殷果
- 作品数：3 被引量：11H指数：1
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- 同种异体移植物炎症因子-1在结直肠癌细胞增殖、迁移及凋亡中的作用被引量：11
- 2018年
- 目的探讨同种异体移植物炎症因子-1(AIF-1)在结直肠癌(CRC)进展中的作用以及可能的作用机制。方法采用免疫组织化学染色和Western blot的方法检测70例CRC患者癌组织及癌旁正常组织中AIF-1的表达水平,并分析AIF-1的表达与临床病理特征的相关性。然后将AIF-1过表达质粒(AIF-1)和阴性对照质粒(NC)转染至CRC细胞株SW480,探讨AIF-1在体外细胞中的功能。Ed U增殖实验和流式细胞术用来评估细胞增殖和细胞周期;Transwell迁移实验和Annexin V-APC/7-AAD凋亡检测试剂盒用来分析细胞迁移和凋亡;SB203580用来阻断p38 MAPK通路。最后用western blot的方法检测CDK4,Cyclin D1,P21,P27,MMP2,MMP9,Bax,Bcl-2,Bcl-xl,p38和p-p38的表达水平。结果 AIF-1在结直肠癌组织中的表达明显低于癌旁正常组织,其表达水平与淋巴结转移(P=0.008),TNM分期(P=0.003)和肿瘤大小(P=0.023)密切相关。体外增殖和周期实验结果显示,过表达AIF-1于SW480细胞后能降低Ed U细胞阳性率以及阻滞细胞的G1期(P<0.05);且Western blot结果显示过表达AIF-1于SW480细胞后能抑制CDK4、Cyclin D1的蛋白表达,增强P21、P27的蛋白表达。Transwell迁移结果显示过表达AIF-1能抑制SW480细胞的迁移(P<0.001),伴随着MMP2和MMP9的蛋白水平的下调。此外,AIF-1过表达能诱导SW480细胞凋亡(P<0.01),增强Bax和p-p38的蛋白水平,减弱Bcl-2和Bcl-xl的蛋白水平,而利用SB203580可以明显改善AIF-1过表达引起的凋亡。结论 AIF-1通过抑制细胞增殖和细胞迁移以及诱导细胞凋亡在结直肠癌中发挥肿瘤抑制作用,且AIF-1通过激活p38MAPK途径促进细胞凋亡。
- 艾晓兰姚芳王晓睛段东北李科胡子有殷果王梅吴炳义
- 关键词：结肠直肠癌增殖迁移凋亡
- 斑马鱼胚胎及成年斑马鱼端脑中神经胶质成熟因子β的表达观察
- 2017年
- 目的观察斑马鱼胚胎及成年斑马鱼端脑中神经胶质成熟因子β(GMFβ)的表达变化。方法采用整胚原位杂交技术检测斑马鱼胚胎中的GMFβ mRNA;采用Western blotting法检测斑马鱼胚胎中的GMFβ蛋白;采用免疫荧光组织染色法检测成年斑马鱼端脑中的GMFβ蛋白。结果斑马鱼胚胎中GMFβ mRNA在受精3~12 h呈广泛性表达;受精24 h主要表达于眼原基、端脑、间脑、中脑、后脑和脊髓;受精48 h以后主要表达于脑部和视网膜;受精72 h表达强度最高,之后逐渐减弱,受精7 d呈微弱表达。斑马鱼胚胎中GMFβ蛋白在受精3 h开始表达,之后逐渐升高,受精72 h表达强度最高。成年斑马鱼端脑中GMFβ主要表达于背侧端脑和腹侧端脑的背侧核,而腹侧端脑的腹侧核和皮质下区域均未见GMFβ表达。结论斑马鱼胚胎发育时期GMFβ逐渐集中于脑部,成年后GMFβ阳性细胞主要在端脑的增殖活跃区(中缝和背侧端脑)。
- 杜明君殷果
- 关键词：斑马鱼整体原位杂交蛋白印迹法
- Notch信号通路抑制剂DAPT改善酒精诱导的斑马鱼神经元分化障碍
- 2023年
- 目的探讨Notch信号通路在胎儿酒精谱系障碍(FASD)斑马鱼模型的神经元分化及及感觉-运动能力中的作用。方法首先,将斑马鱼胚胎分为二甲基亚砜(DMSO)组和50μmol/L氮-[氮-(3,5-二氟苯乙酰基)-L-丙氨酰]-S-苯基甘氨酸丁酯(DAPT,Notch信号通路抑制剂)处理组,检测比较两组斑马鱼的死亡率、孵化率以及畸形率;比较两组斑马鱼的身体长度;利用原位杂交和qRT-PCR技术检测两组神经干/前体细胞标志物sox2、神经前体细胞分化因子neurogenin1、神经元标志物huc的表达;检测两组在无刺激、强光、震动刺激情况下的行为学表现。其次,将斑马鱼胚胎分为DMSO组、1.5%酒精处理组、DAPT处理组、酒精和DAPT联合处理组,利用原位杂交和qRT-PCR技术检测各组sox2、neurogenin1、huc的表达,检测Notch信号通路相关基因(Notch)信号受体notch1a,促进神经发育的靶基因her8a及Notch胞内活性片段(NICD)的mRNA表达水平;检测各组在无刺激、强光、震动刺激情况下的行为学表现。结果50μmol/L DAPT处理斑马鱼胚胎后,受精后1 d(1 dpf)胚胎死亡率(P<0.01)显著增加,2 dpf孵化率显著降低(P<0.01),3 dpf畸形率(P<0.001)显著增加,15 dpf斑马鱼体长显著缩短(P<0.05);斑马鱼胚胎sox2表达水平显著降低(P<0.01),neurogenin1(P<0.05)和huc mRNA(P<0.01)表达水平显著增加;在无刺激、强光、震动刺激情况下,DAPT处理组的斑马鱼运动距离均显著缩短(P<0.001),运动速度均显著降低(P<0.05)。单独使用1.5%酒精处理斑马鱼胚胎后,notch1a、her8a及NICD的mRNA表达水平显著升高(P<0.05);1.5%酒精联合DAPT处理斑马鱼胚胎后,较酒精单独处理组,neurogenin1和huc mRNA表达水平显著增加,sox2 mRNA表达水平显著降低(P<0.01),在强光刺激下的运动距离显著变长,运动速度显著变快(P<0.05)。结论酒精上调斑马鱼胚胎Notch信号、抑制神经元分化并降低感觉-运动能力,而抑制Notch信号通路可改善斑马鱼胚胎�
- 殷果李荣刘岳飞王晓睛吴炳义
- 关键词：酒精神经元分化NOTCH信号通路DAPT
