王艺斐
- 作品数：3 被引量：7H指数：1
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- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 一种易于循环肿瘤细胞研究的4T1-G乳腺癌稳定细胞株的构建被引量：1
- 2018年
- 目的构建一种易于研究乳腺癌循环肿瘤细胞(CTCs)过表达绿色荧光蛋白GFP的4T1细胞株。方法通过慢病毒感染,使小鼠三阴性恶性乳腺癌4T1细胞稳定过表达GFP,构建4T1细胞株(4T1-G);将该细胞接种于BALB/c小鼠乳腺脂肪垫内,制作小鼠4T1-G乳腺癌原位移植荷瘤模型,应用免疫磁珠分选结合GFP荧光方法检测动物模型外周血中的循环4T1-G细胞。结果经慢病毒感染过表达GFP的4T1-G细胞其迁移与侵袭能力及上皮间质转化(EMT)表型标志物的表达与亲本4T1细胞无显著性差异。4T1-G细胞接种BALB/c小鼠后,在接种部位观察到肿瘤生长,通过免疫磁珠分选结合GFP荧光成功分选小鼠乳腺癌模型外周血中的循环4T1-G细胞。结论 4T1-G乳腺癌GFP稳定表达细胞株不仅其荧光特性易于CTCs的确认,而且保持亲本细胞的EMT表型和侵袭特性,因此,4T1-G乳腺癌GFP稳定表达细胞株的构建为开展CTCs及肿瘤转移的整体动物研究提供一个良好的模型。
- 刘淑荣丁怡万晓庆成丛丛王艺斐史立宏路中王丽华王丽华
- 关键词：乳腺肿瘤绿色荧光蛋白循环肿瘤细胞肿瘤转移
- 循环microRNAs的外泌形成机制及其对乳腺癌侵袭和转移的影响被引量：6
- 2017年
- 目前乳腺癌的临床诊疗主要依赖影像学和相对较少的预后/预测指标(如雌激素受体、孕激素受体、HER2等).这些生物标志物主要是基于原发肿瘤病灶的生物学检测,可用于转移或复发的检测指标很少,尤其是在切除肿瘤原发灶后,复发监测很困难.循环cell-free microRNAs(circulating cf-miRNAs,或简称circulating miRNAs)的发现为改变现有乳腺癌临床诊疗模式提供了可能.Cell-free miRNA通过外泌体、微囊或转运蛋白的主动外泌机制,可能在循环miRNA的形成中起着重要作用.Cell-free miRNA特别是circulating miRNA不仅自身可以作为信号分子影响肿瘤细胞和组织微环境,而且还可以与其他信号通路发生交互通讯来调控肿瘤部位新生血管的形成和肿瘤细胞表型的上皮-间质转换,影响乳腺癌的侵袭和转移.本文综述了循环miRNA的特征与分泌机制,特别是乳腺癌相关的循环miRNA参与作为一种液体活检生物标志物在乳腺癌诊断、预后评价和疗效评估的临床意义.
- 万晓庆王学健王艺斐姜雨路中史立宏丁怡王丽华
- 关键词：MICRORNACELL-FREEMICRORNAS循环MICRORNA乳腺癌
- 乳腺癌肿瘤标志物血浆cell-free DNA含量的Sybr Green荧光定量分析
- 2019年
- 目的建立一种基于Sybr Green染色的cfDNA荧光定量法定量分析血浆中肿瘤液体标记物cfDNA的含量,并评估在临床乳腺癌患者和动物模型中的应用价值。方法从血浆中提取的cfDNA加入Sybr Green染料读取荧光值对其定量,同时应用qPCR定量检测cfDNA中管家基因GAPDH与之对比,并在从4T1乳腺癌自发转移性小鼠动物模型和临床乳腺癌患者的血液样品中进一步验证。结果 Sybr Green荧光染料法测得的cfDNA含量与由qPCR实验所获得的结果呈一致性。临床样本和动物模型均显示乳腺癌组的血浆cfDNA含量明显高于健康对照组。且在4T1乳腺癌自发转移性小鼠动物模型中发现其血浆cfDNA浓度与乳腺癌瘤重之间呈正线性相关。结论基于Sybr Green染色的cfDNA荧光定量法是一种简单、稳定、可靠和敏感的分析方法,不仅可用于定量分析临床乳腺癌患者和动物模型中血浆肿瘤液体标记物cfDNA的含量,而且cfDNA定量分析还可以作为反映肿瘤负荷的有效指标。
- 王艺斐王学健路中史立宏王丽华王丽华
- 关键词：乳腺癌SYBR定量PCR
