作用机制可能与抑制NO的过量产生,减轻其作为自由基的细胞毒性有关。
- 李柏峰张克忠刘永锋程颖成东华李铁民
- 关键词：胰腺移植缺血再灌注氨基胍
- 牛磺酸对大鼠胰岛活性和功能的保护作用被引量：4
- 2008年
- 目的:探讨牛磺酸(taurine,Tau)在大鼠胰岛培养过程中对胰岛的保护作用及其机制.方法:实验Wistar大鼠分为2组,RPMI1640组和牛磺酸组(Tau组).流式细胞仪检测Caspase-9和磷酸化Akt阳性细胞比例,观察牛磺酸对Caspase-9及Akt的影响.RT-PCR检测单纯1640组和Tau组胰岛细胞的TNF-α、IL-1β、NF-κB和HO-1基因的表达.结果:胰岛单纯用RPMI1640培养1wk后激活的Caspase-9与加入牛磺酸后相比有统计学意义(41.03%±4.46%vs23.85%±3.09%,P<0.05).胰岛分离纯化后有明显的TNF-αmRNA、IL-1βmRNA、NF-κBmRNA、HO-1mRNA表达,随着培养时间的延长TNF-αmRNA、IL-1βmRNA、NF-κBmRNA表达逐渐减弱,HO-1mRNA表达逐渐增强.加入牛磺酸后胰岛TNF-αmRNA、IL-1βmRNA、NF-κBmRNA表达明显减弱,在6h,72h及1wk时(TNF-α:0.34±0.02,0.24±0.01,0.19±0.02;IL-1β:0.24±0.09,0.09±0.01,0.05±0.01;NF-κB:1.76±0.30,0.93±0.15,0.37±0.02)和单纯培养组(TNF-α:0.57±0.1,0.39±0.02,0.29±0.02;IL-1β:0.34±0.02,0.24±0.01,0.19±0.02;NF-κB:2.52±0.24,1.21±0.14,0.76±0.07)比较差异具有显著性(均P<0.05).HO-1mRNA的表达较单纯培养组明显增强且随着时间的延长表达更明显(3.74±0.10,4.33±0.29,5.28±0.29vs2.46±0.30,3.13±0.07,3.59±0.22;均P<0.05).结论:牛磺酸能抑制TNF-α、IL-1β和NF-κB转录并活化Akt,抑制细胞凋亡.
- 张克忠刘永锋张佳林
- 关键词：牛磺酸白细胞介素-1Β血红素加氧酶-1胰岛细胞逆转录-聚合酶链反应
- 牛磺酸对大鼠移植胰腺缺血再灌注损伤的保护作用被引量：2
- 2007年
- 目的:探讨牛磺酸在大鼠胰腺移植中对移植胰腺缺血再灌注损伤的保护作用及其机制.方法:采用大鼠胰十二指肠移植模型.Wistar大鼠30只随机分为三组(n=10):(1)对照组:CMU-1液保存6h再移植;(2)实验组A:CMU-1液+牛磺酸(5 mmol/L)保存6h再移植;(3)实验组B:CMU-1液+牛磺酸(10 mmol/L)保存6 h再移植(CMU-1液是本实验室配制的多器官保存液).于移植术后6h取静脉血作胰腺外分泌功能即血清淀粉酶测定,取胰腺组织作病理检查.通过免疫组化染色观察炎性细胞因子TNF-α及IL-1β表达情况.应用计算机图像分析系统测定其积分光密度值(IOD).结果:移植胰腺在通血后6h血清淀粉酶均升高,与对照组相比较,加入牛磺酸后淀粉酶升高较对照组降低(911.2±9.9,959.9±12.5 U/L vs 1239.5±68-3 U/L,P<0.05).随着牛磺酸浓度的增大其作用也显著.免疫组化结果显示,移植后6h胰腺组织TNF-α(12346.4±4933.69,16 016.33±4592.06 vs 22 039.71±4782.62,P<0.05及IL-1β(12 417.4±2222.9,1 5 047.68±4484.4 vs 19 284.46±3178.19.P<0.05)在各组均表达,但加入牛磺酸后能明显下调TNF-α及IL-1β的表达,各组内的差异具有显著性(P<0.05).光镜检查可见试验组的移植胰腺炎性改变明显减轻.结论:牛磺酸作为一种细胞保护剂能够抑制TNF-α和IL-1β的产生、抗细胞水肿,减轻胰腺缺血再灌注损伤,减轻胰腺炎症.
- 张克忠刘永锋程颖刘树荣王凤山石蕊赵宁
- 关键词：牛磺酸胰腺移植缺血再灌注损伤白细胞介素-1Β
- RGD肽保护大鼠胰岛活性和功能的实验研究
- 2011年
- 目的探讨RGD肽对分离纯化后的胰岛活性和功能的影响。方法将实验大鼠分成两组：1640组和RGD组。采用Ficoll不连续密度梯度离心纯化胰岛，浓度分别为：27％、25％、23％、20．5％和11％。1周后，用丫啶橙／溴乙啶（AO／EB）荧光染色观察RGD肽对胰岛活性的影响。胰岛素分泌功能检测：采用放免法检测培养液中胰岛素含量，计算胰岛素释放指数（SI）。流式细胞仪检测：caspase-9和磷酸化Akt阳性细胞比例，观察RGD肽对caspase-9及Akt的影响。结果采用改良梯度离心法，平均每只大鼠可获约600IEQ～700IEQ胰岛，YO／EB荧光染色，结果显示刚分离后胰岛活率〉95％。1640组培养1周后胰岛分泌指数为1．64±0．28，RGD组胰岛分泌指数为2．28±0．16，较1640组明显增加，差异具有统计学意义（P〈0．05）。流式细胞仪检测结果表明胰岛1640组培养1周后，激活的caspase-9为（22．66±3．56）％，RGD组激活的caspase-9为（10．54±1．96）％，较1640组明显降低13％，且其差异具有统计学意义（P〈0．05）；检测RGD对Akt磷酸化的影响，胰岛1640组培养1周后，Akt磷酸化占（31．47±4．08）％，RGD组磷酸化Akt占（61．054±6．03）％，较1640组明显升高，其差异具有统计学意义（P〈0．05）。结论RGD可通过Akt／PKB的磷酸化抑制细胞凋亡。
- 张克忠刘永锋张佳林
- 关键词：RGD肽胰岛活性胰岛功能
